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- 2025年11月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 英文名：
HotStarTaq DNA Polymerase
- 保质期：
已收到实际货物为准
- 供应商：
北京诺博莱德科技有限公司
- 保存条件：
已收到实际货物为准
高特异性扩增，所需优化次数少
- 所需优化次数少
- PCR特异性高
- 操作方便，可在室温下构建反应体系
不同于抗体介导的方法，HotStarTaq DNA Polymerase应用化学介导的热启动，可确保聚合酶在PCR初始加热阶段完全没有活性。HotStarTaq DNA Polymerase提供独特的QIAGEN PCR Buffer，将非特异性扩增产物、引物二聚体和其他污染降至最低。一种新型的添加剂Q-Solution，可实现难扩增的模板（如GC含量高的模板）高效扩增。
Performance
每一批HotStarTaq DNA Polymerase都经过全方位的质量控制测试，包括：严格的PCR特异性和具有可重复性的试剂，即使低拷贝的靶分子也可扩增。通过检测，HotStarTaq DNA Polymerase可确保高度特异性和在热启动PCR中的卓越表现（参见"Higher specificity with different primer–template systems"、"Superior performance"和表格）。该试剂盒提供的新型PCR缓冲液使得在多种PCR条件下都维持高特异性，无需优化（参见"Tolerance to variable magnesium concentration"）。试剂盒中的Q-Solution可进一步优化PCR（参见"Amplification of difficult templates"）。总之，这些组合确保了在多种应用中的特异性扩增（参见"Effect of hot start on RT-PCR performance"和"Highly sensitive single-cell PCR"）。
| HotStarTaq DNA Polymerase | Supplier AII提供的热启动酶 | 抗体介导 | 手动 | 蜡屏障 | |
|---|---|---|---|---|---|
| 特异性扩增 | ++ | + | + | +/– | +/– |
| PCR优化需求 | ++ | +/– | +/– | – | – |
| 易用性 | ++ | ++ | + | – | – |
HotStarTaq DNA Polymerase特性
浓度：5 units/µl
重组酶：是
底物类似物：dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP
延伸速度：72°C条件下2–4 kb/min
酶半衰期：97°C条件下10 min，94°C条件下60 min
扩增效率：≥105倍
5'–>3'外切酶活性：是
额外添加A：是
3'–>5' 外切酶活性：否
核酸酶污染：否
蛋白酶污染：否
RNases污染：否
自启活性：否
Principle
HotStarTaq DNA Polymerase，一种经修饰的Taq DNA Polymerase，确保热启动PCR的高度特异性。该试剂盒包括新型的双阳离子PCR缓冲液、Q-Solution和MgCl2。
HotStarTaq DNA Polymerase
HotStarTaq DNA Polymerase以非活性形式提供，常温下没有聚合酶活性。避免PCR构建和循环初始阶段低温条件下非特异性引物的延伸和引物二聚体的形成（参见"Superior performance in hot-start PCR"和"Higher specificity with different primer–template systems"）。95°C条件下孵育15分钟即可激活HotStarTaq DNA Polymerase，这个步骤可整合入已有的热循环程序中。
QIAGEN PCR Buffer
QIAGEN PCR Buffer通过提高每个PCR扩增退火过程特异性引物的结合比例，确保PCR每个循环特异性扩增（参见"Increased specificity of primer annealing"）。独特的KCl和(NH4)2SO4平衡组合，使得该缓冲液与传统的PCR缓冲液相比在很宽的温度和Mg2+浓度范围内都有严格的引物退火条件和高度的特异性，无需进行耗时的优化（参见"Tolerance to variable magnesium concentration"）。
Q-Solution
该产品同时提供Q-Solution，一种新型的PCR添加剂，通过更改DNA熔解行为促进难扩增模板的扩增。这种独特的试剂可进一步优化由模板引起的表现不理想的PCR，如过多的二级结构和富含GC的模板（参见"Amplification of difficult templates"）。不同于DMSO和其他PCR添加剂，Q-Solution的浓度是确定的，没有毒性，并且保证PCR的纯度。而且PCR中加入Q-Solution不会影响PCR的准确性。
Procedure
HotStarTaq DNA Polymerase提供高效、经优化的实验方案，用于快速、方便的构建PCR反应体系。95°C条件下孵育15分钟激活HotStarTaq DNA Polymerase，可以整合入已有的热循环程序。反应可在室温下建立，更加方便和易于使用（参见"HotStarTaq procedure"）。
Applications
HotStarTaq DNA Polymerase适合多种应用，包括各种富有挑战性的研究，如各种扩增应用：
- 复杂的基因模板
- 复杂的cDNA模板（如RT-PCR）
- 低拷贝的靶序列（如单细胞PCR）
- 多重引物对反应
| Features | Specifications |
| 应用 | PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low-copy targets |
| 酶活 | 5' -> 3' exonuclease activity |
| 预混液 | No |
| 反应类型 | PCR amplification |
| real-time或终点法PCR | Endpoint |
| 样本/目标类型 | Genomic DNA and cDNA |
| 单一或多重 | Single |
| 有/无热启动酶 | With hotstart |
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| 商品编号 | 商品品名 | 规格 | 品牌 |
| 203205 | 热启动PCR DNA聚合酶 | 1000U | Qiagen |
| 203203 | 热启动PCR DNA聚合酶 | 250U | Qiagen |
| 203209 | 热启动PCR DNA聚合酶 | 25000U | Qiagen |
| 203207 | 热启动PCR DNA聚合酶 | 5000U | Qiagen |
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文献和实验Equipment And Reagents For Real-Time PCR
and two-step RT-PCR) and the QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit (for one-step RT-PCR) enable rapid, accurate, and inexpensive quantification of DNA, cDNA, and RNA targets on all types of real-time cyclers. HotStarTaq® DNA Polymerase in the master mix
72 1min 2cycles 94 30s 59 30s 72 1min 2cycles 94 30s 58 30s 72 1min 2cycles ........ 94 30s 51 30s 72 1min 2cycles 94 30s 50 30s 72 1min 20cycles 72 5min六、hot start PCR 热启动PCR是除了好的引物设计之外，提高PCR特异性最重要的方法之一。尽管Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度在72℃，聚合酶在室温仍然
cycles72 5min6. hot start PCR热启动PCR是除了好的引物设计之外，提高PCR特异性最重要的方法之一。尽管Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度在72℃，聚合酶在室温仍然有活性。因此，在进行PCR反应配制过程中，以及在热循环刚开始，保温温度低于退火温度时会产生非特异性的产物。这些非特异性产物一旦形成，就会被有效扩增。在用于引物设计的位点因为遗传元件的定位而受限时，如site-directed突变、表达克隆或用于DNA工程的遗传元件的构建和操作，热启动PCR尤为有效。限制Taq DNA聚合酶
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