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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
48/63 Panel
- 规格:
set
产品名称:K48/K63 Panel连接的二泛素底物(IQF-DiUb) 48/63 Panel
产品规格:set
产品描述:LifeSensors的二泛素底物代表了一类新的底物,用于连续荧光测量真正的异肽酶活性。野生型泛素C末端通过异肽键与第二泛素分子的赖氨酸63(K63)缀合,所得的双泛素形成内部猝灭的荧光FRET对(IQF)。每个泛素用单个分子的荧光报道分子(即TAMRA)或高效的猝灭荧光团标记。通过去泛素化酶切割IQF DiUb导致荧光团与猝灭剂分离并随后增加观察到的荧光。
产品特点:优势:IQF-DiUbs提供灵敏,快速,稳定的酶活性荧光读数,筛选化合物干扰最小;该方法在生理上测量其他目前可用的商业化去泛素化酶相关的异肽键的切割,而不是测定的线性肽键;多种DiUbs可以为您的酶选择最佳底物。
保存建议:建议收到产品后置于-80℃中保存(>6个月),4度可以稳定保存4-6个月。
点击:K48/K63 Panel连接的二泛素底物(IQF-DiUb) 查看更详细产品说明,更多应用、储存、价格、货期等信息请致电垂询中国区域授权总代理艾美捷科技有限公司。更多特色试剂盒、特色抗体以及特色试剂等产品评论,请点击查看每日生物评论网站。
背景资料:二泛素底物代表用于切割真正的异肽键的一类新的连续测定底物。它们基于内部猝灭的荧光FRET对(IQF)的形成,其中荧光猝灭剂位于一个泛素部分上,荧光染料位于第二个上。泛素通过一个泛素的C末端甘氨酸和第二泛素中赖氨酸残基的e-氨基之间的异肽键连接而连接。对于DiUb48类,是赖氨酸48,对于DiUb63类,它是赖氨酸63。每个双泛素底物通过不同位置的位点特异性标记制备(K63-1-2-3-4-5-6或K48-1-2-3-4-5-6)以便允许针对单个DUB优化给定的双泛素底物。重要的是,引入荧光团或猝灭剂残基不影响泛素分子的天然结构。泛素的产生使用生理底物的异肽酶测定代表了在真核蛋白质组研究中该重要结构域的重大进展。
LifeSensors目前主要的产品有400多种,主要覆盖泛素和泛素蛋白酶体通路等科学应用领域,包括抗体、酶、蛋白质等试剂和试剂盒产品,并且产品线在不断的扩大中。其原核和真核蛋白表达系统SUMOpro和SUMOstar已被世界范围内的学术、政府研究机构和制药、生物技术公司广泛应用。公司开创了两大独家技术平台:用于细胞信号和药物发现的泛素蛋白酶体系统(UPS),以及增强目的蛋白在大肠杆菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞中表达与纯化的SUMO融合表达系统。
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文献和实验化。最常见的形式是 H2A 上 K119 和 H2B 上 K123(酵母)/K120(脊椎动物)的单泛素化。H2A 单泛素化与基因沉默有关,而 H2B 与转录激活有关。 多聚泛素化较少见,但在 DNA 修复中也很重要。H2A 和 H2AX 在 K63 上的多聚泛素化为 DNA 修 复蛋白(如 RAP80)提供了一个识别位点。 酶调节 与其他组蛋白修饰一样,H2A 和 H2B 的单泛素化具有可逆性,并受到组蛋白泛素连接酶和去泛素化 酶的严密调控。 单泛素化 H2A:多梳蛋白家族 H2
共沉淀方法分离特定蛋白质及其结合蛋白(包括被泛素化修饰的蛋白)。分离出的蛋白经SDS电泳后用泛素抗体进行western blot分析,可以鉴定具体哪个蛋白发生了泛素化修饰以初步判断某蛋白具有泛素化功能。 2体外泛素标记突变位点 将研究蛋白(被泛素化的蛋白)通过蛋白提取试剂盒提取内源性蛋白或通过基因工程技术重组表达后提纯。用k63或k48连接的泛素链肽段系列酶E1、E2、E3在适当条件下体外孵育,然后用western blot和泛素化抗体检测。该方法可以明确
() #交换 x 轴和 y 轴> p + ylim(0,15) #如果想截取某一段可以用此命令设置值域。> p + scale_x_continuous(breaks =seq(18,34,50) ) #设置刻度线位置> p + theme(axis.text.x = element_text(angle = 90,family = "Times",face = "italic",colour = "darkred",size=rel(0.9))) # angle = 90 设置字体角度, family
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