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- 技术资料
- 样本:
血清、血浆、血小板和尿液
- 库存:
预定
- 标记物:
链霉亲和素碱性磷酸酶
- 适应物种:
人
- 应用:
仅用于科研
- 检测方法:
ELISA
- 检测范围:
体外检测
- 供应商:
深圳市科润达生物工程有限公司
- 规格:
96T
【中文名称】:5-羟色胺检测试剂盒(酶联免疫法)
【英文名称】:Serotonin ELISA
【5-HT产品规格】
96T
【5-HT预期用途】
试剂盒可用于人血清、血浆、血小板和尿液中五羟色胺的体外定量检测。进一步的研究表明:此试剂盒还可用于组织匀浆和细胞培养上清液的研究
【5-HT前言简介】
五羟色胺是色氨酸代谢的中间产物,它主要存在于肠嗜铬细胞、血清素激活的神经元和血小板中,它已被确定为是中枢神经系统的一种神经递质。循环血液中的五羟色胺几乎都集中于血小板内。循环五羟色胺浓度的变化可反映出人体的一些病理变化,这些病理变化包括:慢性肌紧张性头痛、精神分裂症、高血压、舞蹈症、杜氏肌肉萎缩症和早期急性阑尾炎。血清五羟色胺的检测对类癌综合征的检测具有重要临床意义。人们预计:在不久的将来,人们对血小板内五羟色胺的研究兴趣(包括五羟胺的吸收及释放动力学研究)应该会不断增长。
【5-HT检测原理】
样品准备(将五羟色胺转变为N-乙酰五羟色胺)是样品稀释的一部分,将每一份样品分别与酰化试剂一起温育就可以得到酰化的五羟色胺。此实验采用的是竞争性ELISA的原理,生物素标记的和非生物素标记的抗原竞争性结合到一定数量的抗体结合位点上。最后,结合到抗体上的生物素标记抗原的量与样品中被分析物的浓度成反比。当反应系统达到平衡后,洗板除去未结合的生物素标记抗原,用抗生物素碱性磷酸酶做标记、对硝基 苯磷酸做底物来检测结合到抗体上的生物素标记抗原的量。用已知标准品做一条标准曲线,将未知样品的酶活性在标准曲线上进行定标就可以得到未知样品中五羟色胺的浓度。
【5-HT储存条件】
试剂盒和运输环境和储存环境温度为2-8℃,避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。打开了的的试剂盒在有效期内稳定,前提是要将试剂盒用袋子密封并储存于2-8℃下。
【5-HT试剂盒组成成分】
| 注意 | 试剂盒有足够做96份单孔检测或48份双孔检测所需的试剂成分。 |
| 数量 | 标记 | 成分 |
| 1×12×8 | MTP | 包被板,可拆,微孔中包被了羊抗兔抗血清。 |
| 1×8ml | ANTISERUM | 五羟色胺抗血清,蓝色,即用,内含:兔抗血清、磷酸缓冲液和0.1%的NaN3。 |
| 1×8ml | BIOTIN | 五羟色胺生物素,黄色,即用,内含0.1%的NaN3。 |
| 1×0.3ml | ENZCONJ CONC | 酶联物,100倍浓缩,内含链霉亲和素碱性磷酸酶、Tris缓冲液、HCl和<0.1%的NaN3。 |
| 1×7×1ml | CAL A-G | 标准品A-G,0、0.08、0.24、0.73、2.2、6.6、19.8ng/ml, 0、0.45、1.4、4.1、12.5、37.4、112.3nmol/l 即用,内含酰化的五羟色胺、磷酸盐缓冲液和<0.1%的NaN3 |
| 1×2×0.5ml | CONTROL 1+2 LYO | 质控品1+2,冻干,内含人血清和<0.1%的NaN3。具体浓度及可允许范围请见试剂瓶标签。 |
| 1×3ml | ACYLREAG | 酰化试剂 内含乙-酸酐和丙-酮,即用 |
| 1×50ml | ASSAYBUF CONC | 检测缓冲液,10倍浓缩,内含磷酸缓冲液、BSA和<1%的NaN3。 |
| 2×50ml | WASHBUF CONC | 洗涤液,20倍浓缩,内含磷酸缓冲液、吐温和<0.1%的硫柳汞。 |
| 2×13ml | P N P P SUBS | 底物液,即用,含P N P P。 |
| 1×15ml | P N P P STOP | 终止液,即用,内含1M的NaOH |
| 3× | FOIL | 封板纸 |
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文献和实验针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
),或者转化1 μmol的有关基团的酶量。 2) ELISA试剂盒检测原理 ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法(图A)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图B)等等。 抗体
、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。12、底物是光敏感的,要在临用前现配。13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。15、待检样品要澄清,否则会影响结果。16、温浴时间应遵守试剂盒规定。17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。二、在使用ELISA试剂盒时,出现问题怎么办?下面
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