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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
912
- 英文名:
Recombinant Mouse Stem Cell Factor
- 保质期:
2~7天
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冻干蛋白可在-20℃长期保存,室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖重组小鼠SCF(干细胞因子)北京价格在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:重组小鼠SCF(干细胞因子)北京价格
编号:JN0249
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
英文名:Recombinant Mouse Stem Cell Factor
品牌:百奥莱博
产地:北京
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备,目的基因编码的Lys26-Ala189表达纯化而来。
SCF质量控制:>95%(还原性SDS-PAGE)。
SCF制剂:冻干品
SCF保存:
冻干蛋白可在-20℃长期保存,室温也可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天。
复溶后建议分装冻存在-20℃,可保存3个月,应避免反复冻融。
SCF复溶:
1、试剂开盖前请先离心。
2、复溶浓度应大于100μg/ml.
3、冻干蛋白溶于ddH2O中
4、复溶后根据使用量分装保存,避免反复冻融。
关于SCF:
Mouse stem cell factor (SCF), is the ligand for the receptor-type protein-tyrosine kinase KIT. It plays an essential role in the regulation of cell survival and proliferation, hematopoiesis, stem cell maintenance, gametogenesis, mast cell development, migration and function, and in melanogenesis. KITLG/SCF binding can activate several signaling pathways. It also promotes phosphorylation of PIK3R1, which is the regulatory subunit of phosphatidylinositol 3-kinase, and subsequent activation of the kinase AKT1. KITLG/SCF and KIT also transmit signals via GRB2 and activation of RAS, RAF1 and the MAP kinases MAPK1/ERK2 and/or MAPK3/ERK1. KITLG/SCF and KIT promote activation of STAT family members STAT1, STAT3 and STAT5.
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重组小鼠SCF(干细胞因子)北京价格关键词:重组小鼠SCF,JN0249,重组小鼠SCF蛋白,重组SCF,重组小鼠干细胞因子
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·T4连接酶
编号:JN0066
英文名称:T4 DNA Ligase
规格:28KU
T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的连接反应,也能催化双链RNA 5´-磷酸末端和3´-羟基末端间的连接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上反应均需消耗ATP。
产品组成:
| 组份 | 体积 |
| T4 DNA连接酶(350U/μl) | 80μl |
| 2×Quick Ligation Buffer | 1ml |
| 10×T4 DNA Ligation Buffer | 1ml |
产品特点:
随酶附带10×T4 DNA Ligation Buffer及独特配方的2×Quick Ligation Buffer提供给您更多的选择:而使用10×T4 DNA Ligation Buffer,16℃过夜连接可获得最高的连接效率;使用快连Buffer在室温(25℃)下,仅需5分钟即可完成粘性末端或平滑末端DNA片段的连接反应。
产品用途:
1、DNA片段和载体DNA的连接。(参见实验方案)。
2、DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。
使用建议:
1、粘末端的连接反应:插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要,此比例在2-6之间最好,低于2:1就会导致较低的连接效率,高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。
2、平滑末端的连接反应:平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时,可提高DNA浓度,将使用酶量增加到突出末端量的2~5倍左右。
3、向粘粒或噬菌体进行连接反应:可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1,同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05~0.1μg/μl以上)
4、反应温度:该酶的最适温度为37℃,由于热稳定性较差,因此长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室温下进行反应。
5、抑制剂:T4 DNA连接酶要求Mg2+,因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用,最好先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。
应用实例:
图例1 )在25℃,用不同活性单位(2U、4U、6U)T4 DNA连接酶与λDNA/Hind III片段作用10分钟后的结果以及连接产物灭活T4连接酶后再次使用Hind III酶切结果。
泳道1:λDNA/Hind III;
泳道2:λDNA/Hind III+2U T4 Ligase;
泳道3:λDNA/Hind III+4U T4 Ligase;
泳道4:λDNA/Hind III+6U T4 Ligase;
泳道5:λDNA/Hind III ,T4 Ligase连接产物,Hind III酶切
活性定义:在20μl的连接反应体系中, 6μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时,有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个单位。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
快速连接步骤:
1、取50ng载体和3倍摩尔量的插入片段,用双蒸水调整总体积为10μl。
2、加入10μl 2×Quick Ligation Buffer,混匀。
3、加入0.5~1μl T4 DNA连接酶,充分但轻柔混匀(切勿剧烈震荡,可能导致酶部分失活)。
4、稍事离心,置于室温(25℃)作用5分钟。
5、冰上放置,转化(如不立即进行转化实验请冻存于-20℃)
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