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- 百奥莱博
- JN0037-RXF
- 北京
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
607
- 英文名：
Multiplex PCR Kit
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货多重PCR扩增试剂盒批发在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。
名称：多重PCR扩增试剂盒
编号：JN0037
规格：50μl(100次)
英文名：Multiplex PCR Kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒针对多重PCR的高产需求及DNA聚合酶的强聚合能力而优化，可在同一个PCR反应体系中，对多个基因使用多对引物同时进行特异性扩增（最多可加入10对引物）。当引物对较多时，可适当添加HotStart Taq DNA聚合酶和dNTPs以达到良好的扩增效果。
产品用途：常规PCR鉴定、高产量PCR、高通量PCR、多重PCR。
试剂盒组成：
| 组份 | 体积 |
| 5×Multiplex PCR Buffer（5U/μl） | 1ml |
| HotStart Taq DNA聚合酶（5U/μl） | 100μl |
| dNTPs（10mM） | 250μl |
使用建议：
1、使用本制品时务必将Buffer反复混匀后再加，避免因组分不一导致结果差异；
2、配置和分装反应液时请一定使用新的（无污染的）枪头以避免污染；
3、如扩增条带多，可适当添加酶和dNTPs；
4、当多重PCR扩增产物的长度均在1kb以内时，使用3%～4％浓度的Agarose gel进行电泳分离效果最佳。
多重PCR引物设计注意事项：
1、尽量减小各引物间的Tm值差；
2、目的片段长度尽量在1kb以下；
3、引物的长度保持在22～30bp，GC含量在50～60%为宜，并避免局部区域GC或AT的含量过高；
4、引物应用于多重PCR前要预先对各目的基因进行扩增，以确认引物的特异性及反应性能。
应用实例：
图例一）50μl扩增体系中，以50ngλDNA为模板，对长度范围在100-800bp之间的片段的扩增结果。
泳道M：DL2000 DNA Marker；泳道1,泳道2：使用7对不同引物同时扩增的结果
常用反应体系(50μl)：
| 成分 | 体积 |
| 5×Multiplex PCR Buffer | 10μl |
| 上游引物*n | 0.2-1.0μM（终浓度） |
| 下游引物*n | 0.2-1.0μM（终浓度） |
| 模板 | 50ng |
| dNTPs | 1.5μl |
| HotStart Taq DNA聚合酶 | 1μl |
| ddH2O | 至50μl |
常用PCR循环：
| 当扩增片段<3K： | |
| 94℃ | 5min |
| 30次循环 | 94℃,20s 57℃,20秒 72℃,根据产物长度调整,1kb/min |
| 72℃ | 5min |
| 4℃ | 保温 |
常见问题及解答：
1、没有扩增产物或量少：保证每一管的引物，buffer，酶等已全部加入；使用高质量的引物，并检测引物是否降解；确认模板的质量及浓度；适度提高缺失（或低产）条带对应的引物用量；确保预混体系已混匀彻底；
2、存在非特异性扩增：检查单对引物的扩增性能与特异性；检查酶用量是否过多，酌情减少酶的用量；降低模板使用量；
3、电泳时条带模糊：检查引物是否出现质量问题，比如降解；减少起始模板量；降低电泳电压，更换新的电泳缓冲液。
储存条件：-20℃
关键词：JN0037,Multiplex PCR Kit,多重PCR扩增试剂盒
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| 编号 | 名称 |
| JN0345 | 重组人白介素IL-4(白细胞介素4) |
| JN0461 | 重组人CD27(TNFRSF7) |
| JN0467 | 重组人TNF-α(C端His标签) |
| JN1328 | 重组人VAPB |
| JN1684 | 重组人TFPI-2(组织因子途径抑制物2) |
| JN1257 | 重组人SEPHS1 |
| JN1334 | 重组小鼠PLXDC2 |
| JN0132 | 3α类固醇脱*酶 |
| JN0668 | 重组人酶原粒膜蛋白16(ZG16) |
| JN0633 | 重组人CD300LG(CLM-9) |
| JN0918 | 重组人过氧化*酶(CAT) |
| JN1323 | 重组人Robo4 |
| JN1093 | 重组人轴突生长导向因子4B(信号素4B)(Semaphorin 4B)(Sema4B)(C端带Fc和His标签) |
 |
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| JN1933 | 重组人脂肪酸结合蛋白5(FABP5) |
| JN1547 | 重组人IL-23 R |
| JN1892 | 重组小鼠CD33(Siglec-3) |
| JN0186 | 细菌蛋白提取试剂 |
| JN1956 | 重组人Stathmin蛋白 |
| JN0170 | AviTag融合蛋白生物素化试剂盒 |
| JN1254 | 重组人PGK1(磷酸甘油酸激酶1) |
| JN0577 | 重组人连接黏附分子A(JAM-A) |
| JN1115 | 重组人胰岛再生源蛋白3γ(REG3G) |
| JN1447 | 重组小鼠ST2(IL-1R4) |
 |
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| JN0454 | 重组人TNFRSF19L(RELT) |
| JN0164 | λ蛋白*(代"磷")酸酶 |
| JN1255 | 重组人溶菌酶C(Lysozyme C)(LYZ) |
| JN0124 | M9基本培养基 |
| JN1899 | 重组人白血病抑制因子(LIF) |
| JN1744 | 重组人Serpin A10(丝*酸蛋白酶抑制剂A10) |
| JN1169 | 重组人心肌营养素1(Cardiotrophin-1) |
| JN1333 | 重组小鼠SLAMF9(CD2F-10) |
| JN0465 | 重组小鼠DR6(TNFRSF21) |
| JN0383 | 重组人白介素IL-18(白细胞介素18) |
 |
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文献和实验要：根据基因库中的口蹄疫病毒（FMDV），猪水疱病病毒（SVDV）和水疱性口炎病毒（VSV）各基因序列，设计了与FMDV，SVDV和VSV互补的3对特异性引物，对样品中的cDNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化，结果同时得到与设计相符合的3条特异性条带，分别为189 bp，125 bp和300 bp。用这3对引物对病毒样品cDNA模板进行多次扩增，均能稳定得到与设计相符合的3条特异性条带。本试验能特异、敏感、快速地鉴定FMDV，SVDV和VSV。 关键词：口蹄疫病毒；猪水疱病病毒；水疱性口炎
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多重PCR的主要用于多种病原微生物的同时检测或鉴定和病原微生物，某些遗传病及癌基因的分型鉴定。多种病原微生物的同时检测或鉴定，是在同一PCR反应管中同时加上多种病原微生物的特异性引物，进行PCR扩增
酶的聚合酶活性定标，没有同时给Taq酶5`—3`外切酶活性定标，不同批号试剂之间会给定量带来差异。另外对探针的熔点温度(Tm)仅要求其高于60°C，这就使不同试剂盒之间的特异性参差不齐，难于做质控检测。 Real time PCR Taqman探针设计、实时多重PCR探针的选择和引物的设计及评价 一、实时荧光Taqman 探针设计 总原则：探针选择要保守，引物选择要保守，因此必须找一段100-200bp相对要保守的片段来设计引物与探针。即real
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