北京促销人FGF7重组蛋白价格

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名称：北京促销人FGF7重组蛋白价格
编号：ZN1629
规格：100ng
品牌：百奥莱博
产地：北京
来源：大肠杆菌
特异性：人
应用：WB阳性对照
形态：冻干粉
纯度：>98%，RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件：-20℃保存1年以上，避免反复冻融。

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·C-FOS mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0158
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：human,rat,mouse,dog,cat
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液2ml；
3.C-FOS mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml；
4.封闭液5ml；
5.生物素化鼠抗Digoxin5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗Digoxin：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
C-FOS的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


北京促销人FGF7重组蛋白价格关键词：人FGF7重组蛋白,ZN1629,百奥莱博

SV1372 5′ 去腺苷化酶
YT190 化学发光法EMSA试剂盒 Chemiluminescent EMSA Kit
KFS272 Ac-LEED-FMK(caspase 13 抑制剂) Caspase 13 Inhibitors Z-AEVD-FMK
SY0508 台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒 Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
SV0532 NgoMIV限制性内切酶 NgoMIV Restriction Endonuclease
WE0178 细菌基因组DNA提取试剂盒 Bacteria Genomic DNA Extraction Kit
HR0457 Rhodamine 123染色试剂盒 Rhodamine 123 Staining Kit
SY0150 ERSE-Luc报告基因慢病毒颗粒 Lentivirus ERSE Luciferase Reporter
BTN100405 20×SSC溶液
KFS124 内质网红色荧光探针(ER-Tracker Red)
ALH114 中量全血基因组DNA提取试剂盒(3ml) Whole blood genomic DNA extraction kit
YT449 ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件) ISRE-luc Reporter gene plasmid
BTN100912A 长效期SDS-PAGE电泳液(＞30 KD)(干粉) Stable SDS-PAGE Running Buffer
BTN80923 大提柱式动物DNA提取试剂盒 Animal DNA Column large-scale extraction kit
SV1106 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG） Uracil -DNA glycosylase (UDG)
YT087 免疫染色封闭液 Immunol Staining Blocking Buffer
BTN90605C TdT加尾法DNADigoxin标记试剂盒 TdT-Tailing DNA Labeling Kit
SY0405 3ml重力层析空柱 Gravity Chromatography Columns
北京促销人FGF7重组蛋白价格关键词：人FGF7重组蛋白,ZN1629,百奥莱博

HR0275 细菌裂解液(免超声) Bacterial lysis solution (ultrasound free)
SY0046 dNTP混合溶液(2.5 mM each) dNTP Mix (2.5 mM each)
BTN131027 胃蛋白酶 Pepsin
KFS022 collagen I免疫组化试剂盒(IHC)
SV1595 小鼠 NIH 3T3 基因组 DNA
YT334 LKB1-AMPK激活剂(Metformin)(二甲双胍) LKB1-AMPK Activator
BTN80807B 动物细胞裂解液B(变性) Animal Cell Lysis Solution(B)
ALH338 无缝连接克隆试剂盒 Seamless Assembly and Cloning kit
SV0893 OneTaq Quick-Load 2X Master Mix（提供 GC 缓冲液）
WE0322 IHC复染试剂(改良型苏木素) Improved-Hematoxylin 
BTN100307B 酸洗玻璃珠(200μm) Acid-Washed Glassbeads(200μm)
SY0293 逆转录酶 M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
RFT188 2×DNA上样液(变性凝胶电泳) 2×DNA loading buffer (for denaturating urea gels)
KFS267 Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制剂) Caspase 4 Inhibitors Z-VAD-FMK

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