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482
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1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货人SAA1重组蛋白特价优惠由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多人SAA1重组蛋白等重组蛋白产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货人SAA1重组蛋白特价优惠
编号:ZN1706
规格:100ng
品牌:百奥莱博
产地:北京
来源:大肠杆菌
特异性:人
应用:WB阳性对照
形态:冻干粉
纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件:-20℃保存1年以上,避免反复冻融。
除北京现货人SAA1重组蛋白特价优惠外,我公司正在打折促销以下产品:
·ADRβ2 mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN0038
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:human,rat,mouse
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液2ml;
3.ADRβ2 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml;
4.封闭液5ml;
5.生物素化鼠抗Digoxin5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗Digoxin:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
ADRβ2的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
北京现货人SAA1重组蛋白特价优惠关键词:ZN1706,百奥莱博,人SAA1重组蛋白
·小鼠神经细胞粘附分子1(NCAM1)检测试剂盒
编号:ZN2563
英文名称:Mouse Neural cell adhesion molecule 1 ELISA Kit
规格:96T
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清中CD56的含量。预先包被的抗体是CD56单克隆抗体,检测相抗体也是CD56单克隆抗体。检测相抗体经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠CD56呈正相关。
CD56也称为NCAM1,为大分子亲水性糖蛋白,属于*依赖性C型凝集素大家族成员。CD56由多聚体组成,不同种类和不同个体之间有不同的多聚体形式。其在维持肺泡腔内肺表面活性物质磷脂正常结构和功能,调节局部免疫和炎症等过程中起重要作用。
检测指标:CD56;NCAM;NCAM1;NCAM-1
检测范围:625pg/ml~40ng/ml
特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性:<50pg/ml
产品组成:
| 组分 | 规格 | 数量 |
| 预包被抗小鼠CD56抗体的96孔板 | 96T | 1板 |
| 重组小鼠CD56标准品(冻干) | 40ng/管 | 2管 |
| 生物素标记抗小鼠CD56(100X) | 130μl | 1管 |
| 亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) | 130μl | 1管 |
| 样品稀释液 | 30ml | 1瓶 |
| 抗体稀释液 | 12ml | 1瓶 |
| ABC稀释液 | 12ml | 1瓶 |
| TMB显色液 | 10ml | 1瓶 |
| TMB终止液 | 10ml | 1瓶 |
| 洗涤缓冲液(25X) | 20ml | 1瓶 |
| 封板膜 | 4张 |
储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)
有效期: 6个月(4℃);12个月(-20℃)
参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
| 浓度(pg/ml) | 0 | 625 | 1250 | 2500 | 5000 | 10000 | 20000 | 40000 |
| OD值 | 0.040 | 0.081 | 0.128 | 0.229 | 0.440 | 0.772 | 1.400 | 2.259 |
北京现货人SAA1重组蛋白特价优惠关键词:ZN1706,百奥莱博,人SAA1重组蛋白
SV0008 AccI限制性内切酶 AccI Restriction Endonuclease
KFS283 Wortmannin(PI3K抑制剂) Wortmannin
SY0520 丙*(代"酮")酸*溶液(100 mM) Sodium Pyruvate 100 mM Solution
YT899 胰酶细胞消化液 Trypsin-EDTA Solution
BTN131210 耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性) Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase (H-)
HR0468 Dexamethasone Dexamethasone
SY0161 RBP-JK-GFP报告基因质粒 RBP-JK GFP Reporter Plasmid
YT246 PPAR凝胶迁移突变探针(1.75μM) PPAR Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
BTN140374 大肠杆菌DH10B化学感受态细胞 E.coli DH10B Chemical Competent Cell
ALH603 植物大量DNA快速提取试剂盒(CTAB法) Plant DNA Rapid Extraction Kit
SV0694 SfiI限制性内切酶 SfiI Restriction Endonuclease
WE0234 cfDNA文库定量试剂盒(Illumina平台) NGS Library Quantification Kit for Illumina
BTN120720 柱式冻存血液DNA提取试剂盒 Frozen blood DNA column extraction kit
SV1128 T7 核酸内切酶 I T7 nucleic acid enzyme I
RFT053 QuickLan蛋白染色液 QuickLan protein staining solution
KFS180 葡萄糖转运/血糖通道荧光探针2-NBDG
SY0418 DEAE弱阴离子高速交换树脂 DEAE Agarose Resin 6FF
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