北京现货大鼠CT-1重组蛋白批发

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北京现货大鼠CT-1重组蛋白批发的品牌：百奥莱博，是优质的重组蛋白产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多大鼠CT-1重组蛋白等重组蛋白产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京现货大鼠CT-1重组蛋白批发
编号：ZN1800
规格：100ng
品牌：百奥莱博
产地：北京
来源：大肠杆菌
特异性：大鼠
应用：WB 阳性对照
形态：冻干粉
纯度：>98%，RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件：-20℃保存 1 年以上，避免反复冻融。

北京现货大鼠CT-1重组蛋白批发极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·FGFR1 mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0513
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman,rat,mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.FGFR1 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
FGFR1的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


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YT373 YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer) YT Taq DNA Polymerase
SV1633 SNAP-Surface 488
BTN60906 cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒) 1st-Strand cDNA Synthesis Kit
BTN131224 Helly固定液 Helly Fixative Solution
SY0084 GAS-Luc荧光素酶报告基因质粒 GAS luciferase reporter plasmid
HR0348 洗涤液(Western) Western cleaning solution
BTN100824 TB培养基 Terrific Broth Medium，Powder
SV0337 EcoNI限制性内切酶 EcoNI Restriction Endonuclease
SY0445 人源低密度脂蛋白 Human Low Density Lipoprotein (Human LDL)
KFS207 Caspase 9荧光法检测试剂盒(AFC) Caspase-9 Fluorescence Metric Assay
YT121 细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附) DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
SV1178 Lambda DNA （不含 N6-甲基腺嘌呤）
BTN100303 柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法) Fungus DNA Column extraction kit(Glass bead method)
WE0261 细菌蛋白抽提试剂盒 Bacterial Protein Extraction Kit
YT529 RNA寡核苷酸退火缓冲液 Annealing Buffer for RNA Oligos (5X)
ALH082 酵母质粒小量提取试剂盒 Yeast high purity plasmid small amount rapid extraction kit
BTN140387 酿酒酵母EGY48化学感受态细胞 E.coli EGY48 Chemical Competent Cell
YT272 萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾) Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit
SY0188 AR-GFP报告基因质粒 AR GFP Reporter Plasmid
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SV0642 RsrII限制性内切酶 RsrII Restriction Endonuclease
SY0552 Hoechst 33342
KFS310 端粒酶活性实时定量PCR法检测试剂盒(大鼠)
SV0082 BaeI限制性内切酶 BaeI Restriction Endonuclease
SV1430 Amylose 树脂 High Flow
BTN70503S DNA marker(200-5000bp) DNA ladder(200-5000bp)
YT026 TG1甘油菌 E.coli TG1
SV0987 rNTP 套装
HR0065 大肠杆菌蛋白提取试剂盒 E. coli protein extraction kit
BTN131074 SDS-PAGE样品预处理试剂盒 Sample Preparation Kit for SDS-PAGE
YT378 2×PCR Master Mix（含Taq酶，buffer，dNTP） 2×PCR Master Mix
SY0292 第一链cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(+gDNA wiper) First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(+gDNA wiper)
KFS064 WB抗体清除液(强碱性)
BTN131292 PFG固定液 PFG Fixative Solution
SY0089 c-Jun-Luc荧光素酶报告基因质粒 c-Jun luciferase reporter plasmid
BTN91103 非冻型拭子病毒保存液 Swab virus non-reezing preservation solution
WE0117 BalbMulti多重PCR Mix BalbMulti PCR Mix
SV0354 EcoRI-HF RE-Mix限制性内切酶 EcoRI-HF RE-Mix Restriction Endonuclease
SY0450 髓鞘蛋白脂质蛋白多肽PLP(139-151) Myelin Proteolipid Protein (PLP) 139-151
BTN120619 dGTP溶液(100mM) dGTP Solution(100mM)

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