高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66～669 kD)

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高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66～669 kD) 蛋白质研究由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66～669 kD)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66～669 kD) 蛋白质研究
编号：RFT151
规格：20次(100μl)
英文名：High Molecμlar Weight Native Electrophoresis Protein Marker
品牌：百奥莱博
产地：北京
本产品是5种高纯蛋白质干粉混合物，总蛋白含量为250μg。具体蛋白含量如下：

 

蛋白名称	分子量(kD)	蛋白来源	蛋白含量(μg)
Thyroglobμlin	669	porcine thyroid	76
Ferritin	440	equine spleen	50
Catalase	232	bovine liver	36
Lactate dehydrogenase	140	bovine heart	48
Albumin	66	bovine serum	40

分子量范围为66kD-669kD，经过非变性电泳后，用考马斯亮蓝染色后可以得到分布均匀密度相近的5条带。

使用说明：
1. 取100μl非变性蛋白上样缓冲液(1×)加入到蛋白干粉混合物中，彻底混匀融化后，-20℃贮存。
2. 常温融化后，彻底混匀，上样电泳。
注：上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来，0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl，其他规格梳子请适当调整上样量。
3. 电泳结束后，染色，观察结果。
注：使用银染时，由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法，可以适当降低Marker上样量，一般稀释50倍。

注意：
1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳(SDS-PAGE)，因为在SDS存在下，含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。
2. 在非变性条件下，蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关。因此，在一种凝胶浓度下使用本Marker不能精确估计出目的蛋白的分子量。非变性电泳中，蛋白分子量的确定应该是在不同凝胶浓度下，确定出蛋白的Rf值，绘制出凝胶浓度对Rf的曲线从而判定蛋白的分子量。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

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BTN131093 荧光素标记的生物素 FITC-Biotin
IgG"
SV1623 CLIP-Surface 647
YT362 增强型ATP检测试剂盒 Enhanced ATP Assay Kit
BTN100101 镍柱介质(镍-琼脂糖凝胶) Ni-Agarose Resin
BTN71203 植物RNA柱式提取试剂盒 Plant RNA Column extraction kit
SV0957 Klenow 片段（3"→5" exo-）
YT009 PCR产物DNA纯化试剂盒 PCR Products DNA Purification Kit
BTN70303 绿如蓝核酸染料(UV) DNAgreen(UV)
SY0321 1×RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂) 1×RIPA Lysis Buffer (Strong),without enzyme inhibitors
SV0038 AluI限制性内切酶 AluI Restriction Endonuclease
KFS295 KT5823(PKG抑制剂)
SY0535 胶原酶I型 Collagenase I
YT913 结晶紫染色液 Crystal Violet Staining Solution
BTN130653 GpC甲基转移酶(M.CviPI) GpC Methyltranferase(M.CviPI)
HR0480 MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 MTT cell proliferation and cytotoxicity assay kit
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·1M Tris(pH6.8)
编号：RFT062
规格：100ml|500ml
本品用于SDS-PAGE浓缩胶制备。

·pRT20-T载体克隆试剂盒
编号：RFT110
英文名称：pRT20-T vector
规格：20次
pRT20-T 载体是一种高效克隆PCR产物(TA Clonging)的专用载体。它是由pUC19载体改造成的(pRT20-T载体在pUC19质粒MCS位点附近插入T7启动子序列)，MCS位点经过EcoR V酶切后在两侧的3’端添加”T”制备而成。因大部分Taq酶会在PCR产物的3’末端添加一个“A”，所以用本载体可以高效地进行PCR产物克隆。

试剂盒组份：

内容	浓度	总量
pRT20-T vector	25 ng/μl	20μl×1支
2×ligation solution	-	150μl×1支
Control insert(700bp)	12.5 ng/μl	10μl×1支
M13F(-47)	10μM	20μl×1支
M13R(-48)	10μM	20μl×1支
Water(RNase-free,DNase-free)	-	1ml×1支

本载体在pUC19载体的基础上对LacZ基因的编码序列进行了改造，加强了重组菌落在X-gal/IPTG/Amp/LB琼脂平板上的颜色筛选，具有更明显的蓝色菌落颜色，大大降低了假阳性率。由于在MCS位点附近插入了T7启动子序列，因此可以对插入DNA片段直接进行体外转录实验。



本载体在插入位点两侧各有一个BamH I位点，可以用BamH I直接酶切检测重组子，简化了检测程序。按照标准连接体系计算(10μl体系用1μl载体)，本载体可至少使用20次。包装内含有了2×ligation solution，是混合有T4 连接酶，连接buffer以及连接增强剂的MasterMix，使用方便，且能显著提高连接效率。另外，包装内提供M13引物，可以方便用菌落或菌液PCR快速检测阳性克隆。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


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·庆大霉素溶液(50mg/ml)
编号：RFT178
英文名称：Gentamicin Sulfate Solution
规格：5×1ml
硫*(代"酸")庆大霉素是一种*基糖苷类抗生素，对多种革兰阴性菌，如埃希氏菌、布氏杆菌、肠杆菌、弗朗西斯氏菌、耶尔森氏菌等，及部分葡萄球菌具有抗性。它抑制蛋白质合成的起始、延伸和终止。

CAS号：1405-41-0
分子式：C21H43N5O7·H2SO4
分子量：575.67

储存条件：-20℃避光，有效期12个月

·细菌蛋白提取试剂盒
编号：RFT159
英文名称：Bacterial protein extraction kit
规格：100次
细菌蛋白提取试剂盒使用温和的非离子型去污剂，适用于大肠杆菌表达的重组蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎等复杂的操作步骤，有效避免了外源蛋白的污染。该试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制剂混合物，可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象，有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性，可进行IP、Western blot实验，也可直接通过Ni-NTA 等纯化填料进行蛋白纯化。该试剂盒既可适用于小量蛋白表达检测，也适用于大量蛋白的表达纯化试验；既适用于纯化可溶型蛋白，也适用于纯化包涵体蛋白。每次提取使用1ml 缓冲液计算，该试剂盒可以使用100次。

试剂盒组成：

组份	规格	贮存
细菌蛋白提取缓冲液	100 ml	常温
蛋白酶抑制剂(100×)	1 ml	-20℃
溶菌酶 50mg/ml	1 ml	-20℃
DNase I	1000 U	-20℃

使用方法：
一、可溶型蛋白操作方法(1 ml菌液为例)
1、8000rpm常温离心 3min 后，弃上层培养基，留取管底部菌体(尽量弃除掉培养基) 。
2、加入 200μl细菌蛋白提取液，2μl DNase I和4μl 溶菌酶重悬菌体，用吸头吹打至无可见细胞团块。
3、置于常温孵育 10-15min，期间轻弹离心管数次以加速裂解。
4、裂解完成后 13,000rpm 于4℃离心5 min，将上清转移至新的容器中，溶液可直接进行下一步纯化或检测试验。

二、包涵体蛋白操作方法(1 ml菌液为例)
1、上述步骤4 中，弃上清，保留沉淀组分，用200μl 的细菌蛋白提取液重悬沉淀。
2、加入4μl溶菌酶，混合均匀，常温孵育 10-15 min。
3、加入 800μl 的灭菌水混合均匀。
4、13,000 rpm常温离心5min，弃上清后用 900μl 灭菌水重悬沉淀，然后加入 200μl 细菌蛋白提取液，混合均匀。
5、13,000rpm 室温离心5 min，重复步骤4 三至五次。
6、将沉淀溶解于变性溶液中，进行下一步纯化或复性试验。

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