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- 详细信息
- 文献和实验
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779
- 英文名:
C/EBPβ GFP Reporter Plasmid
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货C/EBPβ-GFP报告基因质粒优惠价,我公司销*(代"售")全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货C/EBPβ-GFP报告基因质粒优惠价
编号:SY0209
规格:1μg
英文名:C/EBPβ GFP Reporter Plasmid
品牌:百奥莱博
产地:北京
C/EBPβ-GFP报告基因是用于检测C/EBPβ转录活性水平为目的的报告基因。C/EBPβ(CCAAT/enhancer-binding protein beta)是转录因子C/EBPs家族的重要成员,它主要通过对靶细胞基因转录的调节,参与细胞增殖与分化、肿瘤发生与凋亡、细胞周期调控等。
C/EBPβ-GFP报告基因主要用于检测细胞中C/EBP信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMC/EBPβ-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个C/EBPβ结合位点,可以高效地检测C/EBPβ的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得C/EBPβ-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGM C/EBPβ-GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMC/EBPβ-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
关于北京现货C/EBPβ-GFP报告基因质粒优惠价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·考马斯亮蓝R250
编号:SY0346
英文名称:Coomassie Brilliant Blue R250
规格:10g
考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue)是两种相似三*甲*(代"烷")染料的总称,有G250和R250两种,结构上前者比后者多了2个甲基,命名上 “G”为Green 的缩写,因G250的蓝色染料泛浅绿色;命名上“R”为Red的缩写,因R250的蓝色染料呈微红色调;“250”表示考马斯亮蓝的纯度。生化实验中常将考马斯亮蓝用于蛋白定量和蛋白电泳中蛋白染色。工作原理是:通过与蛋白质内的*基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力,考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子(如磺酸基),从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。
考马斯亮蓝R250(Coomassie brilliant blue R250)更多用于电泳蛋白的染色,染色灵敏度比*基黑高5倍,可达0.1µg蛋白。R250染色后需要褪色,才能进行蛋白条带的观察。
考马斯亮蓝G250的检测灵敏度虽然较低,但也可替代R250,使用一种快速而简单的方法进行蛋白染色。因其具有以下特性,即在低于pH 2.0时,溶液无色;pH 7.0时溶液呈深蓝黑色;若发生酸化,溶液呈现透明的棕褐色。当G250与蛋白结合,溶液又回到蓝色,主要因为蛋白分子周围具有更偏中性的pH环境。合适条件下,当把胶放在酸化的G250溶液中染色,显示出蓝色的蛋白条带,背景呈浅琥珀色。此种方法条带快速显色,且背景颜色也很浅使得条带看起来很清楚,则不需要做褪色处理。大部分蛋白用G250检测的下限是0.5µg。虽然灵敏度降低,取而代之的是操作快速以及方便,比R250染色节省高达11 h。
中文别名:考马斯亮兰R250;酸性蓝83;酸性艳蓝6B;亮蓝R;
英文别名:Brilliant Blue R; Brilliant Indo*(代"c")yanine 6B; C.I. number 42660; Acid Blue 83;
CAS:6104-59-2
分子式:C45H44N3NaO7S2
分子量:825.97
外观:暗红色至深暗红或暗色粉末
溶解性:溶于热水(1 mg/ml),乙醇和甲醇
储存条件:室温
结构式

使用方法
1. 标准染色步骤(考马斯亮蓝R250)
1) 蛋白电泳凝胶置于50%甲醇,10%醋酸,40%水溶液中固定,水平摇床上低速摇动30min~过夜;
2) 去除固定液,更换0.25%考马斯亮蓝R250染色液(0.25% R250 溶于50%甲醇,10%醋酸,40%水溶液)完全覆盖住胶,染色2-4h。直至胶染成均匀的蓝色。注意:当胶在染色液内肉眼不可见时,说明染色完成,否则与深色的染色液对比,凝胶区域看起来颜色偏浅。
3) 将胶重新放置在5%甲醇,7.5%醋酸,87.5%水溶液中脱色4-24h。约1-2h后蛋白条带即可看到,直至背景变透明后脱色才结束。中间可更换2-4次脱色液;
注意:此方法可检测到的蛋白量最低达到0.1µg蛋白/条带。
4) 将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。
2. 快速染色步骤(考马斯亮蓝R250)
1) 蛋白电泳凝胶在25%IPA,10%醋酸的水溶液中固定30-60min;
2) 将胶放置在10%醋酸的水溶液中进行染色,含有60 µg/ml的考马斯亮蓝R250。约30min后条带显示,让胶继续染色直至达到理想的蛋白条带。在此染色方法中胶的背景染色比较浅,由于使用胶的浓度很低。
3) 将胶重新放在10 %醋酸溶液中脱色2h或更长。期间可更换2-4次脱色液;
4) 将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。
注意事项
1)0.25%考马斯亮蓝R250染色液配置的过程中,需要先用甲醇溶解R250粉末后,再加入醋酸和水,一般情况下不需要滤纸除杂。溶液可在4度存放6个月,若长时间保存出现沉淀,可用滤纸过滤得到澄清液体。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
北京现货C/EBPβ-GFP报告基因质粒优惠价关键词:SY0209,C/EBPβ GFP Reporter Plasmid,C/EBPβ-GFP报告基因质粒
SK179 多聚半乳糖醛酸酶检测试剂盒 PG Test Kit
GL2001 脂蛋白a(Lp-a)检测试剂盒(免疫比浊微板法) 100T
SNM225 总胆固醇测定试剂盒(单试剂GPO-PAP法)(分光光度计) Total cholesterol assay kit
GL1329 Tris-HCl缓冲液(1mol/L,pH7.5,RNase free) 500ml
GL0166 SM缓冲液 100ml|500ml
SNM109 乙醇脱*酶测定试剂盒(紫外比色法) Alcohol dehydrogenase assay kit
SNM426 TMB显色液(沉淀型) TMB substrate solution
GL1578 强磷酸盐缓冲液(PBS,pH7.2) 100ml
GL0443 Weigert弹力纤维染色液 3×50ml
SNM310 尿素氮测试盒(脲酶法) Urea Assay Kit
SK036 抗坏血酸过氧化物酶检测试剂盒 APX Test Kit
GL1842 二氧化碳检测试剂盒(酶比色法) 50T
GL0737 姜黄素指示剂 100ml
GL1167 Tris-硼*(代"酸")电泳粉剂(5×TBE) 1L
SK240 异柠檬酸裂解酶检测试剂盒 ICL Test Kit
GL2069 β-淀粉酶(β-AMS)检测试剂盒(硝基水杨酸法) 100T
GL1015 巴比*(代"妥")*缓冲液 离子强度0.05|0.06|0.07 100ml
GL1408 SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×) 100ml|500ml
GL0254 PIPES溶液(pH6.8) 1mol/L 100ml
北京现货C/EBPβ-GFP报告基因质粒优惠价关键词:SY0209,C/EBPβ GFP Reporter Plasmid,C/EBPβ-GFP报告基因质粒
·NRSF-GFP报告基因质粒
编号:SY0223
英文名称:NRSF (Neuron-Restrictive Silencer Factor) GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
NRSF-GFP报告基因是用于检测NRSF转录活性水平为目的的报告基因。NRSF(Neuron-Restrictive Silencer Factor)又被称作REST(RE1-Silencing Transcription factor)主要是在非神经元细胞中阻遏某些神经性基因的表达。随着研究的深入,发现NRSF-REST在神经发育过程中有着复杂的调控功能。
NRSF-GFP报告基因主要应用于Neuron Silencing Factor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。
pGMNRSF-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个NRSF结合位点,可以高效地检测NRSF的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得NRSF-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGM NRSF -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMNRSF-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
·pCMV/myc/mito 线粒体定位表达载体(哺乳动物细胞)
编号:SY0023
英文名称:NRSF (Neuron-Restrictive Silencer Factor) GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
重组蛋白功能研究时,常需要将其在细胞内定位到具体的细胞器,例如细胞核( nucleus)内、细胞质( cytoplasm)内、线粒体(mitochondria)或内质网(endoplasmic reticulum)上等。而细胞内某种蛋白的存在部位取决于蛋白序列中的“定位序列”(targeting sequences)或“信号肽”,这些序列可能位于蛋白质的N端、C端或蛋白质内部。一旦蛋白质被转运到最终细胞部位,这些序列可能会被保留,也可能被切除。研究者可以根据自己的研究目的,将感兴趣的ORF片段构建到表达载体中进行研究。
pCMV/myc/mito线粒体定位表达载体是以pcDNA3.0为基本骨架改造的质粒,可进行哺乳动物细胞瞬转和稳转。具有多克隆位点,可将任何重组蛋白导向至线粒体内。
产品性质:
质粒类型:哺乳动物细胞表达
大小:4967
启动子类型:CMV
蛋白标签:C端Myc标签
抗性:Amp
储存条件:-20℃,有效期半年。
注意事项:
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本载体在重组蛋白C端加有Myc标签,可用于检测重组蛋白表达。如果不要带有Myc标签,可在重组蛋白基因中加入终止密码子。
北京百莱博科技有限公司是报告基因检测产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购北京现货C/EBPβ-GFP报告基因质粒优惠价。
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文献和实验关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
低pH凝胶系统,并使用以下缓冲液体系:分离胶:0.06M/l KOH,0.376M/l Ac,pH4.3(7.7% T,2.67% C)堆积胶:0.06M/l KOH,0.063M/l Ac,pH6.8(3.125% T,25% C)电泳缓冲液:0.14M/l 2-丙氨酸(β-丙氨酸),0.35M/l Ac,pH4.5用于低PH凝胶时将正负电极倒置,于低PH凝胶系统中用甲基绿(0.002%)为示踪剂。酶活一般可以保留,除非酶蛋白特别热敏和不稳定。Native- PAGE电泳时1,可设两个样品孔
动物细胞中的RNAi 在小鼠的胚胎细胞中也存在RNAi,将727个碱基对的双链RNA转入小鼠的畸胎瘤细胞,诱发了细胞内的RNAi机制,并抑制了报告基因的表达。但大于30个核苷酸的双链RNA进入哺乳动物的成体细胞后,会非特异的阻断基因的表达。这是由于当长的双链RNA进入哺乳动物成体细胞后,细胞内的病毒防御机制被激活。细胞内干扰素产生增加,蛋白激酶PKR激活,使转录因子E2F被抑制,非特异的阻断基因的转录,并诱导细胞凋亡。另一方面,RNA酶L(RNase L)被激活,产生非特异的mRNA降解。而未分
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