北京现货ISRE-GFP报告基因质粒厂家直销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货ISRE-GFP报告基因质粒厂家直销在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京现货ISRE-GFP报告基因质粒厂家直销
编号：SY0170
规格：1μg
英文名：ISRE GFP Reporter Plasmid
品牌：百奥莱博
产地：北京
ISRE GFP Reporter Plasmid是用于检测STAT1/STAT2转录活性水平为目的的报告基因。STATs是一类重要的核转录因子，共包括STAT1~STAT4，STAT5a，STAT5b及STAT67个成员，它们与细胞增殖、分化和凋亡密切相关，其中STAT1和STAT2参与了细胞的凋亡控制。

ISRE-GFP报告基因主要检测细胞Type I Interferon信号通路中STAT1/STAT2的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMISRE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个STAT1/STAT2结合位点，可以高效地检测STAT1/STAT2的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得ISRE-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM ISRE -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMISRE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

欲咨询购买北京现货ISRE-GFP报告基因质粒厂家直销，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·二甲基腔肠素
编号：SY0242
英文名称：Coelenterazine 2-methyl
规格：1×50μg
本品为粉末形式供应的二甲基腔肠素，系天然腔肠素衍生物，具有无毒、细胞膜通透性等特性，是一种细胞强抗氧化剂，可高效作用于细胞内的活性氧，如单态氧和超氧阴离子。由于氧化应激是细胞凋亡过程的中介环节，因此，二甲基腔肠素可能作为一种研究细胞凋亡的重要工具。另，二甲基腔肠素还可通过化学发光法来检测超氧阴离子和过氧亚硝酸阴离子水平。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点：
1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。


图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。

英文别名：Coelenterazine, 2-methyl analog; Methyl Coelenterazine; 2-methyl Coelenterazine
CAS：N/A
分子式：C20H17N3O2
分子量：331.37
溶解性：溶于甲醇或乙醇
外观：黄色粉末
纯度：＞98%（TLC）
结构：


注意事项
1）二甲基腔肠素粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成二甲基腔肠素氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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·阿尔玛蓝
编号：SY0503
英文名称：Alamar Blue
规格：100T
阿尔玛蓝（Alamar Blue）是一种氧化还原指示剂，能根据代谢活性产生吸亮度变化和荧光信号。这是一种安全无毒的染料，可用于细胞活性和细胞增殖的定量分析以及细胞因子生物测定和体外细胞毒性研究，能有效测定动物、真菌和细菌细胞的天然代谢活性。Alamar Blue在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性，而在还原状态下，转变为呈粉红或红色荧光的还原产物，反映所研究的细胞或微生物对氧分子的消耗，因而常被用作氧化还原指示剂，以显示被观察细胞和细菌的代谢活动。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。在细胞增殖过程中，细胞内NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，处于还原环境。摄入细胞内的染料被这些代谢中间体及细胞色素类还原后释放到细胞外并溶于培养基中，使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性，因此对应的信号较低。可以用普通分光光度计或荧光光度计检测，其激发光波长在530-560 nm之间，发射光波长为590 nm。吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比。

本品可广泛地用于细胞增殖代谢，药物的细胞毒作用的体外测定以及病原微生物的的快速检测与鉴定。 与台盼兰、TTC、MTT、MTS等分析法相比，Alamar Blue具有更多的优势。Alamar Blue采用单一试剂，可以连续、快速地检测细胞的增生状态。由于Alamar Blue对细胞无毒、无害，不影响细胞的抗体合成与分泌等活性，因此可以对同一批细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察，因此有操作简便和几乎不干扰细胞正常代谢的特点。

注意事项
1）需客户自行准备100%还原型Alamar Blue试剂。为得到还原型Alamar Blue，需配制Alamar Blue与细胞培养基的混合溶液，Alamar Blue与细胞培养基的比值为1:10，高压灭菌15min。（不能对浓缩的Alamar Blue高压灭菌，也不能用PBS配制溶液，因为100%还原型Alamar Blue在PBS中不稳定。）
2）为得到最好的结果，建议实验前先摸索孵育时间和接种细胞数量。
3）合适密度的细胞可以增加检测灵敏度。对于96 孔板，我们建议每孔接种100 微升细胞，细胞浓度范围为：贴壁细胞在100-10,000/孔，悬浮细胞在2,000-50,000/孔，并以培养基为空白对照。对于384 孔板，细胞浓度和接种量均减半。
4）整个过程均应为无菌操作，因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。
5）注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长，会导致继发性还原反应，产生无色和荧光消失。
6）孵育时，须避光。
7）本产品可以使用荧光或分光光度计检测，但荧光的灵敏度高，实验误差小，推荐使用荧光检测。

储存条件：4℃，有效期一年


北京现货ISRE-GFP报告基因质粒厂家直销关键词：ISRE GFP Reporter Plasmid,SY0170,ISRE-GFP报告基因质粒

GL1655 Tris*盐缓冲液(1×,pH7.8) 500ml
GL0513 过氧化物酶染色液(联*(代"*")*(代"胺")法) 4×10ml|4×20ml
SNM360 快速姬姆萨染液(适用于血涂片、骨髓涂片染色) Wright - Giemsa Stain Kit
SK086 半胱*酸含量检测试剂盒 Cys Test Kit
GL1897 植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法) 50T|100T
GL0797 苏丹Ⅳ染色液 3×50ml
SNM562 肌酐酶(CAH) Creatinine enzyme
GL0027 盐*(代"酸")万古霉素溶液(10mg/ml) Vancomycin 10mg/ml 10ml
SNM017 维生素B2荧光检测试剂盒 Vitamin B2 fluorescence detection kit
GL1084 阿拉伯胶水溶液(10%) 100ml
GL1469 RIPA裂解液(弱) 100ml
GL0317 Hoechst33258染色液 10ml
SNM219 β-淀粉酶测试盒(比色法) β- amylase (AMS) test kit
GL1319 RNase A(10mg/ml) 1ml|5ml

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