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北京百奥莱博科技有限公司
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括猪伪狂犬单重凝胶PCR检测试剂盒(PRV)北京价格在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:猪伪狂犬单重凝胶PCR检测试剂盒(PRV)北京价格
编号:SYA572
规格:48次/盒
品牌:百奥莱博
产地:北京
除猪伪狂犬单重凝胶PCR检测试剂盒(PRV)北京价格外,我公司正在打折促销以下产品:
·肠出血性大肠杆菌黏附抹平因子(Eae)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA086
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·冠状病毒(HCoV)通用单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA178
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·札如病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA203
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肠道病毒通用(EV-U)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA210
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·冠状病毒(OC43)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA181
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·普氏立克次体单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA130
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对普氏立克次体特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对普氏立克次体的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于检测全血等样本中的普氏立克次体,用于普氏立克次体感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
普氏立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720uL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
普氏立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50uL,加入100uL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照:不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照:均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明普氏立克次体核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明普氏立克次体核酸阴性。
(3) 如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行普氏立克次体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明普氏立克次体核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
猪伪狂犬单重凝胶PCR检测试剂盒(PRV)北京价格关键词:猪伪狂犬单重凝胶PCR检测试剂盒(PRV),百奥莱博,SYA572
·霍乱弧菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA006
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Vibrio cholerae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·人类小DNA病毒(B19)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA246
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Vibrio cholerae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·登革热Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ病毒四重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA252
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Vibrio cholerae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·诺如病毒G2型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA202
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Vibrio cholerae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·志贺菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA064
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Vibrio cholerae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·登革热病毒Ⅳ型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA228
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Vibrio cholerae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肉毒杆菌F型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA022
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Vibrio cholerae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪乙型脑炎病毒(JEV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA419
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Vibrio cholerae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
该方法采用一步法荧光qRT-PCR,反应在同一管内连续进行,操作简单,并有效防止了污染,能对样品中的猪乙型脑炎病毒进行快速检测,具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。
二、用途:
该试剂盒适合于检测发病动物血液、脑脊液、组织以及病毒细胞培养液等标本中猪乙型脑炎病毒(JEV)RNA,适用于猪乙型脑炎病毒(JEV)感染的辅助诊断。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
JEV荧光qRT-PCR反应液(JEV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(JEV-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
6、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
适用标本类型:发病动物的血液、体液、脑脊液、组织以及病毒培养物等标本。
6.1.1 组织:取发病组织约1g,置入1.5mL洁净EP管,立即送检。
6.1.2 血液、体液、脑脊液及病毒培养物:血液,无菌注射器抽取外周血1-2mL注入EDTA2Na(或柠檬酸*)抗凝管;体液、脑脊液及病毒培养物液等,无菌条件下取0.5-1mL左右,置入1.5mL洁净EP管,立即送检。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL 加入到反应体系中即可。
由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(JEV-qRT-PCR MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),测试反应体系配制如下:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(JEV-PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC): 不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(JEV-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明JEV核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明JEV核酸阴性。
(3)如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行JEV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明JEV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
猪伪狂犬单重凝胶PCR检测试剂盒(PRV)北京价格关键词:猪伪狂犬单重凝胶PCR检测试剂盒(PRV),百奥莱博,SYA572
FZ011 呋*(代"喃")西林快速检测试剂盒 96T/盒
SYA122 疟原虫核酸单重荧光PCR检测试剂盒
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SYA191 偏肺病毒/腺病毒双重荧光PCR检测试剂盒
SYA498 布鲁氏菌(BS)单重荧光PCR检测试剂盒
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FZ048 猪口蹄疫病毒3ABC抗体检测试剂盒 96T*2/盒
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SYA045 嗜肺军团菌单重荧光PCR检测试剂盒
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