Western一抗二抗清除剂(酸性)特价促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括Western一抗二抗清除剂(酸性)特价促销在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：Western一抗二抗清除剂(酸性)特价促销
编号：YT074
规格：250ml
英文名：Antibody Stripping buffer(Acidic)
品牌：百奥莱博
产地：北京
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。

使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱。但是，本Western一抗二抗去除液，经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约40-80分钟即可实现蛋白膜的重复使用，然后可以进行封闭等后续的Western操作。

百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。

抗体清除剂选型表：

产品编号	YT071	YT072	YT073	YT074
产品名称	Western一抗二抗清除剂(强碱性)	Western一抗二抗清除剂(弱碱性)	Western一抗二抗清除剂(中性)	Western一抗二抗清除剂(酸性)
产品包装	250ml	250ml	250ml	250ml
pH	强碱性	弱碱性	中性	酸性
对于膜上蛋白的保留效果	好	好	好	好
对于一抗二抗的去除效果	好	好	好	好
去除一抗二抗所需时间	15-20分钟	20-30分钟	20-30分钟	40-80分钟
适用膜的类型	PVDF和NC	PVDF和NC	仅PVDF	PVDF和NC
腐蚀性	强	弱	无	弱

用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜，即硝酸纤维素膜时，不宜选用YT071N。从时间角度考虑，强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短，可以优先考虑。从价格因素考虑，强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑，中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作，并进行适当防护，使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
　　对于特定的抗原和抗体，很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时，可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间，同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液，以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。

注意事项：
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP)，任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶，如果使用碱性磷酸酯酶，任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
2. 为取得最佳效果，推荐使用PVDF膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测，例如DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。
4. 本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。

储存条件：室温，有效期一年。

除Western一抗二抗清除剂(酸性)特价促销外，我公司正在打折促销以下产品：

·RNase抑制剂(氧钒核糖核苷复合物)
编号：YT531
英文名称：RNase Inhibitor(RVC)
规格：2ml|10ml
本抑制剂氧钒核糖核苷复合物(Ribonucleoside Vanadyl Complexes, RVC)是一种常用的RNA酶抑制剂，浓度为200mM，广泛用于各种RNA样品的分离纯化和检测过程中以抑制RNA降解。

本产品通过一种优化的方法将四种rNTP的等摩尔混合物与氧化钒混合反应而成，可以和RNase以非共价键结合，形成稳定的复合物，从而抑制RNase活性。

本产品是一种常用的RNase抑制剂，可广泛用于各种需要防止RNA降解的RNA分离、纯化和检测过程。本产品可以用于mRNA的纯化过程中，作为RNase的抑制剂；也可用于细胞裂解和蔗糖梯度法细胞组分分离过程中，以抑制RNase活性；还可以用于原位杂交中保护RNA探针，以及DNase I消化DNA时保护RNA等。但本产品不适合用于体外翻译体系。

本产品可以抑制绝大多数核糖核酸酶，但以下是例外：DNase I、S1 nuclease及Bacillus cereusribonuclease。由于本产品不抑制DNase I，所以当用DNase I消化去除RNA样品中的DNA时，可以采用本产品来抑制RNase。

有报道称0.4mM以上浓度的RVC对PCR聚合酶有一定的抑制作用，所以本试剂不推荐直接用于反转录体系中，反转录体系中可以选用百奥莱博的另外一种RNase抑制剂(YT530)。也可以通过后续提到的方法抽提去除RVC后再用于PCR反应。

很多时候RNA样品中的RVC不必去除，可以直接用于后续的电泳、功能检测等。例如，使用本产品纯化获得的mRNA未经去除RVC，可以直接用于蛙卵的注射实验。

如果需要去除RNA样品中的RVC，可以直接使用等体积*酚进行抽提。如果*酚中含有抗氧化剂8-羟基喹*(代"啉")(8-hydroxyquinoline)，抽提含有RVC的RNA样品后会发现*酚的颜色会变黑。当*酚抽提样品2-4次后，*酚的颜色不再明显变色，提示RVC已经被充分去除了。也可以在RNA沉淀前，加入RVC的摩尔数10倍量的EDTA以充分分解和失活RVC，这样可以在RNA沉淀时去除已经分解和失活的RVC。RVC浓度越高，对于RNase的抑制效果越强。参考图1，20mM的RVC可以完全抑制0.00025U/ml的RNase A。本产品浓度为200mM，一般细胞裂解液中推荐使用终浓度20mM，也可以根据经验或文献选择不同的浓度。每一批的本产品都经过RNase活性抑制的检测，检测结果参考下图。


不同浓度的RVC对RNase A的抑制效果图。总RNA和0.00025U/ml RNase A以及指定浓度的RVC一起孵育20分钟后进行电泳检测。本图仅作参考，不同的样品不同的检测条件，实际获得的结果可能和上图有所差别。

注意事项：
1. 第一次使用时建议分装，避免反复冻融。
2. 去垢剂SDS以及螯合剂EDTA可以抑制RVC的活性，请勿和RVC同时使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·生物素标记DNA探针制备试剂盒(随机引物法)
编号：YT031
英文名称：Biotin Random Prime DNA Labeling Kit)
规格：10次
本试剂盒是一种通过随机引物标记反应产生生物素标记DNA探针的试剂盒。本试剂盒标记的生物素DNA探针可以用于常规的Northern、Southern、colony或plaque hybridization、dot或slot blot、原位杂交等。

在Klenow酶(Klenow fragment,3"-5"exo-)催化下，通过随机引物标记反应(random prime labeling)可以把生物素标记的Biotin-11-dUTP掺入到新合成的DNA探针中，这样就可以产生生物素标记的DNA探针。在随机引物标记反应过程中，一些标记好的DNA探针可以被Klenow酶从模板DNA链上驱赶下来。这样在模板量较少的情况下，通过随机引物标记反应，最后可以产生比模板DNA量更多的生物素标记DNA探针，可多达1-15倍左右。

本试剂盒可以用于多种DNA模板的标记，包括DNA片段、线性化的质粒或cosmid、超螺旋DNA等。用于本试剂盒的模板DNA片段应不小于100bp，小于100bp的DNA模板可以使用百奥莱博的生物素3"末端DNA标记试剂盒(YT030)进行DNA探针标记。

用于本试剂盒的模板DNA的量应不少于10ng，推荐的模板用量为100ng-1μg。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control DNA，可以用作检测生物素DNA探针标记效率的对照。生物素标记DNA可以使用百奥莱博的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(YT032)或其它适当试剂盒进行检测。本试剂盒可以用于10个标记反应。

试剂盒组分：

Random Primer in Buffer(5X)	105μl
Klenow Fragment	11μl
Biotin-Labeling Mix	50μl
Ultrapure Water	1ml
Biotin-Control DNA(3ng/μl)	50μl
探针标记终止液	100μl

储存条件：-20℃。

使用说明：
1. 在一离心管或PCR管内加入100ng-1μg DNA模板，再加入适量试剂盒提供的Ultrapure Water，至总体积为34μl。(通常100-300ng DNA模板已经足够用于一次标记反应)
2. 加入10μl Random Primer in Buffer (5X)，混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
3. 沸水浴加热5分钟，或在PCR仪上100℃加热5分钟(如果不能设置100℃，99℃加热5分钟也完全可以)。
4. 立即放置到预先准备好的冰水浴中至少2-3分钟。
5. 加入5μl Biotin-Labeling Mix。
6. 加入1μl Klenow Fragment，混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
7. 37℃孵育1小时或过夜(不宜超过20小时)。37℃孵育过夜可以显著增加生物素标记DNA的产量，因此推荐孵育过夜(12-20)小时。
8. 加入3μl探针标记终止液，混匀，终止标记反应。至此标记反应已经全部完成，标记好的DNA可以-20℃保存。
9. 此时探针可以直接用于探针标记效率的检测及Southern、Northern等后续操作。
10. 整个探针标记反应的流程参见下表：

100ng-1μgDNA模板	xμl
Ultrapure Water	(34-x)μl
Random Primer in Buffer (5X)	10μl
100℃ 5分钟，立即冰浴冷却
Biotin-Labeling Mix	5μl
Klenow Fragment	1μl
总体积	50μl
37℃孵育过夜
探针标记终止液	3μl
-20℃保存
此时可用于标记效率的检测及Southern、Northern等后续检测

11. 探针标记效率的检测：可以对标记好的探针进行适当梯度稀释后，使用百奥莱博的化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒(YT032)或其它适当的方法进行检测。通常探针的标记效率可以参考下表：

模板DNA量	生物素标记DNA产量
—	孵育1小时	孵育20小时
10ng	80ng	900ng
30ng	150ng	1350ng
100ng	350ng	1650ng
300ng	750ng	2200ng
1000ng	1300ng	2600ng
3000ng	1600ng	2600ng

注意：具体的探针标记效率还和模板DNA的长度、纯度等因素有关，上表的数值仅供参考。
12. 使用本试剂盒所获得的生物素标记DNA的长度通常在数百bp左右。具体的长度因模板的长度而有所不同。例如模板DNA的长度为1kb，则生物素标记DNA产物的长度通常为100-1000bp，平均长度约为300bp左右。


Western一抗二抗清除剂(酸性)特价促销关键词：Western一抗二抗清除剂,Western一抗二抗清除剂(酸性),Antibody Stripping buffer(Acidic),YT074

GL1874 白蛋白检测试剂盒(*甲*(代"酚")绿微板法) 100T
GL1475 Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) 100ml
SNM341 刚果红染液(淀粉样变性染色液) Congo Red Stain
GL0484 中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP) 4×2ml|4×10ml
GL0035 磷酸缓冲盐粉剂(无**) 1×PBS|10×PBS 1L|2L|10×1L|10×2L
GL1231 盐*(代"酸")胍溶液(8mol/L) 100ml
SNM140 抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)试剂盒(比色法) Tartrate Resistant Acid Phosphatase assay kit
GL0218 *化*(代"*")-EDTA溶液(0.15mol/L) 100ml
SK092 羧酸酯酶检测试剂盒 CarE Test Kit
GL0979 草酸水溶液 1%|2% 500ml
GL2035 β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒(PNP比色法) 50T
SK210 土壤蔗糖酶检测试剂盒 S-SC Test Kit
SNM483 即用型正常山羊血清 Normal goat serum
GL0709 碱性品红指示剂 100ml
GL1812 枸橼酸*抗凝剂(4%) 100ml
GL1404 Tris-甘*酸电泳粉剂(5×) 1L
SNM282 纤维蛋白原测试盒(半自动凝血仪) Fibrinogen Assay Kit
GL0409 酸性蛋白染色液(细胞专用) 2×50ml

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