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657
- 英文名:
Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein
- 保质期:
1~2个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货Ad-GFP-LC3B哪里买,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Ad-GFP-LC3B
编号:YT159
规格:1ml|10×1ml
英文名:Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein
品牌:百奥莱博
产地:北京
本品是一种可以表达GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒,可以用于感染细胞或组织后进行细胞自噬(autophagy)的检测。
LC3是酵母自噬关键蛋白ATG8在哺乳动物中的同源蛋白。LC3最初被分析鉴定为microtubule-associated protein 1 light chain 3 。LC3蛋白家族包括LC3A、B、C和GABARAP等亚家族,其中对于LC3B的研究最为广泛。到目前为止,LC3B被认为是细胞自噬信号通路最为关键的标志性蛋白。LC3B是一个具有125个*基酸残基的蛋白,在蛋白合成后,被Atg4所酶切而失去了C端的22个*基酸蛋白,从而暴露出C端的甘*酸,人们把它命名为胞质形式的LC3B I。在细胞自噬的过程中,其C端暴露的甘*酸经过一个类似泛素化的过程,以ATG7为E1样激活酶, 以ATG3为E2样连接酶,以Atg12-Atg5-Atg16复合物为E3样连接酶,在C端甘*酸上共价连接上磷脂酰乙醇胺而成为LC3B-PE即LC3B II。与胞质定位的LC3B I不同,LC3B II定位于自噬体的内膜和外膜上。在自噬体与溶酶体融合后,自噬体外膜上的LC3B II被Atg4所酶切,而自噬体内膜上的LC3B II则被溶酶体内的蛋白酶所降解。尽管LC3B II比LC3B I的分子量要大,但由于其极强的疏水性,在SDS-PAGE电泳时,LC3B II比LC3B I迁移得更快,其表观分子量分别为14kD和16kD。在用GFP-LC3B腺病毒感染细胞后,在非自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B以弥散的形式存在于细胞质中;而在自噬的情况下,荧光显微镜下GFP-LC3B则聚集在自噬体膜上,以斑点的形式表现出来。
自噬是一种在进化上高度保守的通过溶酶体吞噬并降解部分自身组分的细胞内分解代谢途径。自噬与多种生理功能有关,在饥饿等不利的环境条件下, 细胞通过自噬降解多余或异常的细胞内组分,为细胞的生存提供能量及原材料,促进生物体的生长发育、细胞分化及对环境变化产生应答。自噬异常与多种病理过程如肿瘤、神经退行性疾病、代谢疾病、病原体感染等都有密切关系。由于细胞自噬在生理和病理过程中都有重要作用,自噬已经成为细胞生物学领域的一个新的研究热点。
Ad-GFP-LC3B是百奥莱博的重组腺病毒,感染后能够在靶细胞中有效表达绿色荧光蛋白(GFP)和LC3B的融合蛋白,呈现明亮的绿色荧光,可以用于细胞自噬的检测。
腺病毒感染细胞后为瞬时表达,通常不会与基因组DNA重组,不能用于筛选稳定细胞株。本产品感染体内外细胞后,有效表达时间通常不少于7天,不同细胞和组织的有效表达时间有所不同。感染10-14天后融合蛋白的表达很可能会大大减弱。
百奥莱博的Ad-GFP-LC3B采用了成熟的E1缺陷型重组腺病毒载体系统,感染普通的细胞后不能进行扩增和重组,从而可以有效降低本产品在活体生物中的风险。
本产品可以在表达E1的HEK293A、HEK293等适当细胞中扩增。
本产品的滴度≥1×108 pfu/ml,使用时可以按照108pfu/ml进行计算。如果按照20 MOI感染6孔板的细胞,每孔50万细胞计算,共可以感染10个孔;如果按照20 MOI感染24孔板的细胞,每孔10万细胞计算,共可以感染50个孔。如果MOI值提高,则相应可以感染的孔数会减少;如果MOI值降低,则相应可以感染的孔数会增加。
注意事项:
1. 反复冻融会降低病毒滴度,如有必要请在收到本产品后分装保存。病毒融解后,如果在一周内使用,可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年,可能会导致滴度下降,此时建议重新测定病毒滴度。
2. 腺病毒感染需要细胞表面的CAR受体,请确认拟使用的细胞或组织可以被腺病毒感染。
3. 本产品使用前请仔细阅读附录1《腺病毒使用安全规范》。本产品生物安全等级为Biosafety Level 1 (BSL-1),没有确凿证据显示会导致健康成人产生疾病,可以按照常规的微生物实验操作要求进行操作。
储存条件:-20℃,有效期1~2个月。
关键词:YT159,Ad-GFP-LC3B,Adenovirus expressing GFP-LC3B fusion protein
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| 编号 | 名称 |
| YT155 | PARP抗体 |
| YT038 | Western及IP细胞裂解液 |
| YT701 | 兔抗CDk1抗体 |
| YT230 | 生物素标记NF-κB凝胶迁移探针(0.2μM) |
| YT293 | 总谷胱甘肽检测试剂盒 |
| YT683 | 兔抗BAX蛋白抗体 |
| YT094 | PVP封片液 |
| YT833 | p35/p25抗体 |
| YT916 | YT™转染试剂 |
| YT920 | Bcl-2抑制剂(ABT-263) |
| YT235 | 生物素标记OCT-1凝胶迁移探针(0.2μM) |
| YT662 | 磷酸化Chk1(Ser345位点)抗体 |
| YT304 | 抗氧化剂Lipoic acid(硫辛酸) |
| YT893 | Hoechst 33258染色液 |
| YT071 | Western一抗二抗清除剂(强碱性) |
| YT808 | IKKβ抗体 |
| YT527 | 总RNA抽提试剂(Trizol法) |
| YT796 | HDAC7抗体 |
| YT650 | BiP抗体(GRP78抗体) |
| YT178 | 线粒体绿色荧光探针 |
| YT409 | T7 RNA聚合酶 |
| YT585 | 内酰胺酶 |
| YT444 | GL6-miR报告基因质粒 |
| YT871 | 封闭液(用PBS配置,不含去垢剂) |
| YT658 | CDK4抗体 |
| YT852 | AP标记驴抗山羊IgG(H+L) |
| YT848 | VEGF抗体 |
| YT706 | 兔抗Cyclin D1抗体 |
| YT672 | 小鼠抗β-Actin抗体 |
| YT170 | 溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒 |
| YT643 | Aurora A激酶抗体 |
| YT667 | Cyclin D3抗体 |
| YT604 | 麦芽寡糖基海藻糖合成酶 |
| YT290 | 活性氧检测试剂盒(荧光探针法) |
| YT022 | 感受态细胞快速制备试剂盒 |
| YT697 | 兔抗CD31抗体 |
| YT950 | 考马斯亮蓝R250 |
| YT731 | 兔抗IL-6抗体 |
| YT629 | 预染蛋白质分子量标准(19-117kD) |
| YT181 | DEAE-Dextran细胞转染试剂盒 |
| YT229 | NF-κB凝胶迁移探针(10μM) |
| YT876 | 封闭液(用TBS配置,含曲拉通X-100) |
| YT635 | AIF抗体(凋亡诱导因子抗体) |
| YT597 | 色*酸酶 |
| YT928 | HER1抑制剂(AC480)(BMS-599626) |
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