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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存:
533
- 靶点:
IgY
- 级别:
多克隆
- 目录编号:
WE0370
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
鸡
- 保质期:
二年
- 抗体英文名:
Donkey Anti-Chicken IgY(IgG)(H+L),Peroxidase Conjugated
- 抗体名:
HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L)
- 标记物:
HRP
- 宿主:
驴
- 适应物种:
鸡
- 免疫原:
鸡IgY
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L) HRP标记抗体,我公司供应的抗体抗原品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L) HRP标记抗体
编号:WE0370
规格:100μl
英*(代"文")名:Donkey Anti-Chicken IgY(IgG)(H+L),Peroxidase Conjugated
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别鸡IgY,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot、ELISA和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:鸡IgY
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB ECL发光检测(1:10000-200000)
WB 显色检测(1:5000-100000)
ELISA(1:5000-100000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:500-5000)
HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L) HRP标记抗体极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
K19838 嗜酸乳杆菌假定蛋白 Rabbit Anti-Lactobacillus acidophilus hypothetical protein antibody
Q00568 CDC37抗体 Anti-CDC37 Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
K11963 F肌动蛋白α2亚基抗体 Rabbit Anti-CAPZA2 antibody
Q06317 RAB27B/C25KG抗体 Anti-RAB27B Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
K17712 同源盒蛋白C6抗体 Rabbit Anti-HOXC6 antibody
K26814 神经突起诱导因子受体UNC5B抗体 Rabbit Anti-UNC5B antibody
K23462 胎盘碱性磷酸酶抗体 Rabbit Anti-Placental alkaline phosphatase antibody
Q04191 SerpinA10抗体 Anti-SerpinA10 Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
K15586 口蹄疫病毒A型抗体 Rabbit Anti-FMDV Polyprotein (VPg2 protein) antibody
K24688 **通道蛋白抗体 Rabbit Anti-Sodium hydrogen exchanger 1 antibody
K21336 神经肽Y受体2抗体 Rabbit Anti-NPY2R antibody
Q02065 PMP2/FABP8抗体 Anti-PMP2 Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L) HRP标记抗体关键词:HRP标记二抗,鸡IgY抗体,驴抗鸡二抗,鸡IgY二抗,HRP标记抗鸡IgY二抗
·高灵敏度ECL化学发光检测试剂盒
编号:WE0308
英*(代"文")名称:eECL Western Blot Kit
规格:50ml|250ml
高灵敏度化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶(HRP)配套使用的的高灵敏增强型检测试剂盒。该产品基于新一代增强型化学发光底物研制而成,在HRP的催化下产生高强度的信号,能够检测pg级别的抗原。灵敏度高、发光信号强烈持久,可以使用照相技术(X-光胶片曝光)或者其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测。
试剂盒组成:
| 组成 | 50ml | 250ml |
| eECL-A(Luminol Enhancer) | 25ml | 125ml |
| eECL-B(Peroxide) | 25ml | 125ml |
注意事项:
1、在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染及高背景。
2、避光条件下,配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定保存8小时。阳光或其他强光会影响工作液,故应避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用。
3、百奥莱博提供多种蛋白转移用膜、封闭液、一抗、酶标二抗、缓冲液等,详情请查询公司网站。
操作步骤:
1、二抗孵育完毕后,将印迹膜充分洗涤。
2、根据需要量,将eECL-A和eECL-B按照1:1的比例等体积混合,配制为化学发光检测底物工作液(一张8 cm×6 cm的膜大约使用1ml工作液)。
3、弃去洗涤缓冲液,将发光底物工作液滴加在印迹膜上,确保工作液覆盖整张膜,室温孵育3-5分钟。
4、用移液器吸去多余发光底物工作液,将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间,此过程应小心完成,避免膜与膜之间产生气泡。
5、在暗室内进行X-光胶片曝光,或将膜放置到化学发光成像仪内,按照仪器说明书进行检测。
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 胶片反相(白色条带,黑色背景) | 系统中HRP过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 膜上出现棕色或黄色条带 | ||
| 暗室中看到强烈发光 | ||
| 发光信号持续时间过短 | ||
| 信号较弱或者无信号 | 发光反应系统中HRP 过多,消 耗底物过快,引起信号迅速降低 |
稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 抗原/抗体量不够 | 增加抗原/抗体使用量 | |
| 蛋白转移率低 | 优化转移系统 | |
| 高背景 | 系统中HRP 过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 封闭不足 | 优化封闭程序 | |
| 封闭试剂选择不当 | 选择另一种封闭试剂 | |
| 冲洗不充分 | 增加冲洗时间,次数 | |
| 曝光过度 | 减少曝光时间 | |
| 抗原/抗体浓度过高 | 降低抗原/抗体使用浓度 | |
| 蛋白条带为点状 | 蛋白转移失败 | 优化转移过程 |
| 膜未平衡 | 按照说明书处理膜 | |
| 胶片与膜之间有气泡 | 曝光前去除所有气泡 | |
| 出现非特异条带 (高背景、信号维持时间较短) |
系统中HRP过多 | 稀释HRP标记物 |
| 出现非特异条带 (背景干净信号维持时间正常) |
一抗用量过多 | 进一步稀释一抗 |
| SDS 导致非特异结合 | 在实验过程中避免使用SDS |
储存条件:2~8℃,避光保存
HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L) HRP标记抗体关键词:HRP标记二抗,鸡IgY抗体,驴抗鸡二抗,鸡IgY二抗,HRP标记抗鸡IgY二抗
·BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)
编号:WE0154
英*(代"文")名称:BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)
规格:1ml|5ml
本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测,如基因表达分析,拷贝数分析,SNP基因型分析等。本产品中运用了dUTP-UNG防污染系统,在PCR反应体系配制过程中加入了dUTP,因此就形成了含有dU碱基的扩增产物。而此产物可以在下次进行PCR反应前,由PCR体系中的UNG酶处理消除。这样就有效的去除了PCR产物的残留污染,大大降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活,因此不会影响新的含dU碱基PCR产物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的 PCR缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围,对目的基因定量更准确。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0154):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0155):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0156):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成:
| 组份 | WE0154-5ml | WE0155-5ml | WE0156-5ml |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Probe,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反应程序
注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!
两步法PCR:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增。
三步法PCR:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火 | 55℃-65℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 30s |
储存条件:-20℃,避免反复冻融
北京百莱博科技有限公司是HRP标记抗体产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L) HRP标记抗体。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验滴定:用特异性抗原(或抗体)同酶标记抗体(或抗免疫球蛋白抗体)作双向琼脂扩散试验或免疫电泳试验。然后用酶的底物使沉淀弧显色,可初步鉴定其活性。最后以直接ELISA法(或在正式实验系统里)对酶结合物进行滴定( 见本节 (三)工作浓度的选择)。(2)定量和克分子比值测定:可用分光光度计测定(光程1cm)。酶量(mg/ml)=OD403nm×0.4IgG量(mg/ml)=(OD280nm-OD403nm×0.42)×0.94×0.62 (3)本法标记步骤比较简单,重复性好。缺点是酶的利用率低
问:有没有做辣根过氧化物标记的朋友啊,能不能把你们的步骤发给我。本人开始做,发现很多人用的浓度都不一样。答:1.1 试剂准备1) 10mg/mL HRP2) 0.06mol/L NaIO43) 0.16mol/L乙二醇4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中,调pH值到9.5)5) 2.5mg/mL NaBH46) 0.01mol/L磷酸盐缓冲液,pH7.41.2 操作步骤1. 10mg/mL取HRP VmL,溶液为棕黄色,加入
,从而省去了二硝基氟苯封闭HRP步骤。HRP经NaIO4氧化后形成的醛化酶可与抗体分子的氨基相连,形成斯夫氏硷,后者可进一步用NaBH4(或乙醇胺)还原生成稳定的酶标记抗体。 2. 标记步骤: (1) 称取5mgHRP溶解于1ml蒸馏水中。 (2) 于上液中加入0.2ml新配的0.1M NaIO4溶液,室温下避光搅拌20分钟。 (3) 将上述溶液装入透析袋中,对1mM PH4.4的醋酸钠缓冲液透析,4℃过夜。 (4) 加20μl 0.2M PH9.5碳酸
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