WE0227型人类cDNA厂家价格

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北京百奥莱博专业生产供应WE0227型人类cDNA厂家价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：WE0227型人类cDNA厂家价格
编号：WE0227
规格：100μl(20次反应)
英文名：Human Placenta cDNA
品牌：百奥莱博
产地：北京
  本产品是以人胎盘组织RNA为模板，Oligo(dT)以及Random为引物, 用百奥莱博的高灵敏度的逆转录酶反转录得到的PCR即用型cDNA，可用于PCR实验的阳性对照。纯度：OD260/280≈1.8

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：

 

试剂	50μl体系	终浓度
10×Taq PCR Buffer with Mg2+	5μl	1×
dNTP Mix，2.5 mM each	4μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Human Placenta cDNA	5μl
Taq DNA Polymerase，2.5 U/μl	0.5μl
RNase-Free Water	补水至50μl

注意：
1)引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)*离子浓度请以终浓度1.5-3 mM作为设定范围的参考。本产品的10×PCR Buffer中已经含有15 mM*离子，可根据丌同的引物对和模板来调节*离子浓度，由此优化反应体系。

2、将混合好的液体进行PCR反应。
3、结果检测：反应结束后取5μl反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

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·PCR Mix(含染料)(滴瓶装)
编号：WE0100
英文名称：PCR Mix(With Dye)
规格：5ml
  本产品以滴瓶包装，集成了PCR反应所需各要素及稳定剂、增强剂，对PCR反应中各成份的浓度有较高的宽容度，无需加样工具，将本产品直接滴入加有模板、引物的PCR管即可完成反应准备。本产品热稳定性高，启封后置2～8℃保存，六个月内可随时取用。本产品使用高度封闭的热启动DNA聚合酶，可有效减少非特异PCR产物扩增，配制PCR反应体系可在室温进行，但须注意热循环程序的第一步必须包括至少10分钟的95℃热启动。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测。扩增得到的大部分PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因；2～8℃存放六个月，活性无明显改变。

使用方法：
  本产品以滴瓶包装，使用时，取掉旋盖后将滴瓶倒置，滴塞口对准已加入适量模板和引物的PCR管口上方，以食指和拇指轻轻挤压滴瓶，滴入一滴反应液，即可完成PCR反应准备。正常挤压时，液滴平均体积约为25μl，可能会因挤压滴瓶用力不一，造成挤出液滴体积存在差异，但对多数PCR反应，均可获得良好扩增。

1、PCR反应体系：
 

试剂	反应体积
PCR Mix	1 滴
Forward Primer，10μM	1μl
Reverse Primer，10μM	1μl
Template DNA	≤4μl

注意：
1)引物浓度以10μM作为参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)PCR模板的使用量应视DNA性质加以调整。一般而言，在每滴PCR反应中，当模板为质粒DNA时，以1 pg至10ng为宜；当模板为细菌基因组DNA时，以1ng至100ng为宜；当模板为真核生物基因组DNA时，以10ng至300ng为宜。需注意，PCR模板绝非越多越好。过多的模板会对PCR反应产生抑制作用，且容易增高其它抑制物水平，影响扩增效果。

2、PCR反应条件：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	94℃	30 s	30-40个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)产品含有高度封闭热启动DNA聚合酶，须在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。
2)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
3)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品的扩增效率为1 kb/min。
4)可根据扩增产物下游应用设定循环数。如循环次数太少，扩增量不足；如循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，有效期2年


WE0227型人类cDNA厂家价格关键词：Human Placenta cDNA ,人类cDNA,WE0227


·G250蛋白快速染色试剂
编号：WE0290
英文名称：ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
规格：250ml
  该产品是以考马斯亮蓝G-250染料为基础，应用于SDS-PAGE凝胶的快速蛋白染色试剂。灵敏度高，最低可检测到20ng蛋白。染色过程简单，快速，无需孵育，染色后直接水洗，即可产生清晰背景。

注意事项：
1、若要获得最佳的脱色效果，可多次重复脱色步骤或在去离子水中脱色过夜。
2、将凝胶加入染色液后加热至沸腾，继续在脱色摇床上摇动5分钟，可增强染色效果。
3、本产品可重复使用2-3次，染色效果会随使用次数增加有所减弱。
4、本产品有轻微腐蚀性，请带手套操作。

操作步骤：
1、将电泳后的 PAGE 胶取出放入容器中，加入适量纯水(以充分覆盖PAGE 胶为宜)，加热至沸腾后停止，弃去液体。
2、加入适量快速染色液(液面覆盖凝胶即可)，加热至沸腾后停止，弃去染色液。
3、加入适量蒸馏水，加热至沸腾后停止，倾去蒸馏水，重复此步骤脱色至背景清晰。

实验图例

使用ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂对SDS-PAGE染色后，不同浓度蛋白染色结果

储存条件：-20℃



WE0227型人类cDNA厂家价格关键词：Human Placenta cDNA ,人类cDNA,WE0227


·红细胞裂解液
编号：WE0218
英文名称：RBC Lysis Buffer
规格：100ml
  本产品是利用细胞内外盐离子浓度差可导致细胞膜胀破的原理来裂解红细胞，主要用于实验中红细胞的去除，比如：淋巴细胞的分离纯化，经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。

使用方法：
1、向1倍体积的新鲜全血中加入3倍体积的红细胞裂解液(如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液)轻轻涡旋或颠倒混匀。
注意：如果对新鲜组织细胞进行处理，需经胰酶等消化成单个细胞悬液，离心收集细胞后再进行后续操作。
2、冰上孵育15分钟，其间轻轻涡旋混匀两次。
注意：红细胞裂解后，溶液应该是清亮透明的。
3、4℃，450×g离心10分钟收集白细胞，小心吸弃上清液。
4、向以上沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液，轻轻涡旋充分重悬白细胞(如起始血液为1ml，则加入2ml的红细胞裂解液)。
5、4℃，450×g离心10分钟收集白细胞，小心并彻底吸去上清液。
6、重悬细胞，用于后续实验。
注意：如提取RNA，最好从此步开始使用无RNase的溶液进行。

储存条件：室温(15～30℃)

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