北京现货BaldStar Taq DNA Polymeras

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名称：北京现货BaldStar Taq DNA Polymerase厂家直销
编号：WE0111
规格：500U|2500U
英文名：BaldStar Taq DNA Polymerase
品牌：百奥莱博
产地：北京
  BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效的Taq DNA Polymerase，在常温下酶的活性被完全封闭，使得该酶在低温或常温下没有活性，从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的缓冲体系使酶的应用更为广泛，使GC含量高、二级结构复杂以及低拷贝的模板，均能高效扩增。用本品进行PCR扩增，PCR产物3"末端含有A，可直接用于T/A 克隆。本产品特异性强，PCR扩增后无需胶回收去除杂带，可直接用于下游克隆或芯片杂交等实验。主要应用于常规的PCR、RT-PCR、Real-time PCR、多重PCR、基因芯片分析和SNP检测，特别适用于对特异性要求较高的PCR反应。

产品组成：

 

组份	500 U	2500U
BaldStar DNA Polymerase，5 U/μl	100μl	5×100μl
5×BaldStar PCR Buffer	1.9ml	5×1.9ml

注意：本产品的5×BaldStar Taq PCR Buffer中含有8.5mM*离子。

活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、SDS-PAGE检测纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残留DNA；
4、能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；
5、室温存放一个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
5×BaldStar PCR Buffer	10μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
BaldStar DNA Polymerase，5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度，请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	30 s	30-40个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为30-60 s，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的BaldStar Taq DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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·柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液，100×)
编号：WE0318
英文名称：Citrate Buffer(100×)
规格：100ml
  福尔马林固定时，组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。因此，对于石蜡切片，要求在进行IHC染色前，先进行抗原修复，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。本抗原修复液适合于大多数的抗原，用该修复液修复后阳性染色明显增强，抗原定位理想。

注意事项：
1、请使用足量的修复液，修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
2、使用沸水浴或高压修复时，操作请务必谨慎，尤其高压修复时，保证锅内有足量的修复液，以防止干烧。
3、推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间，如组织粘片不牢，容易掉片，请酌情减少修复时间。

操作步骤：

1、高压热修复：根据需要量，取适量本品，稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将稀释好的修复液加入高压锅内，将待修复切片浸于其中，保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内，再置于锅内修复液浴中)，盖上压力锅盖，加热至均匀喷汽，从喷汽开始计时，1~2 分钟后压力锅离开热源，自然冷却至室温，取出切片，蒸馏水冲洗后，再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次，每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大，是最常用的热修复法。

2、微波热修复：根据需要量，取适量本品，稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将切片放入盛有修复液的容器中，置微波炉内加热至沸腾，停止加热，使容器内液体温度下降保持在 95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意：请根据具体机型酌情设置条件，务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器，自然冷却至室温，取出切片，蒸馏水冲洗后，再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次，每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴，但小于高压修复。

3、沸水浴热修复：根据需要量，取适量本品，稀释100倍后即可使用(终浓度为0.01mol/L)。将待修复切片完全浸入盛有修复液的容器中，并将此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中，电炉上加热煮沸，从修复液的温度到达95℃起开始计时15~20分钟。让切片在修复液中自然冷却至室温，蒸馏水冲洗，再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次，每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。该方法效果较微波和高压修复差。

储存条件：2～8℃


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·生物素化驴抗人IgG(H+L)
编号：WE0371
英文名称：Donkey Anti-Human IgG,Biotin Conjugated
规格：100μl
本产品为生物素标记的经亲和纯化的驴抗体，特异识别人IgG重链和轻链，检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应。生物素(Biotin)与链霉亲和素(Streptavidin，SA)具有极高的亲和力，反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点，因此，链霉亲和素可同时以多价形式结合生物素。生物素化的抗体与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的链霉亲和素联合使用，将检测信号级联放大，最后通过显色反应或化学发光可检测到微量蛋白。

免疫原：人IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
应用范围：
WB 酶链亲和素检测(1：20000-400000)
ELISA(1：20000-400000)
Enzyme immunohisto/cytochemistry(1：500-5000)
Fluorescence Immunohisto/cytochemistry(1：200-1000)
Flow cytometry(1：200-1000)


北京现货BaldStar Taq DNA Polymerase厂家直销关键词：BaldStar Taq DNA Polymerase,WE0111

SV0847 Q5 定点突变试剂盒（不含感受态细胞）
WE0299 NC膜(0.22μM) Nitrocellulose Membrane(0.22μM)
BTN131199 一步法96孔板单菌落质粒DNA提取试剂盒(真空法) One-step 96-wells plate single colony plasmid DNA Extraction Kit
SV1321 dsRNA Ladder
RFT168 T4连接酶 T4 DNA ligase
KFS243 100×蛋白酶K 10×Proteinase K
SY0483 依托泊甙溶液(100mM) Etoposide (100mM)
SV0451 KpnI-HF限制性内切酶 KpnI-HF Restriction Endonuclease
BTN130823 多点突变试剂盒 Multipoints Mutagenesis Kit
HR0402 Annexin V-EGFP/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒 V-EGFP/PI Annexin double staining cell apoptosis detection kit
SY0122 C-REL-Luc荧光素酶报告基因质粒 C-REL Luciferase Reporter Plasmid
YT206 ARE凝胶迁移突变探针(1.75μM) ARE Mutation Probe For EMSA(1.75μM)

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