ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)(国产,进口)

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)(国产,进口)，产品信息：

类别：蛋白质研究

英文名：Western blotting(Mouse IgG)

产品名	产品编号	包装规格
ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)	QN1158	1盒

编号：QN1158

规格：1盒

英文名：Western blotting(Mouse IgG)

品牌：百奥莱博

产地：北京

本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色，含有HRP标记抗小鼠IgG二抗。

 

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。

 

试剂盒组分：

封闭试剂———————————30g(可配制400ml)

10倍浓缩抗体稀释液——————50ml

HRP标记小鼠IgG二抗——————0.3ml，效价1:500～1000

ECL显色液-——————————25mlA+25mlB

 

常规电泳转膜后:

1)清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。

2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。

3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。

4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。

注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。

5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。

6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量，按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。

7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次10min。

8)根据用量，取ECL发光液A、B等量混匀，加在膜正面，暗室显色1～5分种。倾去显色液，小心用纸吸去显色液，在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片，做好标记，轻轻的放在膜上，显色30秒到1分钟，取出胶片浸入显影液中，观察显色情况，再放入定影液中1分钟。根据条带强弱，再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。

注意事项：

1.请根据一抗来源选择试剂盒。

2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果

条带过弱，可增加抗体浓度，可延长抗体孵育时间或加长感光时间。

3.TBS-T(0.01M，PH7.6)配制方法：称取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)

 

储存条件：-20℃避光，有效期一年。

ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG)(国产,进口)专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：小鼠IgG,QN1158,ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠IgG),Western blotting(Mouse IgG)

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编号	类别	名称
QN0310	蛋白类	转铁蛋白
QN0915	其他分子生物学试剂	内毒素去除剂
QN0529	抑制剂激活剂	磷酸二脂酶抑制剂(IBMX)
QN0776	其他生化试剂	1-丁基-3-甲基咪唑四*硼*(代"酸")盐
QN0324	蛋白类	马心细胞色素C
QN0738	其他生化试剂	麦芽酚
QN0397	酶和辅酶	碱性蛋白酶
QN1243	蛋白质研究	封闭绵羊血清(原液)
QN0571	其他分子生物学试剂	腺苷
QN1085	蛋白质研究	2×Tris-Tricine-SDS-PAGE 上样缓冲液 (含DTT)
QN0290	蛋白类	DiI标记乙酰化低密度脂蛋白
QN0436	抑制剂激活剂	胰蛋白酶抑制剂
QN0457	酶和辅酶	TEV蛋白酶
QN0132	缓冲剂类	MES(吗啉乙磺酸)
QN0852	其他生化试剂	甲基硫*(代"脲")嘧啶
QN0659	其他生化试剂	原花青素
QN0559	其他分子生物学试剂	小牛胸腺DNA
QN0576	其他生化试剂	布拉地新*盐
QN0722	其他生化试剂	*化胆碱
QN0118	维生素类	维生素B9(叶酸)
QN1109	蛋白质研究	4×非变性蛋白上样缓冲液
QN0299	蛋白类	β-乳球蛋白 来源于牛奶
QN0686	其他生化试剂	甜蜜素

 

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