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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
335
- 英文名:
SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT)
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")4×蛋白上样缓冲液(含DTT)销*(代"售"),我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:4×蛋白上样缓冲液(含DTT)销*(代"售")
编号:QN1168
规格:10ml
英文名:SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT)
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,*酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的*键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱*酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。*酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
使用说明:
1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
注意事项:
1、聚丙*(代"烯")酰胺凝胶浓度为8%时*酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有*酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
欲咨询购买4×蛋白上样缓冲液(含DTT)销*(代"售"),请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·环孢霉素A
编号:QN0099
英文名称:Cyclosporin A
规格:250mg
本品是一种免疫抑制剂,也称Cyclosporine或Antibiotic S 7481F1,是一种常用的免疫抑制药物,在器官和骨髓移植中用于阻止排斥反应。Cyclosporin A通过干扰T细胞的活性及生长来降低免疫系统活性 [1][2]。Cyclosporin A与淋巴细胞尤其是T细胞的胞内受体cyclophilin结合形成复合物表面,从而特异性靶向攻击calcineurin (phosphatase 2B) 活性, 其IC50 值为5 nM。Cyclosporin A也会抑制活化的T细胞中IL-2产物,其IC50 值为10 nM[3]。不论是体外培养FJ17细胞还是FJ17转染的小鼠模型体内,Cyclosporin A都能够抑制白介素IL-2和IL-5产生,结果表明cyclosporin A通过T细胞中IL-5合成抑制的方式抑制气道嗜酸性过敏炎症反应[4]。cyclosporin A以干扰线粒体通透性转运孔(MPTP)打开的方式影响线粒体功能,进而抑制细胞色素c释放和调控细胞凋亡[5]。
CAS:59865-13-3
分子式:C62H111N11O12
分子量:1202.61
储存条件:2~8℃
纯度:97%
别名:环孢霉素A;环孢多肽A;环孢灵;环孢素;环胞霉素A
性状:无臭无味
溶解性:在甲醇、乙醇或乙*(代"腈")中极易溶解,在醋酸乙酯中易溶,在丙*(代"酮")或乙*(代"醚")中溶解,在水中几乎不溶。
使用浓度:
Cyclosporin A的具体使用浓度请参考相关文献,并根据自身实验条件(如实验目的,细胞种类,培养特性等)进行摸索和优化。
应用实例(仅作参考):
1) 为检测Cyclosporin A对calcineurin的抑制活性,用100 nM Cyclosporin A 处理Jurkat cells 1h,然后测定磷酸酶活性,发现Cyclosporin A有效抑制Ca2+依赖的磷酸酶活性。另外,在含有OKT3和PMA及不同浓度Cyclosporin A (0.001-10000nM)培养基中,Jurkat细胞孵育24h,检测IL-2产物的活性,发现Cyclosporin A抑制IL-2的IC50值为10nM[3]。
2) 为检测Cyclosporin A在体外对T细胞中细胞因子的作用,FJ17与mitomycin-C处理的脾细胞一起培养24h,在培养体系中分别加入不同浓度的Cyclsporin A (1,10,100nM),检测IL-2, IL-4和IL-5产物,发现Cyclosporin A 以剂量依赖的方式抑制IL-2, IL-4和IL-5产物。另外,在体内实验中,发现30mg/kg Cyclosporin A明显抑制IL-2和IL-5的mRNA表达[4]。
注意事项:DMSO溶解配制储存液(100 mg/ml),或乙醇配制储存液(200 mg/ml)。建议分装后-20ºC避光保存,避免反复冻存,至少可存放6个月。
4×蛋白上样缓冲液(含DTT)销*(代"售")关键词:4×蛋白上样缓冲液,SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT),4×蛋白上样缓冲液(含DTT),QN1168
SV1470 SHuffle T7 表达 E. coli 感受态细胞
YT255 生物素标记STAT3凝胶迁移探针(0.2μM) Biotin-labeled STAT3 Probe For EMSA
KFS335 PCNA细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法) PCNA cell proliferation Detection Kit
SY0581 细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒 Cell Senescence β-Galactosidase Staining Kit
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BTN130635 T7核酸内切酶I T7 Endonuclease Ⅰ
HR0624 Pluronic F-127 F-127 Pluronic
SY0215 ERRE-GFP报告基因质粒 ERRE GFP Reporter Plasmid
RFT154 2×Tricine上样缓冲液(还原,2×) 2×Tricine Loading Buffer (reducing,2×)
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ALH189 miRNA对应cDNA第一链合成试剂盒 First strand synthesis kit of cDNA corresponding to miRNA
YT562 天冬*酸转*酶 Aspartate Transaminase (Crude Enzyme)
BTN81208 印迹膜抗体稀释液 Antibody Dilution Buffer
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SV1303 1 kb DNA Ladder
YT148 线粒体膜电位检测试剂盒 Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1
KFS233 TRAIL蛋白检测试剂盒 TRAIL Detection Assay(Western Blot)
SY0473 细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 647/PI) Annexin V-Alexa Fluor 647/PI Apoptosis Detection Kit
4×蛋白上样缓冲液(含DTT)销*(代"售")关键词:4×蛋白上样缓冲液,SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT),4×蛋白上样缓冲液(含DTT),QN1168
HR0388 蛋白浓缩柱 Protein concentration column
SY0111 AAT-promoter-Luc荧光素酶报告基因质粒 AAT-promoter luciferase reporter plasmid
BTN160697 1×TBS(含5%BSA,0.1%Tween20溶液)
KFS086 4-20%预制胶(205-6.5 kDa分离范围;12个样/胶)
ALH071 血液miRNA提取试剂盒 Blood microRNA Extraction Kit
YT402 核酸酶/RNA/DNA清除剂(喷雾清除剂) RNase, DNase, RNA and DNA Away
BTN130530 His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 Protease Inhibitor for His-tagged Protein
BTN3091 液相RNase清除剂 Solution RNase Scavenger
SV1021 9°N DNA 连接酶
YT048 SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒 SDS-PAGE Gel Fast Parparation Kit
BTN110801 核酸浓缩剂 Nucleic Acid Concentrate
SY0359 SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 SDS-PAGE Gel Preparation Kit
SV0143 BmtI限制性内切酶 BmtI Restriction Endonuclease
KFS331 细胞活力检测试剂盒(96孔荧光计) "Cell Viability Detection Kit
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文献和实验系统的负担,导致包涵体的形成。生长温度可能是影响大肠杆菌高度表达目的蛋白的最重要因素。低温培养能在一定程度上抑制包涵体的形成。IPTG 的浓度对表达水平的影响也非常大。所以通过试验确定最佳的培养条件是很必要的。6. 将所有样本室温最高速度离心 1 分钟,弃上清,沉淀重悬于 100 微升 1×SDS 蛋白上样缓冲液中,100℃ 加热 5 分钟,室温最高速度离心 1 分钟,取 15 微升样品上样于 SDS 聚丙烯酰胺凝胶,用 SDS-PAGE 观察表达产物条带,从而确定优化的培养条件。二、大量表达靶蛋白
-PAGE 电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次(对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤)。 加入预冷的 RIPA 液(含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂),RIPA 液的用量:按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注:悬浮细胞,收集
素的供试品溶液内毒素浓度,称为Ct;3. 计算该试验条件下的回收率R=(Cs–Ct)/λm×100%4. 当R在50%~200%之间,则认为在此试验条件下供试品溶液不存在干扰作用。5. 当R在50%~200%之外,需对供试品进行系列稀释(稀释倍数不得超过最大有效稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰,每一稀释溶液都重复步骤1-3,直到内毒素的回收率R在50%~200%之间。选择回收率R最接近100%的稀释倍数进行内毒素检测。【批准文号】[88]卫药准字SJ-02号【销售企业】上海榕柏生物技术有限
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