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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
997
- 英文名:
Maximov Fixative Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货Maximov固定液供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货Maximov固定液供应
编号:BTN131288
规格:250mL
英文名:Maximov Fixative Solution
品牌:百奥莱博
产地:北京
本固定液主要成分为*化汞、重铬酸*、甲醛。与Zenker固定液相比,本产品不含铬酸,所以重铬酸*未被酸化,因此,对细胞浆固定较好。甲醛有促染胞浆的作用,增加对酸性染料的亲和力。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
北京现货Maximov固定液供应正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·Ribo-SPIA cDNA扩增试剂盒
编号:BTN131083
英文名称:Ribo-SPIA RNA Amplification Kit
规格:20次
血液样品和各种临床样品(包括组织检查、FFPE切片或少量细胞样品)都是基因表达分析和诊断的常见材料,但这些样品通常数量有限,质量不高,还没法进行第二次取样。所以得到足够RNA量供后续试验是一个非常棘手的瓶颈。为解决这一问题,本公司根据Ribo-SPIA技术,开发了本产品。Ribo-SPIA技术的核心是利用DNA/RNA嵌合引物,以带polyA尾巴的mRNA为模板进行逆转录并得到双链cDNA、RNase H不间断地在cDNA第1链中的RNA部分产生裂口,DNA聚合酶以此裂口为基础进行链取代聚合反应,产生cDNA单链。
产品特点:
1.高效,能线性扩增1000-10000倍,能用5-100 ng总RNA模板扩增得到5μg左右的单链cDNA(扩增的cDNA主要来源于总RNA中的mRNA)。
2. 步骤简单方便,扩增在恒温进行,只需要4个小时,不需要特殊仪器设备。
3. 保真性好,保持RNA样品中各分子的相对丰度。
4. 尤其适用于RNA产量和质量都不高的样品。
5.扩增得到的单链cDNA能直接用于各种后续试验,包括qPCR、芯片分析、杂交反应等。
6. 本产品足够做10次双链cDNA的合成,20次SPIA扩增。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| cDNA一链合成缓冲液 | 40μl |
| MMLV逆转录酶 | 10μl |
| cDNA二链合成缓冲液,5× | 160μl |
| cDNA二链合成酶混合液20× | 40μl |
| SPIA RT引物 | 40μl |
| SPIA反应液,5× | 320μl |
| SPIA扩增引物 | 320μl |
| SPIA酶混合液 | 120μl |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为1年。
使用方法:
一:样品RNA的制备
本产品不含RNA相关试剂,用于Ribo-SPIA扩增的每个批次的RNA样品最好先做一个预实验。总RNA样品的浓度必须在1-20ng/μL,一次RIBO-SPIA所需总RNA的量为1ug。也可以使用mRNA,一次Ribo-SPIA所需总mRNA的量为5-100 ng。过低则需要浓缩,过高则需要用无RNase的水稀释。RNA必须经过DNase处理,不能含DNA污染。微量提取时不能使用核酸类的助沉剂。注意:本产品只能扩增含带polyA尾巴的RNA,不能扩增DNA和不含polyA尾巴的RNA。
二:一管式双链cDNA的合成
1.在0.5mL PCR管中,按下表配制双链cDNA合成反应。
注意:最好每次实验设置一个阴性对照组,在此对照中用超纯水替代自备的mRNA或总RNA:
| 成分 | 用量 |
| 自备mRNA或总RNA | 4μL mRNA(5-100ng)或4μL总RNA(1ug) |
| SPIA RT引物MTA3 20uM | 1μl |
| 65℃,5分钟后室温放置2分钟,短暂离心后放4℃ | |
| cDNA一链合成缓冲液 | 4μl |
| MMLV逆转录酶 | 1μl |
| 轻柔吹打混匀后得到10μL的反应体系。42℃保温90分钟合成第一链cDNA。结束后70℃保温15分使酶变性,最后4℃放置,然后加入下列成分,得到80μL反应体系。 | |
| 超纯水 | 50μl |
| cDNA二链合成缓冲液 | 16μl |
| cDNA二链合成酶混合液 | 4μl |
| 轻柔吹打混匀后,短暂离心,16℃保温2小时合成cDNA第二链,然后75℃ 15分灭活酶,最后4℃放置待用 | |
三:SPIA扩增
2.在0.5mL PCR管中,按下表配制20μL的SPIA反应体系。注意:最好设置两个阴性对照组,在此两个对照中分别用超纯水替代SPIA引物和cDNA双链反应液。
| 成分 | 用量 |
| cDNA双链反应产物 | 40μL(来于上步) |
| SPIA扩增引物10uM | 16μl |
| SPIA反应液,5× | 16μl |
| 超纯水 | 42μl |
| 94℃20秒后50℃放置复性待用 | |
| SPIA酶混合液 | 6μl |
| 轻柔吹打混匀后得到120μL反应体系,50℃扩增60分钟,最后4℃放置 | |
四:SPIA扩增产物的检测
3. 取5μL SPIA扩增产物进行PAGE电泳检测。标准的反应结果是产生长度在200-2000bp之间的产物。
4. 如果产物将用于PCR定量,则可以不经过纯化直接使用,如果需要用于芯片杂交和浓度测定,则需要按常规的方法纯化cDNA以便去除残留的dNTP和引物。
5. OD检测纯度和浓度。在OD260的波长下测样品你给的光吸收。由于扩增产物是单链DNA,故1OD260=33ug/mL。
6. 所得DNA可以放-20℃长期放置。
北京现货Maximov固定液供应关键词:Maximov固定液,BTN131288,Maximov Fixative Solution
·2%明胶溶液(PCR级)
编号:BTN70905
英文名称:Gelatin Solution,PCR Grade
规格:1.5mL
大量实验显示一定比例的明胶能够促进PCR反应。本产品为2%的明胶溶液,按1/5到1/20(具体取决于PCR反应体系)的比例加入到PCR反应体系中,可以提高PCR的效率。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
·Benzonase核酸酶
编号:BTN101001
英文名称:Benzonase Nuclease
规格:500U
Benzonase是由粘质沙雷氏菌分泌的、由两个大小为26 kD的亚基组成的一种广谱核酸酶,由Benzon公司最先商品化,故名Benzonase。其活力比DNase I 强34倍,能以相同的效率酶切单联和双链DNA和RNA,将其消化成3-5 碱基长度(杂交限度以下)的5´-单磷酸寡核苷酸。其活性需要Mg2+,最佳pH在6-10 之间,最适温度在35-44℃。本产品是在野生型的Benzonase的基础上经过基因工程改进而得。
产品特点:
1.微量本产品就能高效降解所有形式(包括单链,双链,线性和环状)的DNA和RNA,尤其适合从细胞裂解物中去除核酸,降低样品粘度而不影响蛋白电泳图谱。
2.在有变性剂存在的条件下(如4M 尿素)还有活性,可以直接加入很多蛋白裂解液中。
3.降解核酸完全,符合FDA 关于核酸污染的处理规程,可以用于工业生产。
4.可以用于蛋白提取、2D凝胶电泳、Western Blot、免疫沉淀等实验。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期两年。
活性定义:在标准反应体系内30分钟内使OD260改变1.0的酶量,相当于彻底降解37μg DNA的酶量。
使用方法:
一、酶的稀释
本产品浓度为1U/μL,如果需要稀释Benzonase,需要自备酶稀释液,稀释液的配方是:50mM Tris-HCl pH8.0,20mM NaCl,2mM MgCl2。
在稀释液中的Benzonase 只能在4℃放置数天。
二、用于去除核酸的标准试验(用户可以以此为参考设计自己的实验)将500ng鲑鱼精DNA 溶解在50mM Tris-HCl pH8.0,1mM MgCl2,0.1mg/mL BSA中,然后加入90U的Benzonase,37℃保温4小时,只剩下0.2ng可以杂交检测的DNA,如果23℃保温4小时,只剩下0.5 ng可以杂交检测的DNA。如果0℃保温4小时,只剩下1ng可以杂交检测的DNA。
三、用于降低E.coli 裂解液的粘度的标准试验(用户可以以此为参考设计自己的实验)
将7.5 g E.coli 悬浮于15mL悬浮液(10mM Tris-HCl pH9.0,1mMEDTA,6mM MgCl2)中,加入适量的本产品,然后将悬浮液经过弗氏压碎器破碎后迅速置于0℃冰上。
客户可以根据下表自行选择加入本产品的量
| 本产品在裂解液中的浓度 | 得到不粘稠裂解液所需孵育时间 (不粘稠是以得到可滴落的E.coli裂解液为标准) |
| 0.24U/mL | >60min |
| 2.4U/mL | 15min |
| 8U/mL | 5min |
| 24.0U/mL | 1.25min |
答客问:
Q:什么情况下应该使用Benzonase核酸酶?
A:Benzonase核酸酶的应用领域包括:降低样品粘度以利操作(例如重组蛋白纯化,哺乳动物细胞裂解特下游要求粘度较低等情况):减少存放的外周血单核细胞(PBMC)的结块现象,蛋白复性前高质量包涵体的制备,去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响。
Q:怎样灭活Benzonase核酸酶?如何去除?
A:采用EDTA螯合金属离子会可逆地抑制Benzonase活性,极端条件会造成不可逆失活,例如100mM NaOH,70℃处理30分钟等,Benzonase可以用色谱法从目的产物中分离出去,由于这种核酸内切酶极其稳定,建议在终产物中要求不含有核酸酶的应用中不要使用Benzonase。
Q:我的Benzonase核酸酶遗忘在桌上了,还能用吗?
A:根据破坏性稳定性测试,Benzonase 核酸酶非常稳定,即使在37℃下孵育数月仍能保持>90%的活性。
Q:我需要使用别的缓冲液,哪些条件是Benzonase 核酸酶必需的?哪些条件会降低它的活性?
A:Benzonase核酸酶的活性需要1-2mM Mg2+,而在单价阳离子浓度>50%,磷酸浓度>20mM,硫*(代"酸")铵浓度>25mM等情况下,Benzonase的活性会降低50%
Q:Benzonase核酸酶与蛋白酶抑制剂混合物兼容吗?
A:可以兼容,但是对于含有EDTA 配方的蛋白酶抑制剂混合物要特别小心,EDTA浓度大于1mM时会抑制Benzonase的活性。
Q:我的目的蛋白不溶,需要进行变性条件纯化,Benzonase 核酸酶能在尿素环境消化核酸吗?
A:实际上Benzonase核酸酶在有尿素(浓度可达6M)的情况下会增加活性,在尿素浓度为6M时活性先增加,随着时间处长活性又有降低。
尿素7M时,Benzonase核酸酶15分钟后出现变性并失活。但是在酶失活前多数核酸已经降解了。如果Benzonase 核酸酶的原浓度较高时会部分补偿7M 尿素的影响。
北京现货Maximov固定液供应关键词:Maximov固定液,BTN131288,Maximov Fixative Solution
GL0154 SOC固体培养基粉剂 1L
GL1314 DTT溶液(1mol/L,RNase free) 10ml
GL0918 亮绿SF染色液(1%) 100ml
GL1986 甘油三酯(TG)检测试剂盒(GPO-PAP双试剂比色法) 100T
SK169 α-半乳糖苷酶检测试剂盒 α-GAL Test Kit
SNM442 蛋白银染试剂盒 Protein silver staining kit
GL0644 黏蛋白染色液(温和甲基化法) 2×50ml
GL1751 乙酸*溶液(3mol/L,pH5.2) 100ml|500ml
SNM558 DMEM高糖培养基(不含L谷*酰胺,不含丙*(代"酮")酸*) DMEM high glucose medium
SNM240 Xmol/L盐*(代"酸") Xmol/L hydrochloride
GL0342 甲**(代"胺")蓝染色液(1%,硼*(代"酸")盐法) 100ml
GL1500 考马斯亮蓝快速染色液 "100ml
北京百莱博科技有限公司专业生产细胞生物学试剂产品,欢迎来电咨询选购北京现货Maximov固定液供应。
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