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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
666
- 英文名:
miRNAload
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输和-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京miRNA尿素-PAGE上样液现货是高品质的核酸电泳和回收产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多miRNA尿素-PAGE上样液等核酸电泳和回收产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京miRNA尿素-PAGE上样液现货
编号:BTN70608
规格:1.5mL
英文名:miRNAload
品牌:百奥莱博
产地:北京
本品是6×的miRNA尿素-PAGE变性电泳上样液,含有RNase-free的去离子甲酰胺、RNase-free的EDTA和RNase-free的染料等。
产品特点:
1. 即开即用,不需要制备RNase-free的各种溶液。
2. 使用简单,电泳时,先将miRNA样品与本上样液1:5混合,70℃加热处理2-3分钟后,0℃冷却即可直接上样。
3.染料分子小,不会干扰mi R N A的染色。
4.跟本公司的一站式miRNA 尿素-PAGE电泳套装兼容。
5.还可以用于miRNA的琼脂糖电泳。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
我公司的北京miRNA尿素-PAGE上样液现货,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·植物RNA提取试剂盒2.0(无*仿柱式提取)
编号:BTN160907
英文名称:Plant RNA Column extraction kit 2.0
规格:50次
本试剂盒是无酚无*仿柱式植物RNA提取试剂盒(BTN160906)的升级产品。不仅不需要*仿处理,还解决了提取的植物总RNA中出现基因组DNA污染这一难题,提取的RNA通过PCR验证不含基因组DNA污染。
试剂盒特点:
1. 免酚和*仿处理,操作安全可靠。
2. 简单快速,处理一个样品只需要约十分钟。
3. RNA 纯度更高,平均 OD260/280一般都在2.0左右,能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
4. 目前已测试过上百种植物。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式植物RNA提取产品。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| 膜反应液 | 2.5ml |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 0.5ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
储存条件:常温运输,4℃保存,DNase低温运输保存,有效期一年。
使用方法:
1. 估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNA保存液中的植物组织需用纸吸去RNA保存液体后再剪切成小块),放入10-15mL塑料离心管中,加入1mL溶液A,然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫,但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎植物组织,砚磨完后加入1mL溶液A。
注意:溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份,匀浆液会多于1mL,转移时也只取1mL。
4.室温12000~15000g离心3~5分钟,管底沉淀为细胞破碎物。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。
6. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物,属于正常现象),千万不要去掉沉淀,一定要把所有的混合物上柱。
7. 将一半的溶液(如果有沉淀,则先混匀)转移到离心吸附柱中,13000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 将剩下的一半溶液(如果有沉淀,则先混匀)转移到同一离心吸附柱中,13000-15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。再加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可,但如果在第7 步加入溶液B后有沉淀产生,则需要洗三次,每次加入的通用洗涤液的量分别为0.4、0.3和0.3mL。
10. 12000rpm室温离心10秒以便去除残留液体。此步很重要,否则残留的通用洗柱液会抑制后续反应中DNase的活性。
11. 将10μl(10 U)的RNase-free DNase 加入到50μl 37℃预热的DNA膜反应液中,吹打混匀配制成DNase工作液。
12. 将DNase工作液在37℃预热1分钟,然后全部加入到离心吸附柱中,室温放置5分钟。注意:5分钟一般足够降解大多数情况下的DNA污染。如果DNA 没有彻底降解(可能由于样品中残留的杂质抑制了DNase的活性),此步的保温时间可以适当延长到10分钟或15分钟。
13. 直接在离心吸附柱中加0.7mL 通用洗柱液,盖上盖后颠倒数次混匀。
14. 12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
15. 再加0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
16. 12000rpm室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇(通用洗柱液中的成分)会影响RNA的使用。
17. 将离心吸附柱转移到RNase-free 收集管中,加入30-50μl RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
18. 13000-15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
19. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
20. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
21. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
北京miRNA尿素-PAGE上样液现货关键词:BTN70608,miRNA尿素-PAGE上样液,miRNAload
HR0597 高尔基体染色试剂盒 Golgi staining kit
SY0207 ATF1-GF报告基因质粒 ATF1 GFP Reporter Plasmid
YT291 过氧化*检测试剂盒 Hydrogen Peroxide Assay Kit
BTN60101 *苄青霉素干粉 Ampicillin Powder
ALH233 长片段Taq DNA聚合酶 Long Taq DNA Polymerase
YT552 L-谷*酸氧化酶 L-Glutamate Oxidase (Crude Enzyme)
WE0280 蛋白分子量Marker Protein Molecular Weight Marker
BTN71205 柱式土壤DNA提取试剂盒 Soil DNA column extraction kit
SV1282 Quick-Load 1 kb DNA Ladder
YT140 Caspase 3 活性检测试剂盒 Caspase 3 Activity Assay Kit
KFS225 细胞色素C蛋白检测试剂盒 cytochrome C Detection Assay(Western Blot)
SY0464 多聚D-赖*酸溶液(5mg/ml)(分子量15万~30万)(细胞培养级) Poly-D-lysine Solution (5 mg/ml), Mw 150,000-300,000
SV0395 HhaI限制性内切酶 HhaI Restriction Endonuclease
BTN140634 MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒 MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
HR0376 丙*(代"烯")酰胺溶液(30%, 29:1) Acrylamide solution (30%, 29:1)
SY0103 SRE-Luc荧光素酶报告基因质粒 SRE luciferase reporter plasmid
BTN131272 Masson三色染色试剂盒 Masson Staining Kit
BTN100203 通用型LAMP试剂盒 Universal Loop-Mediated Isothermal Amplification Kit
SV1654 pCLuc Mini-TK 2 载体
YT393 M-MuLV反转录酶(RNase H-)(逆转录酶) M-MuLV Reverse Transcriptase(RNase H minus)
北京miRNA尿素-PAGE上样液现货关键词:BTN70608,miRNA尿素-PAGE上样液,miRNAload
SV1004 Phusion HF 反应缓冲液套装
YT040 Western及IP细胞裂解液(无抑制剂) Cell lysis buffer for Western and IP without inhibitors
KFS122 高*酸化物 DiIC12(3)
SY0350 5×非变性蛋白上样缓冲液
SV0122 BfaI限制性内切酶 BfaI Restriction Endonuclease
KFS323 Alarma Blue细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 "AlamaBlue Cell Viability Assay Kit
HR0181 藻类蛋白提取试剂盒(2D电泳用) Algal protein extraction kit (2D electrophoresis)
YT950 考马斯亮蓝R250 Coomassie brilliant blue R250
BTN120510 ATP依赖的DNase ATP Dependent Dnase
HR0572 血管通透性测试染色试剂盒 Vascular permeability test kit
SV1521 β1-4 半乳糖苷酶
YT286 一氧化*(代"氮")检测试剂盒 Nitric Oxide Detection Kit
BTN50901 菌落PCR试剂盒2.0 Colony PCR Kit 2.0
SY0613 重组人IFN-β1b Recombinant Human IFN-β1b
SV0805 Nb.BsrDI切刻内切酶 Nb.BsrDI切刻内切酶
WE0275 Bradford蛋白定量试剂盒 Ultra Bradford Protein Assay Kit
BTN130949 革兰氏阳性菌DNA提取试剂盒(百万碱基级) Gram positive bacteria DNA extraction kit(millions of base)
SY0246 荧光定量PCR核酸染料(20×) nucleic?acid?gel?stain, 20×concentrate in?water
我公司生产供应销*(代"售")的核酸电泳和回收正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购北京miRNA尿素-PAGE上样液现货。
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文献和实验可以采取现在比较常用的TRIzol一步法。不要使用带柱子的RNA提取试剂盒,因为除了专门用于提取miRNA的试剂以外,绝大部分柱子无法捕获20nt左右的miRNA。 2、电泳 (1)配制15%的尿素变性PAGE胶,可以先用预冷的0.5XTBE缓冲液作为电泳缓冲液,60V预跑30min。 (2)将样品与RNA loading buffer按比例混合,70℃预热5min,立即放置冰上。 (3)上样前,用缓冲液冲洗点样孔,防止点样孔中的杂质影响电泳。 (4)点样时,使样品均匀铺在点样孔底部
或northern时,你必须验证分析只检测目的miRNA,而不是其它成员。我们在玉米(Zea)RNA载体背景中加入合成的成熟miRNA(IDT)来验证。 就northern来说,每个miRNA家族成员的合成miRNA在含有8M尿素的15% PAGE胶上进行。优化杂交温度,让LNA探针只与目的miRNA结合,而不与其它成员结合。一旦利用加标策略建立了适当的northern杂交条件,就能应用于实验样品。 3. 原位杂交:我们也利用Exiqon的DIG标记的miRCURY LNA
反应,有必要对Hp特异性抗原进行纯化后使用,大量研究表明Hp尿素酶为一种理想的Hp特异性抗原成分。 我们在国内外首次应用Sephadex G200柱从Hp超声波破碎物离心上清中,一次性提纯了Hp尿素酶抗原,SDS―PAGE分析结果表明,所提取的Hp尿素酶抗原中仅含有66000及30000两种蛋白成分,与Hp尿素酶蛋白两种亚基的大小完全相同,提取物中几乎不含有其它杂蛋白成分。经Western blot分析证明所提纯的Hp尿素酶抗原仍具有良好的抗原性。与国外报道中使用的Sephacryl
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