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大鼠肺泡巨噬细胞

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  • 上海彩佑实业有限公司
  • 上海
  • 2025年07月14日
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    • 细胞类型

      见说明书

    • 组织来源

      human rb

    • 物种来源

      人,大小鼠

    • 免疫类型

      见说明书

    • 细胞形态

      贴壁或悬浮

    • 运输方式

      低温运输

    • 年限

      5年

    • 生长状态

      见说明书

    • 规格

    1、细胞名称:大鼠肺泡巨噬细胞
    2、生长特性:贴壁,悬浮,半悬浮半贴壁
    3、细胞生长条件:
    产品细节图片1
    培养条件:640+10%FBS+1%双抗
    温度:37℃
    空气条件:5% CO2,,95% AIR
    传代方法:1:2传代,2~3天换液
    冻存条件:90%FBS+10%DMSO
    二.大鼠肺泡巨噬细胞使用方法
    1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
    取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
    2、细胞传代:
    1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
    3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
    4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
    3、细胞冻存:
    1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
    3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
    4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。 
    4、细胞复苏:
    1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
    2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
    3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
    4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
    大鼠肺泡巨噬细胞注意事项
    培养瓶里的培养基血清浓度为5%,建议更换成自己配好的新鲜培养基。由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,这时请在拍照后将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基。(这里是针对原来完全培养基FBS浓度是10%的情况,如果原来FBS浓度是20%,可以增加到25%FBS浓度)   收到细胞后如细胞状态不佳或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系并提供图片,以便售后处理。7天内反馈,细胞本身问题免费重发如人为原因导致可根据实际情况酌情处理;7天内未接到任何反馈视为合格,不予免费售后

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