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- 文献和实验
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2430
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连桥生物
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现货
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见说明
- 规格：
见说明
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文献和实验药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。8.避免血清干扰。用含15％胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10％胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。实验步骤贴壁细胞：1.收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。2.5%CO2，37℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）,加入浓度梯度的药物,原则上，细胞贴壁后即可
。 用含15%胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。 二、实验步骤 （一）贴壁细胞 1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100 ul，铺板使待测细胞调密度至1 000-10 000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。 2. 5%CO2，37 ℃孵育，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板），加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可
红细胞时，应选用孔底呈U型的微量板，如用火鸡或鸡红细胞时，应用孔底呈V型的微量板）。 微量板横向放置：垂直方向称列，如孔A1-H1称第1列；水平方向称行，如A1-A12称A行。 （2）除第1列外（A1-H1），每孔加50ul PBS（0.01M， pH 7.2） （3）A1-G1每孔各加100ul标准抗原或待检病毒，H1加50ul PBS作阴性对照。 （4）用多孔加样器从第1列各孔分别取50ul抗原，由第1至第12列做对倍稀释，最后1列弃去50ul。 （5）每孔加50ul红细胞，轻弹微量板
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