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文献和实验技术、TALEN技术和CRISPR/Cas9技术的基因敲除研究。 实验流程1. 基因组DNA的准备:提取野生型和突变型细胞的基因组DNA。Genloci公司专为阳性克隆筛选设计的TNA抽提试剂盒也能帮您的忙,只需500个左右的细胞即可提取全基因组DNA。 2. 杂交DNA的准备:a) PCR引物设计:一般扩增产物长度为300~600 bpb) PCR扩增:获得杂交DNA 3. Cruiser™酶筛选阳性克隆:无需纯化DNA,直接使用PCR产物,混合体系后45℃下反应15~20 min K562
NEB 发布:GenomONE™ 为诱导 iPSC 形成「保驾护航」
间充质干细胞(MSC, mesenchymal stem cells)是干细胞家族的重要成员,属于多能干细胞,因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。诱导性多能性的间充质干细胞(iPMSCs)是药物筛选、再生医学和细胞治疗的新型候选药物。然而,用于生成骨髓间充质干细胞的诱导性多能性间充质干细胞(iPSC),在导入编码基因的转录因子中,往往伴随有在靶细胞基因组的插入时发生突变的风险。 由于近年来对骨髓间充质干细胞认知地深入,在造血系统、免疫
近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球专利技术TetraOneTM KO,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脱靶效应困扰的革命性技术。TetraOneTM KO的出现,是ES打靶技术制备基因敲除鼠的一个重大突破。基因组编辑的技术进展传统ES打靶、TALEN和CRISPR/Cas9是基因组编辑的三大技术及主要工具。新一代核酸酶基因编辑技术
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