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- Cmbio
- 进口/上海
- CM6339
- 2025年12月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
兔椎间盘纤维环细胞
- 库存：
100
- 供应商：
上海淳麦生物
- 细胞类型：
兔椎间盘纤维环细胞
- 物种来源：
详细请联系咨询
- 运输方式：
常温/干冰
- 年限：
10
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
T25/冷冻管
兔椎间盘纤维环细胞
Cat NO.: CP-Rb032
1.产品名称：兔椎间盘纤维环细胞
2.组织来源：椎间盘组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
兔椎间盘纤维环细胞分离自椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之间，由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成，位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚，而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带，后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3，其外层的细胞呈梭型，主要属于纤维细胞，内层细胞呈圆形，主要属于软骨细胞。在培养的情况下，用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现，它们的核较圆，核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多，为椭圆形，有的可看到双层单位膜，由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒，纤维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛，保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少，纤维环的生物性能就会减弱，椎间盘开始退变。
本公司生产的兔椎间盘纤维环细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经Ⅰ型胶原蛋白、Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息：
DMEM-F12、FBS、软骨细胞生长添加剂、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用上海淳麦兔椎间盘纤维环细胞专用完全培养基（产品货号：CM-Rb032）作为体外培养兔椎间盘纤维环细胞的培养基。
| NCI-N87 [N87] 人胃癌细胞 Cat NO.: CL-0169 | |
细胞名称 | NCI-N87 [N87]（人胃癌细胞） |
种属 | 人 |
年龄（性别） | 男 |
组织来源 | 胃癌 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
背景描述 | NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72，并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。NCI-N87细胞的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体，它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明，NCI-N87细胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受体基因的重组。NCI-N87细胞表达的c-myc和c-erb-B2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因NCI-N87细胞不表达：N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌激素释放肽。据报道，NCI-N87细胞的植板率为4.3%。 |
生长培养基 | RPMI-1640(货号:PM150110)＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120) |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ |
兔椎间盘纤维环细胞培养方法：
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
原代细胞与细胞系有什么区别？
细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
1、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
2、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养？推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家。
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文献和实验家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
酶(collagenase) 200U/ml 0.4%台盼兰、0.25胰蛋白酶Method 1 组织块法1、取材：空气栓塞法处死家兔后，在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM培养基（含双抗）。迅速带回到无菌超净台上。（注意事项：椎间盘位于相邻两个椎体之间，取材过程较为繁琐，要求动作迅速，争取在家兔死后半小时内完成，否则，该组织对缺氧耐受性差导致培养失败）。2、剪切：在超净台上，进一步将周围组织分离，用Hank’s液冲洗数遍，直到冲洗液透明为止。眼科剪刀将组织修剪为1~2cm3大小的小组织块，Hank’s
一、摘要 目的：建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法：成年新西兰白兔两只（正常及梗阻各一只），采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养，观察细胞形态和扩增情况，用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白（α-actin）鉴定细胞类型。结果：倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞
丁香园网友clellwei的观点为：原代椎间盘细胞培养其实并不太难，但培养时间相对较长，所以容易出问题。1、选材很关键选用胎儿椎间盘进行原代培养相对容易一些，可利用反复传代的方法来制作退变模型。直接选择人退变椎间盘进行培养时（一般选择手术摘除的椎间盘），患者的年龄及间盘的退变情况必须充分考虑在内。若年龄偏大，间盘退变很严重，培养的难度相应增大。20－50岁之间的患者都可采用。如果实验需要进行纤维环和髓核细胞的分别培养，在取回间盘时需仔细分离。2、操作需仔细原代培养的过程并不太复杂，从取回间盘
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