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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
小鼠骨内膜间充质干细胞
- 库存:
100
- 供应商:
上海淳麦生物
- 细胞类型:
小鼠骨内膜间充质干细胞
- 物种来源:
详细请联系咨询
- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
10
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
T25/冷冻管
小鼠骨内膜间充质干细胞
Cat NO.: CP-M171
1.产品名称:小鼠骨内膜间充质干细胞
2.组织来源:股骨、胫骨组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
小鼠骨内膜间充质干细胞分离自股骨、胫骨;骨内膜是一层致密结缔组织膜,覆盖在骨的表面(关节面除外),新鲜骨内膜呈粉红色,含有丰富的血管、神经和成骨细胞。此外,附着于骨的肌腱、韧带于附着部位都与骨内膜编织在一起。因而骨内膜与骨质结合甚为牢固。骨内膜富含血管、神经,通过骨质的滋养孔分布于骨质和骨髓。骨内膜分内、外两层,外层主要是粗大的胶原纤维束,部分纤维穿入骨质,使骨内膜固定于骨面;内层疏松,含成骨细胞和破骨细胞(分别具有产生新骨质和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松质的网眼也衬着一层菲薄的结缔组织膜,叫做骨膜。骨内膜的内层和骨膜有分化成骨细胞和破骨细胞的能力,以形成新骨质和破坏、改造已生成的骨质,所以对骨的发生、生长、修复等具有重要意义。骨内膜间充质干细胞是一种具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化,因此可以作为组织工程中的种子细胞。骨内膜间充质干细胞的体外培养条件要求较高,在培养过程中,受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。
本公司生产的小鼠骨内膜间充质干细胞采用冲洗骨髓、消化骨内膜、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经CD90/CD44、CD34/CD45免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
DMEM-F12、FBS、间充质干细胞生长添加剂、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用上海淳麦小鼠骨内膜间充质干细胞专用完全培养基(产品货号:CM-M171)作为体外培养小鼠骨内膜间充质干细胞的培养基。
| PLC/PRF/5 人肝癌亚力山大细胞 Cat NO.: CL-0415 | |
细胞名称 | PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) |
种属 | 人 |
年龄(性别) | |
组织来源 | 肝癌;亚力山大细胞 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
背景描述 | PLC/PRF/5细胞分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg);PLC/PRF/5细胞原先被支原体污染,后用BM-cycline去除支原体。 |
生长培养基 | MEM(货号:PM150410)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120) |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
小鼠骨内膜间充质干细胞培养方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
原代细胞与细胞系有什么区别?
细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上,连续细胞系可以用大量次培养基培养,随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
1、倍增和代数有什么区别?倍增是培养物中细胞总数加倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
2、接收到的冻存细胞该如何处理?收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养?推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作,如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室,我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家。
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