E.G7-OVA（小鼠T淋巴瘤细胞）

E.G7-OVA 小鼠T淋巴瘤细胞 Cat NO.: CL-0333
细胞名称	E.G7-OVA（小鼠T淋巴瘤细胞）
种属	小鼠
年龄（性别）
组织来源
生长特性	悬浮
细胞形态	淋巴母细胞样
背景描述	E.G7-OVA细胞是于1988年建系，源自C57BL/6(H-2b)小鼠的经电转质粒pAc-neo-OVA(鸡OVA基因)的淋巴细胞系EL4。
生长培养基	RPMI-1640(货号:PM150110)＋0.05mM β-mercaptoethanol(货号:PB180633)＋0.4mg/ml G418(货号:PB180125)＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃

Kasumi-1 人急性原粒细胞白血病细胞 Cat NO.: CL-0556
细胞名称	Kasumi-1（人急性原粒细胞白血病细胞）
种属	人
年龄（性别）	男；7岁
组织来源	外周血，急性原粒细胞白血病
生长特性	悬浮
细胞形态	原粒细胞
背景描述	Kasumi-1细胞具有人急性淋巴白血病细胞的典型特征，是研究人急性淋巴白血病的极佳材料。Kasumi-1细胞是一个带有8：21号染色体转位的白血病细胞株，这个转位使得AML1基因和ETO(或称MTG8)基因串联，使融合基因AML1-ETO(也称作AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)的表达升高，因而细胞产生嵌合的AML1-ETO蛋白。这个蛋白下调CEBPA mRNA、蛋白和DNA的结合活性，而这种结合对粒性白细胞的分化是极端重要的。Kasumi-1细胞建立于一位急性白血病患者的外周血，Kasumi-1细胞髓过氧化物酶阳性，显示其髓性成熟的形态。增生试验显示，培养的Kasumi-1细胞对IL-3、IL-6、G-CSF(粒细胞集落刺激因子)、GM-CS(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)有响应，但对IL-1和IL-5没有响应。在体外液体培养中分别加入二甲亚砜、G-CSF、IL-5，也没有观察到粒性或嗜酸性细胞的成熟。Kasumi-1细胞培养过程中，加入佛波酯可以看到诱导出的巨噬细胞样细胞。
生长培养基	RPMI-1640(货号:PM150110)＋20% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃

E.G7-OVA（小鼠T淋巴瘤细胞）培养方法：
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。 
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。

原代细胞与细胞系有什么区别？
     细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
1、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
2、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养？推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家。

 

      上海淳麦生物科技有限公司是一家专注于研发和生产免疫细胞及干细胞相关产品的生物高科技企业，可以为各类科研机构提供符合GLP标准规范的免疫细胞和干细胞及相关的实验技术服务，现已申请原代细胞试剂盒3项专利，我们致力于打造国内最专业的原代细胞研发和服务平台，做“您身边的细胞培养专家”。公司对细胞培养提供全程服务，产品涵盖免疫细胞及干细胞、细胞系、完全培养基、无血清培养基、基础培养基、血清、转染试剂、胰酶等细胞培养及实验相关产品。