TRITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)品牌

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括TRITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)品牌在内的一系列抗体抗原产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：TRITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)品牌
产地：国产|进口
规格：100μl
英文名：Goat Anti-Mouse IgG(H+L)Secondary Antibody,TRITC Conjugate
品牌：百奥莱博
保存条件：置4℃保存一年，注意避光。
试剂内容：1ml TRITC—羊抗小鼠 IgG 含 2mg 亲和纯化羊抗小鼠 IgG(特异性抗体纯度 99%以上)，TRITC：Ab==4-6：1，0.01M PBS，1%BSA,0.01%Thimerosal。
标记方法：TRITC 标记采用 Hijmans,W.,et al.所研究的方法。(参考文献：Hijmans,W.,et al．Clin.Exp.Immunol.,4,457(1969)
使用方法：
TRITC 标记试剂稀释液：0.01M PBS 或 TBS 缓冲液(PH7.0-7.6)，加入试剂级 BSA 至 1%。
使用上述稀释液，免疫荧光法按 1：32—64 稀释。此效价仅供参考，具体的稀释度须自己预先确定。稀释后溶液应于当天使用，未用完的应弃置。
TRITC的激发光波长为550nm，荧光发射波长为620nm，为橙红色。
注意事项：请离心后，再使用！

关于TRITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)品牌的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
改良番红O-固绿软骨染色液   5×50ml|5×100ml
PY02-072B  V-P反应培养基  250克  
1523-11-1 2-Naphth 2 acetate  乙酸－2－奈脂
25535-16-4 Propidium Iodide 碘化丙啶
BTN100880 四甲基乙二*(代"胺") TEMED
*代磺酚C Cinchonine 2103-73-3
F030708 BIOTIN标记兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA*BIOTIN
γ-*基丁酸 HVA 56-12-2
ARB11970 大鼠c-jun 定量分析 Rat c-jun ELISA KIT
茜素红 Alkali blue 6B 130-22-3
ARB13889 猪孕激素/孕酮(PROG)尿液中含量检测 Porcine progesterone,prog ELISA KIT
蒽酮 Sulfamethazine 90-44-8
钼酸铵负染色液  3% 100ml
PY02-438  改良Giolitti-Cantoni肉汤  250克  
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·C/EBPa mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0166
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：rat
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.C/EBPa mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
C/EBPa的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


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ARB10717 人色*酰tRNA合成酶(WARS)检测服务 Human tryptophanyl-trna synthetase,wars ELISA KIT
ARB12132 大鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)elisa检测说明书 Rat thyroid-peroxidase,tpo ELISA KIT
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9011-18-1 硫*(代"酸")葡聚糖 Dextran Sulfate
ARB11143 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)酶免分析 Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1,traIL-r1 ELISA KIT
PY02-090  MR-VP培养基  250克  
002007 肝素*抗凝羊血 100ml|500ml
BTN3092 *化乙锭清除剂 EB Erasol
ARB11649 人蛋白二硫化物异构酶前体(PDI)含量检测 Human protein disulfide-isomerase precursor,pdi ELISA KIT
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组织线粒体分离试剂盒   50T
N-乙酰-L-丙*酸 Trans-Ferulic acid 97-69-8
BTN131081 重组蛋白A/G Recombinant Protein A/G
100684-32-0 Myoglobin 肌球蛋白/肌红蛋白
蔗糖水溶血定性检测试剂盒(过筛法)   50T
ARB13592 兔子纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)血清中含量检测 Rabbit plasminogen activator inhibitor 1,pai-1 ELISA KIT
ARB13302 小鼠磷脂酶A2(PL-A2)Elisa定量检测 Mouse phospholipidase a2,pl-a2 ELISA KIT
BTN130519 巯基磁珠 Magnetic beads,Sulfydryl
BTN131160 异硫*酸荧光素标记山羊抗小鼠IgG Goat Anti-Mouse IgG ,FITC Conjugate

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