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- 百奥莱博
- ZN1896-YUS
- 北京
- 2025年07月13日
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- 详细信息
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937
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
室温
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的PVDF膜(进口分装),0.45μm,13.5cm×10cm,10张/包批发用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多PVDF膜(进口分装),0.45μm,13.5cm×10cm,10张/包等免疫检测产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称：PVDF膜(进口分装),0.45μm,13.5cm×10cm,10张/包批发
品牌：百奥莱博
编号：ZN1896
产地：国产|进口
规格：1包
产品规格：0.45μm 13.5cm×10cm/张 10 张/包
产品保存：室温干燥保存，一年有效。
产品简介：0.45μm的PVDF 膜主要用于(＞20KD〕免疫印迹，吸附分析、*基酸分析、N 端蛋白质测序、Dot/Slot blotting、糖蛋白显色和脂多糖分析。膜与湿式和半干式电印迹系统兼容。
注意事项：
1.凝胶电泳后，将胶在转移缓冲液中平衡 10分钟(对于厚度大于 0.75mm的凝胶，20分钟)。
2.将平衡的凝胶与湿膜直接接触，去除凝胶和膜之间可能形成的气泡。
3.将膜/凝胶三明治放入电印迹装置中。根据您的具体应用进行印迹程序。
4.为了增强膜与高分子量蛋白质的结合，延长转移时间并在转移缓冲液中加入低浓度的SDS(<0.01%w/ v)。
5.膜转印完之后如需要染色剂染色，需要用甲醇浸润 15 秒之后再染色。
需要材料：
1.膜切割成凝胶的尺寸
2.甲醇润湿干膜
3.纯水
4.转移缓冲液：用于湿转的25mM Tris，192mM 甘*酸，pH8.3,10%甲醇或用于半干转移的48mMTris，39mM 甘*酸，pH9.2,10%甲醇
5.将滤纸片切割成凝胶的尺寸并浸泡在转印缓冲液中至少 30 秒
6.含有 0.5-5%(w/ v)(牛血清白蛋白，酪蛋白，脱脂奶粉)的封闭液
7.洗涤缓冲液：含有 0.05-0.1%Tween-20的PBS 或 TBS
PBS：10mM 磷酸*，pH7.2，0.9%NaCl
TBS：10mM Tris，pH7.4，0.9%NaCl
8.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的一抗
9.在封闭缓冲液或洗涤缓冲液中稀释的酶标二抗
使用说明：
1.将膜置于甲醇中 15 秒。当膜潮湿时，膜将从不透明的白色变成均匀，半透明的灰色。
2.将膜浸入水中 1-2分钟以置换甲醇。如果膜漂浮在水面上，用镊子将其推入水中，直到它被淹没。
3.将膜浸泡在转移缓冲液中 5分钟以置换水。膜已经可以用于转印。
免疫检测：
1.如果印迹膜干燥，用甲醇将其再湿润 15 秒，直到它从不透明的白色变成半透明的灰色。
2.用纯水洗1分钟。
3.将印迹膜置于封闭缓冲液中，温和搅拌孵育1 小时。在洗涤或封闭缓冲液中制备一抗溶液。
4.将印迹膜置于稀释的一抗溶液中，温和搅拌孵育1 小时。
5.用洗涤缓冲液洗3-5次，每次 5分钟。在洗涤或封闭缓冲液中制备二抗溶液。
6.将印迹膜置于稀释的二抗溶液中，温和搅拌孵育1 小时。
7.用洗涤缓冲液洗3-5次，每次 5分钟。
8.化学发光检测法进行显色，在显色剂中温育 1-5分钟，使印迹膜暴露于 X 射线胶片或使用化学发光成像系统。
膜的存储：
如果膜在蛋白质转移后不立即使用，膜可以干燥保存，而没有任何性能损失。
1.将膜放在滤纸上，室温下晾干 1-2 小时。
2.用保鲜膜覆盖膜，并保存在阴凉的地方。
3.在继续使用膜之前，使用以下方法之一重新润湿膜：
A.将膜置于 100%甲醇中，用水清洗，然后再用于后续实验。
B.将膜直接放入至少含有 50%甲醇的染色溶液中。
相容的染色剂：
1.考马斯亮蓝染色剂 2.酰胺黑 3.印度墨水 4.丽春红 5.胶体金和 CPT 6.甲**(代"胺")蓝
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文献和实验同样可以 作为蛋白质印迹的固相支持物。DEAE可以有效的结合阴离子基团，包括那些高于其等电点的蛋白质。在pH10以下，DEAE基团都能带电荷，在低离子强度的转移液中结合蛋白分子。其最适的pH环境为5-7。DEAE膜可以用于蛋白多糖、病毒、酶以及血红蛋白的研究。这种0.45μm孔径的DEAE膜，除了可以做Western Blotting外，还可以用于核酸结合研究。还有一种离子交换型膜是羧甲基（CM）修饰的纤维素膜，它可以结合蛋白和多肽分子，以及其他的一些带正电荷的样品，最适结合pH范围在4-7。结合
，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了，如果用0.45μm的膜就会发生“Blowthroμgh”的现象。从膜的质地上来看，最重要的指标就是单位面积上能够结合的蛋白的量。硝酸纤维素膜的结合能力主要与膜的硝酸纤维素的纯度有关，市场上有些硝酸纤维素膜通常会还有大量的醋酸纤维素，因而降低了蛋白的结合量。S&S公司采用的是100%纯度的硝酸纤维素，保证了最大的蛋白结合量，可达80-150μg/cm2。由于 100%的纯度，因而也大大减少了非特异性的结合，降低杂交背景，无需高严谨度的洗脱步骤。其次，膜的强度
别的是蛋白上连续的几个氨基酸，也就是线性表位，那么这种抗体可同时用于免疫组化和 Western，而如果抗体识别构象形表位，则只能用于免疫组化。一般抗体说明书上都有注明此种抗体识别的氨基酸区间。（限于单抗）W. Western Blot 中抗体的重复应用问题解答：抗体工作溶液一般不主张储存反复使用，但是如抗体比较珍贵，可反复使用2－3次。稀释后应在2－3天内使用，4度保存，避免反复冻融。4. 滤纸、胶和膜的问题X. NC膜\ PVDF膜\ 尼龙膜怎样鉴别？解答：尼龙膜是较理想的核酸固相支持物，有多种
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