北京现货人Galectin-1重组蛋白优惠价

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名称：北京现货人Galectin-1重组蛋白优惠价
规格：100ng
产地：国产|进口
编号：ZN1633
来源：大肠杆菌
特异性：人
应用：WB 阳性对照
形态：冻干粉
纯度：>98%，RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件：-20℃保存 1 年以上，避免反复冻融。

北京现货人Galectin-1重组蛋白优惠价极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·PTEN mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN1190
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman,rat,mouse
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.PTEN mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
PTEN的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


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苏木素伊红混合染色液(一步法)   100ml|500ml
PY02-225  *化*多粘菌素B肉汤基础(SCPB)  250克  
L-精*酸盐*(代"酸")盐 4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-galactosaminide 1119-34-2
BL0641 *基-琼脂糖凝胶6FF Phenyl -Sepharose 6FF
RNA提取试剂（TRNzol） 
ARB13541 兔子Ⅲ型前胶原*基端肽(PⅢNT)免费代测 Rabbit procollagen Ⅲ n-terminal Peptide,pⅢnt ELISA KIT
HC0170 盖玻片
隐色孔雀石绿 Alizarin violet 3B 129-73-7
F030108 HRP标记兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA *HRP
528-50-7 D-(+)纤维二糖
ARB10184 人α2抗纤溶酶(α2-AP)elisa检测说明书 Human α2-antiplasmin,α2-ap ELISA KIT
ARB13004 小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)ELISA检测服务 Mouse single stranded dna antibody,ssdna ELISA KIT
ARB11030 人阿米巴(AmebIAsIs)elisa测定使用说明书 Human amebiasis ELISA KIT
5"-二磷酸葡萄糖腺苷二*盐 2-dT 102129-65-7
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·EDTA脱*液
编号：ZN1870
规格：500ml
保存条件：4℃保存 ,一年有效，避免阳光直射。
产品简介：
在病理实验制作切片时，我们会经常碰到一些含*组织，而且*十分坚硬。由于组织中的*和石蜡之间的密度不同，含*的组织一般不能直接制作切片。骨组织含*量最多。除了骨组织之外其它组织也可发生*化，在组织中形成*化区，所以需要经过脱*过程。脱*是制作骨组织切片的重要环节，尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。
乙二*(代"胺")四乙酸(EDTA)与羟基磷灰石结晶的外层*结合，形成可溶性的非离子化合物，同时又促进晶体内层的结合*向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解，pH中性时可起螯合作用。其特点是脱*时间长，对骨组织的损伤少，酶活性(碱性磷酸酶)和细胞抗原性保存较好，制作的切片可用于组织化学和免疫组化分析。
主要用途：
用于骨组织、牙齿等脱*。
使用说明：
1．将骨组织截成0.5cm×0.3cm×0.2cm大小骨片，生理盐水清洗后立即投入冷冻的固定液中，4℃固定 12 h~24 h；固定结束后骨片在0.2mol磷酸缓冲液中充分漂洗。
2．漂洗后投入脱*液中，室温下脱*，每日检查脱*情况，直至骨片脱*完全为止。脱*结束后，骨片用蒸馏水冲洗20min，脱*液每隔4-5天更换一次新液，经过 3次更换新液后，此后每天更换新液，但请根据具体实验具体分析。以大头针能刺进骨密质为完成脱*标准。
3．然后进入常规脱水处理程序并包埋、切片。
注意事项：
1.为使脱*更为充分，每次最好更换新液，这既弃去了脱掉的*盐，增加脱*强度，又起到降低脱*温度的作用。
2.脱*时间以脱*完成为标准：以大头针能轻易刺进骨密质为准。
3.脱*温度不要太高，一般以室温(25℃)为宜，高温可加快脱*速度，但可破坏组织中的核酸而影响染色效果。低温(4℃)则会减慢脱*速度，使组织在脱*液中浸泡过久而引起损伤。
4.为了提高 EDTA的脱*速度，骨组织取材尽量取薄。
5.为了提高 EDTA的脱*速度，也可以采用微波脱*。用微波炉辅助脱*可以大大缩短脱*时间，以微波间歇脱*，每次辐射1分钟，每次辐射之间都将烧杯移至室温，冷却 5分钟，以保证每次的微波辐射脱*液的温度不至于太高(70℃)。脱*时脱*液温度过高，易导致假阴性，背景色深等缺点。因此，在时间要求不紧迫的前提下，该方法也不应是首选。
6.为达到骨组织既充分脱*，又保护骨组织的抗原不受破坏，需要对含*的组织充分固定之后再进行脱*。然后再行常规制片。

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