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北京百奥莱博专业生产供应小鼠FAS重组蛋白 分子生物学试剂,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:小鼠FAS重组蛋白 分子生物学试剂
产地:国产|进口
规格:100ng
编号:ZN1758
来源:大肠杆菌
特异性:小鼠
应用:WB 阳性对照
形态:冻干粉
纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。
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BL1131 DH5α感受态细胞
pBR322 DNA MspI
ARB10554 人孕激素/孕酮(PROG)elisa测定使用说明书 Human progesterone,prog ELISA KIT
N,N-二乙基甲酰胺 L-Threonine 617-84-5
Masson-Fontana黑色素染色液 3×50ml|3×100ml
ARB10073 人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)尿液中含量检测 Human ccaat/enhancer binding protein epsilon,c/ebpε ELISA KIT
HC0009 细胞培养板
ARB12850 小鼠水通道蛋白0(AQP-0)定量分析 Mouse aquaporin 0,aqp-0 ELISA KIT
ARB13603 兔子表皮生长因子(EGF)Elisa方法检测 Rabbit epidermal growth factor,egf ELISA KIT
ARB11642 人弹性蛋白酶(ElAstAse)酶联免疫定量检测 Human elastase ELISA KIT
粪便隐血定性检测试剂盒(邻联甲**(代"胺")法) 100T
ARB10372 人甘丙肽/甘丙素(GAL)elisa检测说明书 Human galanin,gal ELISA KIT
PY01-164 伊红Y(水溶) BS 25克
PBS-EDTA缓冲液(pH8.0) 4×PE 500ml
KT208 HotMaster PCR MasterMix
橙黄Ⅰ Glycylglycine 523-44-4
盐*(代"酸")胍溶液(8mol/L,RNase free) 100ml
3-(环己*基)-1-丙磺酸*盐 3,5-Diiodo-L-thyronine 105140-23-6
F010104 小鼠抗人血清白蛋白抗体 Monoclonal Mouse Anti-HAS
HC0026 透气盖细胞培养瓶
小鼠FAS重组蛋白 分子生物学试剂关键词:ZN1758,百奥莱博,小鼠FAS重组蛋白
·TGFβ1 mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN1376
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:hμman,rabbit,rat,mouse
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.TGFβ1 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
TGFβ1的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
小鼠FAS重组蛋白 分子生物学试剂关键词:ZN1758,百奥莱博,小鼠FAS重组蛋白
ARB13207 小鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISA代测服务 Mouse ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,u-tsh ELISA KIT
ARB10545 人半胱*酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)含量分析 Human cystatin c,cys-c ELISA KIT
ARB12700 大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA检测服务 Rat glucocorticoid receptor-α,gr-α ELISA KIT
SDS-PAGE蛋白质低分子量标准 Tyramine hydrochloride
石蕊 ATA 1393-92-6
偶氮*膦Ⅰ Pyridoxamine 2HC1 85561-96-2
ARB13537 兔子I型前胶原羧基端肽(PICP)elisa测定使用说明书 Rabbit carboxyterminal proPeptide of type i procollagen,picp ELISA KIT
PY04-012 肝浸液(牛) 100ml/瓶 根据要求适量添加,用于配制培养较难生长的微生物培养
005000 4%鸡红细胞
ARB12879 小鼠丙*酸转*酶/谷丙转*酶(ALT/GPT)尿液中含量检测 Mouse alanine aminotransferase,alt/gpt ELISA KIT
优球蛋白溶解时间(ELT)检测试剂盒(加*法) 50T
ARB10363 人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)定量分析 Human cpg oligodeoxynucleotide,cpg-odn ELISA KIT
7761-88-*(代"8") 硝酸*(代"银") Silvernitrate
台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒 100T
ARB11020 人尿蛋白(UP)含量检测 Human proteinuria,up ELISA KIT
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