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- roche
- 罗氏10881775001
- 2025年11月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
T7 RNA Polymerase
- 保质期：
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- 供应商：
嵘崴达
- 保存条件：
-20度
- 库存：
需确认
- 规格：
5000 UNITS
T7 RNA 聚合酶
from Escherichia coli BL 21/pAR 1219
别名:
polymerase
一般描述
T7 RNA 聚合酶通常用于转录DNA，这些 DNA 已经克隆到具有两个相反方向的噬菌体启动子的载体中。可以使用不同的聚合酶，从插入 DNA 的任一链，选择性地合成 RNA。使用该系统可以产生同源标记的单链 RNA。转录物可以用生物素或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记，或用 [α-32P] 或 [α-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。
杂交探针的合成：T7 RNA 聚合酶能高效生产均一标记的 RNA。该标记的 RNA 可用作 Southern、Northern 和斑点印迹中的杂交探针，以及原位杂交。
合适的标记：转录物可以用生物素-16-UTP 或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记。它们也可以用 [α-32P]- 或 [α-35S] 标记的核苷酸放射性标记为高比活性。
特异性
启动子特异性
T7 RNA 聚合酶具有极高的启动子特异性，仅转录噬菌体 T7 DNA 或克隆到T7 启动子下游的 DNA。尽管 T7 和 T3 启动子序列仅相差 3bp，但 T7 RNA 聚合酶仅转录克隆到其启动子下游的DNA。
热灭火：通过加入 2 μl 0.2MEDTA（pH8.0）和/或加热至 65℃ 来终止反应。
应用
- T7 RNA 聚合酶可以转录来自 T7 启动子下游的克隆 DNA 模板的 RNA。可以用标记的 NTP 进行合成以产生高度标记的 RNA。合成的 RNA 有多种应用，包括：RNA 或 DNA 印迹技术
- 原位杂交
- RNA 酶保护研究：由酶合成的转录物可用作 RNA 剪接和加工研究的前体 RNA。
- 通过在转录反应期间加入 m7GpppG 或 m7GpppA 超过 GTP 或 ATP，以在体外合成加帽的 RNA。可以将产生的反义 RNA 引入细胞中，以抑制相应基因的表达。
- 微阵列靶标合成
包装
1个试剂盒包含2个组分
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文献和实验mRNA Amplification with T7 RNA Polymerase
on a 42ºC oven and set PCR machine to hold at 70ºC. In an Eppendorf tube add: 1 µg Total RNA 1 µL T7 oligo(dT) primer q.s. to 12 µL with Nuclease-free H2 O Incubate 10 min. at 70ºC. Spin briefly to pull
来提高灵敏度。 小分子RNA探针的制备 方法其实很简单：只需要准备目的基因的一小段寡核苷酸序列，3'端另外增加8个和T7启动子互补的碱基，将这段寡核苷酸和T7启动子引物退火，用Klenow大片断补齐得到双链的转录模版，然后用T7RNA聚合酶、rNTP和标记物混合，体外转录得到标记的小分子RNA探针。这种方法可以快速制备各种标记（同位素、非放射性标记均可）的小于100nt的小分子RNA探针，适用于包括RPAs，Northerns和原位杂交等各种方法检测小分子核仁RNA(small nuclear
T7 RNA Polymerase-Mediated Incorporation of 8-N3AMP Into RNA for Studying Protein-RNA Interactions
Ultraviolet (UV)-dependent photochemical crosslinking is a powerful approach that can be used for the identification of RNA-protein interactions. Although 8-azidoATP (8-N3 ATP) has been widely used to elucidate the ATP binding site
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