cOmplete™ Lysis-M 无EDTA试剂

cOmplete^™ Lysis-M 无EDTA试剂

货号：4719964001

一般描述
cOmplete^® Lysis-M无EDTA哺乳动物细胞蛋白质提取试剂含有温和去污剂（溶剂为25mM二甘氨酸缓冲液，pH 7.6）。cOmplete Lysis-M无EDTA试剂可用于从培养哺乳动物细胞的细胞质和细胞核中有效、温和地提取蛋白质。仅需在室温下5分钟，即可有效裂解哺乳动物细胞，无需刮擦、超声处理或冻融。
试剂盒包含的即用型cOmplete小型无EDTA蛋白酶抑制剂混合片剂，可与试剂盒的Lysis-M试剂配合使用。cOmplete Lysis-M无EDTA试剂提供了一种非常方便、有效的蛋白质提取方法，并且可以在初始提取步骤中抑制蛋白酶活性。cOmplete小型无EDTA蛋白酶抑制剂混合片剂含有不可逆和可逆的蛋白酶抑制剂。cOmplete小型无EDTA片剂能够有效抑制多种丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶，但不能抑制金属蛋白酶。
提取的蛋白质可以通过使用固定化金属螯合亲和层析（IMAC）进一步纯化，或者在下游应用中进行分析。

应用

Lysis-M试剂适用于多种不同应用，包括报告分子分析（如β-半乳糖苷酶、荧光素酶、氯霉素乙酰转移酶）、免疫分析（如蛋白质免疫印迹、ELISA、RIA）、蛋白质测定（如蛋白激酶A、蛋白激酶C和酪氨酸激酶）以及蛋白质纯化。此外，细胞裂解物可用于蛋白质测定，如考马斯染色和BCA（2′-苯甲酰氧基肉桂醛）蛋白质测定，并且可以通过透析除去试剂。
注意：cOmplete小型无EDTA片剂（包含在试剂盒中）可用于稳定金属蛋白质活性不受影响的提取物。由于EDTA会干扰IMAC（固定化金属螯合亲和层析），因此，在聚乙二醇标签融合蛋白的分离过程或后续测定中应优选使用cOmplete小型无EDTA片剂。

特点和优势

• 只需5分钟即可完全、温和地裂解哺乳动物细胞。
• 节省时间，无需刮擦、超声处理或冻融。
• 提取蛋白质得率比超声处理法更高。
• 保留蛋白质结构，因为试剂不会变性或改变蛋白质。
• 节约成本，一种产品可以抑制多种蛋白酶。
• 减少步骤，因为提取的蛋白质可以直接用于许多下游应用（甚至包括受EDTA影响的应用，如IMAC）。
• 预期用途：同时提取和保护哺乳动物细胞的可溶性蛋白质。
• 样品材料：培养物中的哺乳动物细胞（如Cos-7细胞，在细胞融汇时收集）。
• 所需时间：5分钟（在室温下裂解细胞）。
• 提取次数：20次（每次10 ml）。
• 有效抑制：丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶（但不抑制金属蛋白酶）。