封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)多少钱

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)多少钱用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)多少钱
规格：10ml
品牌：百奥莱博
编号：WE0320
产地：国产|进口
  正常血清是目前广泛使用的免疫学试验中的封闭及保护试剂。使用正常血清封闭可预先饱和组织切片对蛋白物质的物理吸附位点，从而大大减少组织对检测抗体的非特异性吸附。本封闭液采用优质正常山羊血清为原料，加入稳定剂和蛋白保护剂，可有效的的封闭组织上能与抗体非特异结合的位点，从而减少IHC实验的非特异染色，显著的降低背景。

注意事项：
1、如所用的一抗为山羊来源的(Goat anti-)，请避免使用该封闭液，否则可能造成更多非特异着色。
2、以每张切片加入1滴(约50μl)计算，10ml可做200张切片。
3、为了获得实验最佳效果，请根据实验调整最佳使用量。
4、本产品仅用于诊断和科研，不能用于人体实验或人体治疗。

操作步骤：

1、常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。
2、滴加适量内源性过氧化物酶封闭液，室温孵育10分钟，PBS充分淋洗。
3、滴加适量封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)，室温孵育10分钟，甩干。
4、进行后续的一抗孵育等IHC染色步骤。

储存条件：2～8℃

我公司的封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)多少钱，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
6-*基青霉素酸 H-Lys-OEt?2HCl 551-16-6
甘*胆酸 Fluorescamine 475-31-0
N-叔丁氧羰酰-L-白*酸酰甘*酰-L-精*酸对硝基*(代"*")酰胺盐*(代"酸")盐 α-Lactalbumin
ARB11961 大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(BId)ELISA代测服务 Rat bh3 interacting domain death agonist,bid ELISA KIT
F030420 胶体金标记兔抗马IgG抗体 Rabbit Anti-Horse IgG*GOLD
ARB12238 大鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)Elisa定量检测 Rat vascular endothelial cell growth factor c,vegf-c ELISA KIT
*酚水溶液  5% 100ml
ARB12938 小鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)尿液中含量检测 Mouse thrombospondin 1,tsp-1 ELISA KIT
ARB14191 山羊基质金属蛋白酶-2(MMP-2)代做ELISA实验 
间甲*(代"酚")紫 (2-Hydroxyethyl)-β-Cyclodextrin 2244-11-3
F020220 山羊抗人IgG FC抗体 Goat Anti-Human IgG(FC)
9001-48-3 谷胱甘肽还原酶(来源于酿酒酵母)Glutathionereductase
ARB14013 绵羊主要组织相容性复合体(MHC)含量检测 Sheep major Histocomp*(代"a")tibility complex,mhc ELISA KIT
BTN60209 盐*(代"酸")四环素溶液 Tetracycline HCl Solution
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·快速实时荧光定量PCR预混体系
编号：WE0141
英*(代"文")名称：BaFaSYBR Mixture
规格：5ml
  本品是专用于染料法(SYBR GreenⅠ)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品所含荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA相结合，使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活仅需在95℃孵育20s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟，大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，有效抑制了非特异产物的产生，并显著提高PCR的扩增效率。该产品应用范围广，适用于普通和快速定量PCR程序，可适用于无需ROX校正的所有荧光定量PCR仪。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0141)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0142)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0143)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

 

组份	WE0141-5ml	WE0142-5ml	WE0143-5ml
2×BaFaSYBR Mixture	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有荧光染料SYBR Green I，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaFaSYBR Mixture	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
3)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX.

2、PCR反应条件：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	20 s
变性	95℃	3 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	30 s
融解曲线分析	95℃	15 s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、20s条件下实现酶的活化。在此条件下，大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板，可将预变性时间延长至1分钟，以使起始模板充分解链。若高温处理时间过长，会对酶的活性造成影响。可根据模板情况确定最佳的预变性时间。
2)建议采用两步法PCR反应程序，退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定，本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。

储存条件：-20℃，避免反复冻融


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·酵母质粒提取试剂盒
编号：WE0165
英*(代"文")名称：Yeast Plasmid Extraction Kit
规格：50次
  本试剂盒在普通碱裂解法的基础上进行了改进，全新的Lyticase可以有效的破除酵母细胞壁，新型硅基质膜和缓冲液系统能高效专一的结合质粒DNA，同时可以最大限度的去除蛋白及其他杂质，整个过程方便快捷，不需使用有毒有害试剂，可以同时处理多个样品。除适用于酵母细胞外，也可用于大肠杆菌。使用本试剂盒提取的质粒DNA可用于各种分子生物学实验，如连接、转化、测序和文库筛选等。

试剂盒组成：

组份	50次
Buffer P1	15ml
Buffer P2	15ml
Buffer N3	20ml
Buffer PS	15ml
Buffer PB	10ml
Buffer PW(浓缩液)	10ml
Buffer EB	10ml
RNase A(10 mg/ml)	150μl
玻璃珠	2g
吸附柱DM及收集管	50套

自备试剂：无水乙醇，异丙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，将吸附柱置于2～8℃可保存更长时间，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混匀，置于2–8℃保存。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer P2、Buffer N3是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
5、注意不要直接接触Buffer P2和Buffer N3，使用后应立即盖紧盖子。
6、提取的质粒量与酵母菌株、质粒拷贝数、培养条件等因素有关，通常酵母质粒拷贝数都很低，通过电泳或分光光度计法都很难检测到。

操作步骤：
1、取1-5ml酵母培养物(最多不超过5×107个酵母细胞，一般对于酿酒酵母OD600=1.0时，相当于1-2×107细胞/ml)加入离心管(自备)中，12000rpm(~～13400×g)离心30秒，收集菌体沉淀，尽量吸弃上清。
2、向菌体中加入250μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，重悬沉淀。
3、在以上混合物中加入40 mg的玻璃珠(Glass Beads)，涡旋震荡10分钟。
4、向离心管中加入250μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀6-8次，室温放置5-10分钟，此时菌液应变得清亮粘稠。
注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮，提示可能菌量过大，裂解不彻底，应减少菌体量。
5、向离心管中加入350μl Buffer N3，立即温和地上下颠倒混匀6-8次，此时出现白色絮状沉淀，12000rpm离心20分钟。
注意：Buffer N3加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。
6、柱平衡: 向已装入收集管的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5所得上清加入到已装入收集管的吸附柱中，注意不要吸出沉淀。
注意：吸附柱的最大容积为750μl，溶液分2次过柱。
8、12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
9、向吸附柱加入150μl Buffer PB，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
11、将吸附柱重新放回收收集管中，12000rpm离心2分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer EB，室温放置数分钟，13000rpm离心1分钟，将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意：
1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置数分钟，13000rpm离心1分钟，将质粒溶液收集到离心管中。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时，Buffer EB在65-70℃水浴预热，可以增加提取效率。
3)通常酵母质粒拷贝数很低，通过电泳或者分光光度计法都很难检测到。提取的质粒如果用于下一步实验，通常建议使用量为：用作PCR模板可使用1–5μl质粒，用于转化大肠杆菌可使用5–10μl质粒。
4)转化大肠杆菌时应使用商业化高转化效率的感受态细胞。

储存条件：室温(15～30℃)

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