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组织蛋白抽提试剂盒哪里卖

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  • ¥190 - 1760
  • 百奥莱博
  • WE0260-BUR
  • 北京
  • 2025年07月16日
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      786

    • 英文名

      Tissue Protein Extraction Kit

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产销*(代"售")组织蛋白抽提试剂盒哪里卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:组织蛋白抽提试剂盒哪里卖
    产地:国产|进口
    品牌:百奥莱博
    英文名:Tissue Protein Extraction Kit
    规格:25次|100次
      本试剂盒应用于组织样本的总蛋白提取。提取蛋白之前可根据具体实验需要加入蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等成分。使用该提取液提取的组织蛋白,可进行蛋白活性分析、免疫检测、蛋白纯化等下游操作,并可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物,可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。

    试剂盒组成

     
    组份 25次 100次
    Tissue Protein Extraction Reagent 25ml 100ml
    Protease Inhibitor Cocktail 250μl 1ml

    保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温

    注意事项
    1、本产品适用于提取心肌、骨骼肌、肾脏、前列腺、皮肤、结肠、肝脏等软组织。
    2、为防止蛋白降解,所有的操作尽量在冰上进行。
    3、使用本产品提取蛋白后,可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。
    4、为了获得实验最佳效果,请根据实验调整最佳使用量。

    使用方法
    1、请在实验前取出Tissue Protein Extraction Reagent进行预冷。
    2、取适量Tissue Protein Extraction Reagent,抽提蛋白2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail,即1×工作液。
    3、1 g组织加入10ml 1×工作液匀浆处理(抽提试剂的使用量可根据组织不同而调整)。若需要浓缩的蛋白提取物,可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
    4、冰上孵育20分钟(冰上放置时间可根据组织不同而调整)。
    5、10000×g 离心15-20分钟。
    6、转移上清至新管中,进行下一步的蛋白含量测定、纯化及分析。

    储存条件:-20℃
    组织蛋白抽提试剂盒哪里卖
    组织蛋白抽提试剂盒哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:

    ·尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)
    编号:WE0115
    英文名称:Uracil-N-Glycosylase(UNG)
    规格:200U|1000U
      尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG酶)也称为尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶),通过大肠杆菌表达纯化的重组酶,该蛋白分子量为25kD,可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶,并且对RNA无活性,主要应用于防止PCR扩增产物的污染。该酶作用机理为:在PCR反应中以dUTP代替dTTP,扩增产物片段中的T全部被U取代,形成了含dU碱基的PCR扩增产物。UNG酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键,降解反应体系中含U的DNA,有效消除PCR产物的残留污染,大大降低扩增产物污染导致的假阳性,从而保证扩增的特异性和准确性。

    活性定义:37℃,60分钟内催化1 nmol尿嘧啶,从含尿嘧啶的DNA上释放所需要的酶量定义为一个单位。

    质量控制:SDS-PAGE检测纯度大于95%;经检测无核酸内、外切酶活性。

    注意事项
    1、UNG长期储存(非频繁使用; 每月少于3次)请置于-70℃保存,每天或每周使用请于-20℃保存。尽量避免反复冻融,大包装建议分装使用。
    2、UNG可以在PCR反应前先清除不慎污染的U-DNA分子,一个实验室必须在所有的PCR反应中使用dUTP作为dNTP之一,使所有扩增产物都成为U-DNA。如单使用于某个检测,T-DNA仍会积累,此抗污染系统也难以起到完全的作用。
    3、UNG/dUTP系统是PCR试剂内部的一种防污染措施,为了防止PCR产物的污染,尤其是在临检实验室中反复放大同一片段时,必须严格规范实验室的划分和操作。

    使用方法
    以下举例为Taq反应体系防止PCR产物污染的使用方法,实际应用可应根据具体实验进行改进和优化。

    1、PCR反应体系
    试剂 50μl反应体系 终浓度
    Taq PCR Buffer,10× 5μl
    dATP,10 mM 1μl 200μM
    dGTP,10 mM 1μl 200μM
    dCTP,10 mM 1μl 200μM
    dTTP,10 mM 0.5μl 100μM
    dUTP,10 mM 1μl 200μM
    Forward Primer,10μM 1μl 0.2μM
    Reverse Primer,10μM 1μl 0.2μM
    Template DNA Xμl  
    Taq DNA Polymerase,5 U/μl 0.5μl 2.5 U/50μl
    Uracil-N-Glycosylase,1 U/μl 0.2μl 0.2 U/50μl
    ddH2O up to 50μl  


    2、反应条件
    步骤 温度 时间 循环数
    UNG消化 37℃-50℃ 5-10 min  
    预变性 95℃ 10 min  
    变性 94℃ 30 s 30-40个循环
    退火 55-65℃ 30 s
    延伸 72℃ 1 kb/min
    终延伸 72℃ 5 min  

    注意:通常将Taq酶与UNG酶按一定的比例加入PCR反应体系中,先于37℃-50℃范围内消化5-10分钟,然后95℃ 10分钟灭活,(同时这一步也达到预变性和热启动的效果),随后进行PCR扩增。UNG酶的反应可以在37℃-50℃,5-10分钟的范围内变化,可以根据实验的需要进行调整。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。


    组织蛋白抽提试剂盒哪里卖关键词:Tissue Protein Extraction Kit,WE0260,组织蛋白抽提试剂盒
    组织蛋白抽提试剂盒哪里卖
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    组织蛋白抽提试剂盒哪里卖关键词:Tissue Protein Extraction Kit,WE0260,组织蛋白抽提试剂盒
    组织蛋白抽提试剂盒哪里卖

    ·HRP标记驴抗兔IgG(H+L)
    编号:WE0366
    英文名称:Donkey Anti- Rabbit IgG,Peroxidase Conjugated
    规格:100μl
    本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别兔IgG,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。

    免疫原:兔IgG
    缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
    稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
    防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
    应用范围:
    WB ECL发光检测(1:10000-200000)
    ELISA(1:5000-100000)
    WB 显色检测(1:5000-100000)
    Immunohisto/cytochemistry(1:500-5000)

    ·血块基因组DNA提取试剂盒
    编号:WE0185
    英文名称:BloodClot Blood DNA Extraction Kit
    规格:50次
      本试剂盒供了一种快速、简单、高效的从血片中提取基因组DNA的方法。既适用于未加抗凝剂的血液,也可用于加入EDTA、柠檬酸盐、肝素等抗凝剂的血液样本。样品裂解后,DNA被选择性的吸附到硅基质膜上。两步漂洗后,高质量的DNA被溶解到洗脱液中。纯化得到的DNA无酶抑制剂和其他杂质的残留,A260/A280的比值在1.5-2.3。DNA最长可达50 kb,适用于PCR,Real-time PCR、Southern blotting等实验。

    试剂盒组成
    组份 50次
    Buffer GTL 15ml
    Buffer GC 15ml
    Buffer GW1(浓缩液) 13ml
    Buffer PW2(浓缩液) 18ml
    Buffer GE 15ml
    蛋白酶K 25mg
    蛋白酶K 储存液 1.25ml
    吸附柱DC及收集管 50套


    自备试剂:无水乙醇

    产品特点
    1、适用于凝固血液样本的高纯度总DNA分离纯化。
    2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀,彻底去除污染物及下游反应抑制物,快速提取高品质DNA。

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,避免反复冻融,以免影响其活性。
    2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer PW2中加入无水乙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
    3、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GC是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GC和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解
    4、将一个水浴锅预热至56℃,另一个水浴锅预热至70℃。
    5、可将洗脱缓冲液Buffer GE预热至70℃。

    操作步骤
    1、向1.5ml离心管中加入20μl 蛋白酶K 溶液,然后再加入180μl Buffer GTL。
    注意:若样品数量较多,蛋白酶K 和Buffer GTL可按比例混合,然后将200μl混合物加入到1.5ml的离心管中。
    2、将取下的干血片放入上一步中的离心管中,剧烈涡旋混匀并短暂离心。56℃孵育30-60分钟,期间每隔10分钟将离心管涡旋10秒。
    3、加入200μl Buffer GC,彻底涡旋混匀。短暂离心后,70℃孵育10分钟,期间每隔3分钟将离心管涡旋10秒。
    注意:加入Buffer GC后可能会产生白色沉淀,大部分情况下,在孵育过程中,沉淀会消失,沉淀不会影响后续的实验。
    4、待步骤3离心管中样品降为室温后加入100μl无水乙醇,轻轻颠倒混匀样品,室温放置5分钟。短暂离心,将管壁内壁的液体富集于离心管底。
    注意:
    1)需要将样品和乙醇混合均匀。
    2)当室温高于25℃时,需要先将乙醇预冷。
    5、将上一步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中,12000rpm(~13400×g)离心1分钟。倒掉收集管中的废液,将Spin Column DC放回收集管中。
    6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟。倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    7、向吸附柱中加入500μl Buffer PW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    8、重复步骤7。
    9、12000rpm离心2分钟,倒掉废液,将吸附柱置于室温放置2-5分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。
    注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
    10、将吸附柱置于一个无菌的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μl BufferGE,室温放置2-5分钟。12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
    注意:
    1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用去离子水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用去离子水做洗脱液应该保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时会降低洗脱效率。
    2)离心前室温孵育5分钟可以增加产量;用另外的20-200μl Buffer GE再次洗脱可以增加产量。
    3)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,室温放置5 min后再次离心;若洗脱体积小于20μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或去离子水洗脱。
    4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

    储存条件:室温(15~30℃)。



    组织蛋白抽提试剂盒哪里卖

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