BCA蛋白定量试剂盒北京现货促销

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应BCA蛋白定量试剂盒北京现货促销，产品信息：

类别：蛋白质研究

英文名：BCA Protein Assay Kit

产品名	产品编号	包装规格
BCA蛋白定量试剂盒	WE0276	500次微孔板(50管次)

英文名：BCA Protein Assay Kit

品牌：百奥莱博

编号：WE0276

产地：国产|进口

  BCA蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于BCA(Bicin-choninic Acid)法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu2+络合生成络合物，同时将Cu2+还原成Cu+。BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物。在562 nm处有高的光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准品溶液，测定范围为20～2000μg/ml。

 

试剂盒组成：

 

组成	规格
BCA-A	2×50ml
BCA-B	3ml
BSA Standard Solution(2mg/ml)	2ml

保存条件：BSA Standard Solution：2～8℃，其它组分：室温

 

注意事项：

1、本产品可以采用分光光度计(试管检测法)或者酶标仪(微孔检测法)测定蛋白浓度。

2、建议每次测定蛋白样品时，绘制标准曲线，以获得准确数据。

3、BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水稀释)。

4、如待测样品中含较多的干扰物质(具体见附表1)，可采用Bradford法蛋白定量试剂盒(WE0275)或其他蛋白定量产品。

 

使用方法：

1、稀释BSA标准品：用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。

 

管号	稀释液用量(μl)	BSA标准品用量(μl)	BSA标准品最终浓度(μg/μl)
A	0	100	2
B	200	200	1
C	200	200(从B管中取)	0.5
D	200	200(从C管中取)	0.25
E	200	200(从D管中取)	0.125
F	200	200(从E管中取)	0.0625
G	200	0	0(空白)

 

2、配置BCA工作液：

1)计算BCA工作液总量：

BCA工作液总量=(BSA标准品样本个数+未知样本个数)×复孔数×每个样本BCA工作液体积

举例：BSA标准品样本个数为7个，未知样本个数2个，复孔数3个。

试管检测法：

BCA工作液总量=(7个BSA标准品样本+2个未知样本)×3个复孔×2ml/每个样本工作液体积=54ml

微孔检测法：

BCA工作液总量=(7个BSA标准品样本+2个未知样本)×3个复孔×200μl/每个样本工作液体积=5.4ml

2)根据计算出的BCA工作液需要总量，将BCA-A和BCA-B按照50:1的体积比，配制BCA工作液，充分混匀。

注意：

a. 由于加样可能存在误差，建议配制BCA工作液时，多配制1-2个孔。

b. 新配制的BCA工作液室温密封条件下可稳定保存24小时。

 

3、定量检测

①试管检测法(蛋白浓度检测范围：20-2000μg/ml)

1)按上表，将稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各100μl分别加到作好标记的试管中。推荐每个测定的样本做2-3个平行反应。

2)向每个试管中各加入2ml BCA工作液，充分混匀，37℃水浴中孵育30分钟 ，将各管冷却至室温，须在3-5分钟内完成检测。

3)用分光光度计在562 nm处，测定每个样品及BSA标准品的吸光值，同时做好记录。

4)绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。

② 微孔检测法(蛋白浓度检测范围：20-2000μg/ml)

1)按上表，将稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各25μl分别加到作好标记的96孔板微孔中。推荐每个测定的样本做2-3个平行反应。

2)每孔加入200μl BCA工作液，充分混匀，盖上96孔板盖，37℃孵育30分钟，冷却至室温，须在3-5分钟内完成检测。

3)用酶标仪在540-590 nm范围内，测定每个样品及BSA标准品的吸光值，同时做好记录。

4)绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。

注意：

a. BCA法测定蛋白浓度时，吸光值会随着时间的延长不断加深。因此所有样品测定需在3-5分钟内完成，否则会影响蛋白定量的准确度。

b. 建议以去除背景值后的吸光值读数绘制标准曲线。

c. 由于操作误差导致标准品读数严重偏离线性曲线的应舍去。

d. 未知样品浓度可以从标准曲线方程中计算得出, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。

e. 如果得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次测定。

 

4、BCA蛋白定量分析结果举例：

微孔板检测法结果

 

蛋白浓度(μg/μl)	原始吸光值	去除背景值后的吸光值
0	0.086(背景值)	0.000
0.125	0.123	0.037
0.25	0.280	0.194
0.5	0.551	0.465
1	1.068	0.982
2	2.000	1.913

 

 

附表1. 干扰物质表

 

 

化合物	耐受浓度
缓冲液
乙酸盐	0.2M
甘*酸	1M
HEPES	0.1M
MES	50mM
MOPS	50mM
Na+-柠檬酸	＜1mM
PIPES	50mM
磷酸*	0.1M
乙酸*	0.2M pH 5.5
TES	50mM
Tris	0.1M
盐类
硫*(代"酸")铵	干扰
NaCl	1M
尿素	3M
极性化合物
DMSO	5%
甘油	10%
去垢剂和变性剂
Brij35	1%
CHAPS	1%
盐*(代"酸")胍	4M
NP-40	1%
辛葡糖	1%
SDS	1%
Triton X-100	1%
糖类
葡萄糖	10mM
蔗糖	1M
螯合剂
EDTA	10mM
还原剂
β-巯基乙醇	50μM
DTT	1mM
其他
脂类	干扰
HCl/NaOH	0.1M

 

储存条件：2～8℃

BCA蛋白定量试剂盒北京现货促销专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：WE0276,BCA Protein Assay Kit,BCA蛋白定量试剂盒

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编号	类别	名称
WE0185	DNA纯化	血块基因组DNA提取试剂盒
WE0395	DNA纯化	口腔拭子DNA样本保存管
WE0348	一抗	抗c-Myc标签多克隆抗体
WE0331	免疫检测	抗GST标签琼脂糖介质
WE0126	核酸扩增(PCR)	防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)
WE0133	核酸扩增(PCR)	cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)
WE0385	FITC标记抗体	FITC标记兔抗山羊IgG(H+L)
WE0211	核酸电泳和回收	6×UltraStain上样缓冲液
WE0175	DNA纯化	柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml)
WE0230	基因结构和功能	人基因组DNA定量试剂盒
WE0284	蛋白质研究	1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8)
WE0387	HRP标记抗体	HRP标记兔抗山羊IgG(H+L)
WE0189	DNA纯化	高纯游离DNA中量提取试剂盒(负压法)
WE0101	核酸扩增(PCR)	Taq DNA Polymerase
WE0156	核酸扩增(PCR)	BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)
WE0327	细胞凋亡与增殖	Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒
WE0195	RNA纯化	miRNA提取试剂盒
WE0207	DNA纯化	磁珠法唾液DNA提取试剂盒
WE0357	一抗	抗GAPDH多克隆抗体
WE0317	蛋白质研究	水性封片剂
WE0122	核酸扩增(PCR)	FastStar热启动DNA聚合酶
WE0307	蛋白质研究	低背景ECL化学发光检测试剂盒
WE0258	蛋白质研究	RIPA裂解液(强)

 

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