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北京蛋白分子量Marker促销

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  • ¥170 - 1750
  • 百奥莱博
  • WE0280-YHX
  • 北京
  • 2025年07月05日
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      508

    • 英文名

      Protein Molecular Weight Marker

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京蛋白分子量Marker促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多蛋白分子量Marker等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:北京蛋白分子量Marker促销
    规格:100次
    编号:WE0280
    产地:国产|进口
    英文名:Protein Molecular Weight Marker
      本蛋白Marker由8条纯化好的蛋白质组成,其分子量范围是14.4 KD-220 KD(14.4 KD、20 KD、29 KD、35 KD、40 KD、66 KD、90 KD、220 KD),每种蛋白浓度为0.1-0.2 µg,进行聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳时,染色后可以用来判断蛋白质的分子量。本产品仅适用于SDS-PAGE凝胶电泳考蓝染色,不适用于Western Blot检测。

    注意事项
    1、仅适用于SDS-PAGE凝胶考马斯亮蓝染色,推荐使用8%-12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶。
    2、不推荐用于Native-PAGE。
    3、不适用于Western Blot检测。
    4、为避免反复冻融及污染,可将本产品分装后,-20℃保存。

    操作步骤
    1、加样前在室温或者37℃-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
    2、本产品推荐上样量为5μl,可根据凝胶的厚度和浓度大小调整。

    实验图例:

    12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后,经ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂(#WE0290)染色的结果。

    储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。

    北京蛋白分子量Marker促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:

    ·Protein A琼脂糖凝胶
    编号:WE0271
    英文名称:Protein A-Agarose
    规格:5ml
      本产品可从血清,腹水,细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物丌同亚型的抗体或包含抗体 Fc片段的基因工程重组蛋白。具有高IgG结合特异性,高流速,低Protein A-Agarose脱落等特点。

    注意事项
    1、凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温后装柱,避免产生气泡影响柱效。
    2、装柱时尽可能维持凝胶长径比为5:3-2:1,长径比过大将导致洗脱峰拖尾,洗脱体积增大;长径比过小将导致样品与填料接触时间短,吸附不充分,填料吸附蛋白量小。
    3、若上样液中抗体浓度过高,应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/ml,抗体浓度过高影响柱效。
    4、可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
    5、凝胶用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短,洗脱后用中性缓冲液尽快中和至pH中性,以延长亲和介质的使用寿命。
    6、洗脱后,应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性(pH7.4左右),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
    7、填料使用后应用0.1 M柠檬酸*缓冲液(pH3.0)做再生处理,长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。

    使用方法

    I 缓冲液的准备
    1、平衡缓冲液:纯化不同动物和不同亚型抗体时所用平衡缓冲液是不同的,部分参照如下。

     
    抗体 平衡缓冲液成分
    人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b 20 mM PBS,300 mM NaCl,pH7.4-8.5
    人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG3 50 mM Tris-Cl,3 M NaCl,pH7.8-8.5

    2、洗脱缓冲液:0.1 M柠檬酸*缓冲液,pH4.0。
    3、再生缓冲液:1 M NaCl。
    4、中和缓冲液:1 M Tris-Cl,pH9.0。
    注意:
    1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。
    2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。

    II 样本制备
    1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。
    2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰,去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。
    注意:样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。

    III 操作步骤
    1、将Protein A-Agarose填料混匀后加入层析柱,室温静置10分钟,待凝胶与溶液分层后,把底部的出液口打开,让乙醇通过重力作用缓慢流出。
    2、向装填后的柱中加入3-5个柱床体积的超纯水将乙醇冲洗干净,用平衡缓冲液流洗5-10个柱床体积平衡柱子。
    3、将样品上柱,上样流速60 cm/h。
    4、平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积,直至基线平稳。
    5、洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱峰,用中和缓冲液将洗脱收集样品中和到中性。
    6、立即用5-10个柱床体积平衡缓冲液平衡柱子到中性。
    7、再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
    注意:收集洗脱峰时可以分阶段收集到多个管中,最后根据测定结果重新调整收集方式。
    8、本产品使用10次以上后先用20%乙醇洗5个柱床体积,再用70%乙醇洗脱5-10个柱床体积,再用20%乙醇流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。

    储存条件:2~8℃,避免冷冻


    北京蛋白分子量Marker促销关键词:Protein Molecular Weight Marker,蛋白分子量Marker,WE0280

    NF-250 冻干羊抗人C9血清
    BL0263 DifcoTM Skim Milk 脱脂奶粉
    BTN130907 脱脂奶粉(杂交专用) Nonfat Milk Powder
    19-119kDa预先染色分子量MARK U 5′-P
    BTN60911 硅胶膜离心吸附柱系列(小提) Silica Spin Column for Miniprep
    ARB10108 人H-rAs 代做ELISA实验 Human h-ras ELISA KIT
    胰蛋白酶抑制剂溶液  1mg/ml 10ml
    SJ0835 定影粉
    BTN130859 M13mp18 DNA M13mp18 DNA
    AAF固定液   500ml|5L
    PY02-145  改良Skirrow氏琼脂基础  250克  
    F030823 BIOTIN标记兔抗猴IgG抗体 Rabbit Anti-monkey IgG*BIOTIN
    37224-29-6 葡聚糖凝胶G-75 Sephadex G-75 medium
    单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛*腙微板法)   100T
    ARB11153 人肿瘤特异性移植抗原(TSTA)elisa检测操作说明书 Human tumor specific transPlantation antigen,tsta ELISA KIT
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    ·TRIzon试剂(总RNA提取)
    编号:WE0191
    英文名称:TRIzon Reagent
    规格:100ml
      TRIzon是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围广泛,可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。样品在TRIzon中被充分裂解的同时能够最大限度地保证RNA的完整性。在加入*仿离心后,溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相,RNA分布在上清层中。收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,可用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等。

    自备试剂:*仿、异丙醇、75%乙醇、无RNase的水(新开封或提取RNA专用)。

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
    1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
    2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
    3)配制溶液应使用无RNase的水。
    4)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
    2、提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
    3、本品中含有*酚,具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品,如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛,应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
    4、样品用TRIzon 匀浆后,如不即刻加入*仿,置于-70℃下可放置一个月以上。
    5、保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2~8℃可以保存一周,-20℃条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短,容易降解,建议提取后尽快进行后续实验,如反转录成cDNA,Northern Blot等。
    6、若下游实验对DNA非常敏感,建议用不含RNase的DNase I(货号:WE0213A)对RNA进行处理。

    操作步骤

    1.各种材料的处理
    1a.植物组织:取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRIzon中迅速研磨,每30-50 mg组织加入1ml TRIzon,混匀。
    注意:样品体积一般不要超过TRIzon体积的10%。
    1b.动物组织:取新鲜或-70℃冻存的动物组织尽量剪碎,每30-50 mg组织加入1ml的TRIzon,匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入TRIzon 1ml混匀。
    注意:样品体积一般不要超过TRIzon体积的10%。
    1c.单层培养细胞:吸去培养液,可直接在培养板中加入适量TRIzon(每10cm2面积需要1ml TRIzon),用取样器反复吹打使细胞裂解。也可用胰蛋白酶处理后,将细胞溶液转移至RNase-Free的离心管中,300×g离心5 min,收集细胞沉淀,仔细吸除所有上清,加入TRIzon 1ml混匀。
    注意:
    1)收集细胞数量不要超过1×107。
    2)TRNzol加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定。如果TRIzon加量不足,可能导致提取的RNA中有DNA污染。
    3)收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净,否则会导致裂解不完全,造成RNA的产量降低。
    1d.细胞悬液:离心收集细胞。每5×106-1×107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1ml TRIzon。
    注意:
    1)加入TRIzon前不要洗涤细胞,以免RNA降解。
    2)一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪或液氮研磨处理。
    1e.血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积TRIzon(推荐0.25ml全血加入0.75mlTRIzon),充分振荡混匀。
    1f.可选步骤:对于蛋白、脂肪、多糖或胞外物质含量高的样品,如肌肉组织、脂肪组织或植物的块茎,可以在匀浆处理后4℃,12000rpm(~~13400×g)离心10分钟以除去不溶物质,此时沉淀中含胞外物质、多糖和高分子量的DNA,而RNA存在于上清中。

    2、样品中加入TRIzon后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
    3、向以上溶液中加入*仿,每使用1ml TRIzon加入0.2ml*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2-3分钟。
    4、4℃下12000rpm离心15分钟,此时样品分成三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA 主要在水相中,把水相(约600μl)转移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
    5、在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇,颠倒混匀,室温放置10分钟。
    6、4℃ 12000rpm 离心10分钟,弃上清。
    7、加入75%乙醇(用无RNase的水配制)洗涤沉淀。每使用1ml TRIzon用1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
    8、4℃ 12000rpm离心3分钟,小心吸弃上清,注意不要吸弃RNA沉淀。
    注意:剩余的少量液体可短暂离心,然后用枪头吸出,注意不要吸弃沉淀。
    9、室温放置2-3分钟,晾干。加入30-100μl无RNase的水,充分溶解RNA,得到的RNA保存在-70℃,防止降解。
    注意:沉淀不要过分干燥,以免难于溶解。

    储存条件:2~8℃避光。



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