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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
318
- 英文名:
Western Antibody Dilution Buffer
- 保质期:
1周
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应WE0295型Western抗体稀释液优惠促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:WE0295型Western抗体稀释液优惠促销
编号:WE0295
英文名:Western Antibody Dilution Buffer
品牌:百奥莱博
规格:100ml
产地:国产|进口
在蛋白印迹(Western Blot , WB)实验中,一抗和二抗通常需要适当稀释使用。本公司生产的WB抗体稀释液可用于蛋白印迹时抗体的稀释和配制,稀释和配制的一抗或二抗可以在4℃保存和使用不少于1周,可以反复2-3次用于蛋白印迹,节约您宝贵的抗体。本产品仅用于WB实验中的抗体和标记物的稀释。
注意事项:
1、本产品属蛋白制剂,室温放置过久易导致蛋白的降解和活性丧失。
2、为了能使抗体可以反复多次使用,建议尽量在2~8℃进行一抗和蛋白膜的结合反应,以减缓一抗的衰减速度。
3、本产品含防腐剂,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤:
1.临用取出本产品,颠倒数次以混匀,取适量用于抗体稀释。一抗和二抗的稀释比例请参照厂家使用说明。
2.一次实验结束后,可以回收抗体稀释液,2~8℃保存,一周内可用于下次的WB。
储存条件:2~8℃
除WE0295型Western抗体稀释液优惠促销外,我公司正在打折促销以下产品:
BL0644 丁基-琼脂糖凝胶4FF Butyl -Sepharose 4FF
戊二酸 4-Ethyl-2-methoxyphenol 110-94-1
F030838 BIOTIN标记山羊人IgM抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*BIOTIN
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酚番红花红 Potassium thiocyanate 81-93-6
WE0295型Western抗体稀释液优惠促销关键词:Western抗体稀释液,WE0295,Western Antibody Dilution Buffer
·RRX标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:WE0382
英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG, Rhodanmine Red-X Conjugated
规格:100μl
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别兔IgG。使用本产品检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素,被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮,不容易淬灭,背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间,且重叠较少,RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Rhodamine Red-X,Amax=570; Emax=590
应用范围:对于大多数实验(1:25-100)
WE0295型Western抗体稀释液优惠促销关键词:Western抗体稀释液,WE0295,Western Antibody Dilution Buffer
·水产动物基因组提取试剂盒
编号:WE0182
英文名称:Marine Animal DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适合于从多种水产动物(如鱼类、虾类、贝类等)组织中提取总DNA。纯化过程不需*酚或*仿等有机溶剂,无需乙醇沉淀。本试剂盒采用优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效特异的结合到硅胶质离心吸附柱上,其他污染物可流过膜,蛋白、PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步有效的洗涤步骤被有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GTL后加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
不同水产动物组织提取得率:
| 样本 | 建议孵育时间 | DNA得率 |
| 贝类组织 | 0.5 h | 12-20μg |
| 虾组织 | 1 h | 8-14μg |
| 鱼组织 | 1 h | 15-40μg |
操作步骤:
1、取不超过30 mg组织材料,液氮充分研磨后,放入离心管(自备)中,加入200μl Buffer GTL,涡旋振荡15秒。
注意:
1)根据提取的组织不同,起始量也有不同,腮的细胞量较大,一般建议提取量不超过20 mg。
2)如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
2、加入20μl 蛋白酶K ,涡旋混匀,简短离心,使管壁上的溶液收集到管底。56℃孵育,直至组织完全溶解,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:不同组织裂解时间不同,通常需0.5-2小时即可完成。对于难裂解组织可以适当延长孵育时间。
3、加入200μl Buffer GL,充分颠倒混匀,70℃孵育10分钟,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:加入Buffer GL时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置时会消失,不会影响后续实验。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
4、加入200μl无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能出现絮状沉淀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
5、将步骤4所得到的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤9所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤9;若洗脱体积小于200μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购WE0295型Western抗体稀释液优惠促销。
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