北京Western Ladder笔厂商

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京Western Ladder笔厂商在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：北京Western Ladder笔厂商
规格：1000次
产地：国产|进口
英*(代"文")名：Western Blot Ladder Pen
品牌：百奥莱博
  蛋白免疫印迹(WB)是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法，经常用于检测抗体和抗原之间的特异性，而且能够对目的蛋白进行定性或定量分析研究。但是在试验中，抗原或者抗体往往都不是单一的成分，这些可能会导致在最终底片曝光出多条条带，或出现一些不明分子量的条带，或者目的条带的位置都不能确定。因此确定这些条带的分子量对我们进行下一步的分析就显得非常重要。
  目前，市场上有一些预染Marker，能很好监测我们的转膜效率，电泳转膜后能在杂交膜上看到Marker相应的条带，但是这些Marker 最终不能在底片上曝出条带。
  Western Blot Ladder Pen 正是要为您解决这个问题，通过转膜后对着预染Marker或经过丽春红染色确定的非预染Marker的各条带进行相应的标记，最终这些笔迹都能在目的位置曝光出相应的条带，用作分子量标准。同时也可以用它在膜上做其它标记，或者用作阳性对照。

注意事项：
1、本产品适用于HRP底物系统。
2、WB Ladder Pen使用完成后，请水平放置于2～8℃，请勿冻存于-20℃。
3、使用前请先将WB Ladder Pen在纸上画几笔之后再在膜上做相应的标记。
4、标记过程中请勿用力太大，以免破坏膜的结构，轻划即可。
5、随着笔使用时间的增加，信号可能会逐渐减弱。

操作步骤：

1、电泳的过程中，可以使用预染蛋白Marker或者非预染蛋白Marker。
2、常规的转膜后，将膜取下。
a. 使用预染蛋白Marker的NC膜：去离子水漂洗膜后，使用上下两层滤纸或者卫生 纸吸掉膜上多余的液体(请勿将膜吸的过干)。
b. 使用非预染蛋白Marker的NC膜：丽春红染膜后，用铅笔将非预染蛋白Marker的 各个条带标记。TBST漂洗膜，以完全去掉膜上的丽春红，使用上下两层滤纸或者 卫生纸吸掉膜上多余的液体(请勿将膜吸的过干)。
3、使用WB Ladder Pen在膜上做好相应的标记(轻划即可)，放置15秒之后将膜放置 于封闭液中封闭。
4、按常规步骤进行后续的WB试验。

储存条件：2～8℃

更多有关北京Western Ladder笔厂商的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·TRIzon试剂(总RNA提取)
编号：WE0191
英*(代"文")名称：TRIzon Reagent
规格：100ml
  TRIzon是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便，颜色鲜明，便于分层。本试剂适用范围广泛，可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。样品在TRIzon中被充分裂解的同时能够最大限度地保证RNA的完整性。在加入*仿离心后，溶液会分成三层：上层无色水相、中间层和下层红色有机相，RNA分布在上清层中。收集上清层后，经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好，无蛋白和DNA污染，可用于各种分子生物学常规实验，如RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等。

自备试剂：*仿、异丙醇、75%乙醇、无RNase的水(新开封或提取RNA专用)。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5M的NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
3、本品中含有*酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛，应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
4、样品用TRIzon 匀浆后，如不即刻加入*仿，置于-70℃下可放置一个月以上。
5、保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2～8℃可以保存一周，-20℃条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，Northern Blot等。
6、若下游实验对DNA非常敏感，建议用不含RNase的DNase I(货号：WE0213A)对RNA进行处理。

操作步骤：

1．各种材料的处理
1a.植物组织：取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRIzon中迅速研磨，每30-50 mg组织加入1ml TRIzon，混匀。
注意：样品体积一般不要超过TRIzon体积的10%。
1b.动物组织：取新鲜或-70℃冻存的动物组织尽量剪碎，每30-50 mg组织加入1ml的TRIzon，匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入TRIzon 1ml混匀。
注意：样品体积一般不要超过TRIzon体积的10%。
1c.单层培养细胞：吸去培养液，可直接在培养板中加入适量TRIzon(每10cm2面积需要1ml TRIzon)，用取样器反复吹打使细胞裂解。也可用胰蛋白酶处理后，将细胞溶液转移至RNase-Free的离心管中，300×g离心5 min，收集细胞沉淀，仔细吸除所有上清，加入TRIzon 1ml混匀。
注意：
1)收集细胞数量不要超过1×107。
2)TRNzol加量根据培养板面积决定，不是由细胞数决定。如果TRIzon加量不足，可能导致提取的RNA中有DNA污染。
3)收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净，否则会导致裂解不完全，造成RNA的产量降低。
1d.细胞悬液：离心收集细胞。每5×106-1×107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1ml TRIzon。
注意：
1)加入TRIzon前不要洗涤细胞，以免RNA降解。
2)一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪或液氮研磨处理。
1e.血液处理：直接取新鲜的血液，加入3倍体积TRIzon(推荐0.25ml全血加入0.75mlTRIzon)，充分振荡混匀。
1f.可选步骤：对于蛋白、脂肪、多糖或胞外物质含量高的样品，如肌肉组织、脂肪组织或植物的块茎，可以在匀浆处理后4℃，12000rpm(~～13400×g)离心10分钟以除去不溶物质，此时沉淀中含胞外物质、多糖和高分子量的DNA，而RNA存在于上清中。

2、样品中加入TRIzon后反复吹打几次，使样本充分裂解。室温放置5分钟，使蛋白核酸复合物完全分离。
3、向以上溶液中加入*仿，每使用1ml TRIzon加入0.2ml*仿，盖好管盖，剧烈振荡15秒，室温放置2-3分钟。
4、4℃下12000rpm离心15分钟，此时样品分成三层：红色有机相，中间层和上层无色水相，RNA 主要在水相中，把水相(约600μl)转移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇，颠倒混匀，室温放置10分钟。
6、4℃ 12000rpm 离心10分钟，弃上清。
7、加入75%乙醇(用无RNase的水配制)洗涤沉淀。每使用1ml TRIzon用1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
8、4℃ 12000rpm离心3分钟，小心吸弃上清，注意不要吸弃RNA沉淀。
注意：剩余的少量液体可短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。
9、室温放置2-3分钟，晾干。加入30-100μl无RNase的水，充分溶解RNA，得到的RNA保存在-70℃，防止降解。
注意：沉淀不要过分干燥，以免难于溶解。

储存条件：2～8℃避光。


北京Western Ladder笔厂商关键词：Western Blot Ladder Pen,WE0294,Western Ladder笔


·实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)
编号：WE0145
英*(代"文")名称：BaldStar TaqMan Mixture(Low ROX)
规格：5ml
  本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP基因型分析等，适用于不同类型探针法荧光定量。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围，对目的基因定量更准确。适用于无需ROX作为校正染料的所有荧光定量PCR仪。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0144)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0145)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0146)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

 

组份	WE0144-5ml	WE0145-5ml	WE0146-5ml
2×BaldStar TaqMan Mixture	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1．使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2．避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaldStar Taq Man Mixture	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Probe，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

2、PCR反应程序：
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

两步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	1 min

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。

储存条件：-20℃，避免反复冻融


北京Western Ladder笔厂商关键词：Western Blot Ladder Pen,WE0294,Western Ladder笔

119-44-8 酵母粉
ARB10814 人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)酶免分析 Human platelet antibodies igg/m/a,pa-igg/m/a ELISA KIT
ARB12568 大鼠脑红蛋白(NGB)elisa检测说明书 Rat neuroglobin,ngb ELISA KIT
BL1136 JM109受体菌
BTN131224 Helly固定液 Helly Solution
BL0263 DifcoTM Skim Milk 脱脂奶粉
ARB13045 小鼠尿微量蛋白(mALB)检测服务 Mouse microalbunminuria,malb ELISA KIT
BTN130595 双荧光素酶活性检测试剂盒 Dual Luciferase Assay Kit
DP424 TRNzol Universal总RNA 提取试剂
BL1119 碘化丙啶PI溶液(1mg/ml)
尿酸盐染色液(Gomori六胺银法)   4×50ml
ARB14165 牛口蹄疫A型抗体(FMD-A-Ab)含量分析 
ARB12463 大鼠促性腺激素释放激素受体(GnRHR)ELISA代测服务 Rat gonadotropin-releasing hormone receptor,gnrhr ELISA KIT
SJ0737 小鼠粒细胞分离液
F030806 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*BIOTIN
KG204 血液直接PCR试剂盒
ARB13792 豚鼠血清总补体(CH50)elisa检测操作说明书 Guinea pig 50% complement hemolysis,ch50 ELISA KIT
植物组蛋白提取试剂盒 Plant histone protein extraction kit  50T|100T
BTN100409 6 nt随机引物 Hexamer
SJ0790 酒石酸
L-脯*醇 Corticosterone 23356-96-9
标准蛋白质溶液(BSA,100mg/ml)   1ml

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