- ¥355
- 联迈生物
- LM0511
- 中国/上海
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
DEAE-Dextran Transfection Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件：
4℃保存
- 规格：
>200次
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| LM0511 | DEAE-Dextran细胞转染试剂盒 | >200次 | 355.00元 |
关于DEAE-dextran的细胞转染方法早在1968年就有相关论文发表。DEAE-dextran可以促使DNA结合到细胞膜上，然后通过内吞作用(endocytosis)进入细胞。基于DEAE-dextran的细胞转染方法适用于瞬时转染(transient tranfection)，但不适用于筛选稳定表达细胞株。DEAE-dextran在较高浓度作用较长时间会对细胞产生一定毒性。
目前基于DEAE-dextran的细胞转染方法有两种，一种方法为把DNA和DEAE-dextran混合后加入到细胞中，另一种方法为先用DEAE-dextran预处理细胞，然后再加入DNA。后一种方法是在前一种方法的基础上经过改进而产生的，对于一些细胞包括Hela、COS、NIH3T3和KB细胞等，后一种方法可以增加细胞对DNA的摄入量，显著改善转染效果。氯喹的加入可以抑制溶酶体对外源DNA的降解，从而提高转染效率。但对于具体的细胞、具体的培养条件，如需获得更加理想的转染效率，必须自行摸索上述各种转染方法，找出优化的转染方法。
基于DEAE-dextran的细胞转染方法不仅可以转染贴壁细胞，也可以转染悬浮细胞。
转染效率可以通过转染表达EGFP或其它荧光蛋白的质粒进行快速鉴定。
关于不同的细胞转染试剂的主要特点和差异方面的比较，以及如何选择适当的细胞转染试剂，可参考联迈生物的相关网页：
对于六孔板而言，一个包装的本转染试剂如使用常规方法可以转染2500个孔，如使用预处理方法可以转染200个孔。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| LM0511-1 | DEAE-Dextran溶液 | 20ml |
| LM0511-2 | 10XPBS | 20ml |
| LM0511-3 | 氯喹溶液 | 3.5ml |
| － | 说明书 | 1份 |
4℃保存，一年有效。
注意事项：
使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率。对于质粒，可以使用联迈生物生产的质粒大量抽提试剂盒(LM0026)进行抽提，以保证获得较高的转染效率。
转染前细胞必须处于良好的生长状态。
试剂盒中各试剂均经过无菌处理，可以直接使用。在细胞转染过程中要严格注意无菌操作。
需自备用于洗涤的PBS或HBSS，以及用于稀释10XPBS的无菌水。
稀释或配制DEAE-Dextran溶液或DNA的1XPBS可以用试剂盒中提供的10XPBS稀释。
氯喹溶液对人体有害，请注意适当防护。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验就是HEK293细胞系)。更高的转染效率是更高的病毒滴度的基本保障。 ViraPackTM 转染 试剂盒经Stratagene非常著名的MBS哺乳动物转染试剂盒改进而来，使用起来更为方便，推荐用于AdEasy® XL腺病毒载体系统，AAV(腺相关病毒)-无辅毒系统以及ViraPortTM反转录病毒系统，也可用于慢病毒载体。 ViraPackTM 病毒转染 试剂盒：货号#200488 试剂盒提供：2.5 M CaCl2, Solution，2x BBS (pH
基因转染是将具生物功能的核酸（RNA或DNA）转移或运送到细胞内，并使核酸在细胞内维持其生物功能的核酸转移技术。转染技术的目的是主要是研究真核基因的表达和调控，目前的方法包括磷酸钙共沉淀法，电穿孔法以及同DEAE-dextran或阳离子脂质体试剂形成复合物法。 在这些不同的方法中，DNA转导的效率，转导的机制，可重复性及使用的方便性都存在差异。而且，有效的DNA转导会伴随某些毒性或细胞抑制，其程度依赖于试剂、步骤和目的细胞的不同而不同，因此建议根据实际条件和实验条件，选择最佳
CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体，酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞（按照转染试剂的说明书走），确保转染效率> 70
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