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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
745
- 英文名:
TCEP Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应TCEP溶液(0.5M)特价促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:TCEP溶液(0.5M)特价促销
英文名:TCEP Solution
产地:国产|进口
规格:5mL
品牌:百奥莱博
本产品是0.5M的TCEP溶液,是在SDS-PAGE分析之前一种无味的高效还原样品的试剂。
产品特点:
1.即用、无味、稳定、中性的0.5 MTCEP溶液。
2.无需制备TCEP•HCl储存液,无需在SDS-PAGE上样前进行中和。
3.方便、省时的还原剂TECP。
4.中性pH降低在还原步骤中剪切酰胺键的可能性。
5.室温稳定,节省冰箱的空间。可以使实验室的环境更加安全、清洁。
6.便宜,可重复使用也可一次性使用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
欲咨询购买TCEP溶液(0.5M)特价促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·糖蛋白染色试剂盒
编号:BTN131075
英文名称:Staining Kit for Glycoprotein
规格:10次
本产品为在SDS-PAGE凝胶或蛋白免疫印记硝酸纤维素膜上检测糖蛋白的试剂盒。该方法使用三种试剂,所需时间仅需不到两小时,而其他的染色方法需要四到五小时。染色后的糖蛋白为品红色条带,背景为浅粉色或者无色。
产品特点:
1.包括一种阳性对照蛋白及一种阴性对照蛋白。
2.简洁、易储存的试剂盒。
3.本产品足够10张mini-PAGE胶或20张8×8cm蛋白免疫印记硝酸纤维素膜染色。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 氧化试剂 | 2.5g |
| 糖蛋白染色试剂 | 250ml |
| 还原试剂 | 1.25g |
| 阳性对照(辣根过氧化物酶) | 1mg |
| 阴性对照(大豆胰蛋白酶抑制剂) | 1mg |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
自备试剂:0.9%NaCl溶液或PBS缓冲液、BCA工作液。
使用方法:
实验前准备
1.配制3%乙酸溶液:将30mL冰醋酸与970mL超纯水混匀,室温保存备用。
2.配制50%甲醇溶液:将250mL甲醇与250mL超纯水混匀,室温保存备用。
3.配制氧化试剂:向氧化试剂干粉中加入250mL的3%乙酸溶液,充分混匀溶解后得到氧化试剂溶液,室温保存备用。
4.配制还原试剂:向还原试剂干粉中加入250mL的超纯水,充分混匀溶解后得到还原试剂溶液,室温保存备用。
5.配制阳性对照(辣根过氧化物酶):向1mg固体中加入0.5mL超纯水,使得溶液浓度为2mg/mL。用SDS-PAGE上样缓冲液将溶液稀释到终浓度为1mg/mL。对于80mm×80mm的凝胶来说,每个泳道加5到10μl的阳性对照。将配制好的阳性对照分装后-20℃保存。
6.配制阴性对照(大豆胰蛋白酶抑制剂):向1mg固体中加入0.5mL超纯水,使得溶液浓度为2mg/mL。用SDS-PAGE上样缓冲液将溶液稀释到终浓度为1mg/mL。对于80 mm×80 mm的凝胶来说,每个泳道加5到10μl的阴性对照。将配制好的阴性对照分装后-20℃保存。
7.样品稀释:用SDS-PAGE上样缓冲液将样品浓度稀释为1mg/mL,对于80mm×80mm的凝胶来说,每个泳道加5到10μl的样品。
凝胶染色的操作步骤(注意:请在通风橱中进行以下操作)
1.取出电泳后的SDS-PAGE凝胶,加入到100mL 50%甲醇溶液中,完全浸泡30分钟后,倒出甲醇溶液。
2.用100mL 3%乙酸溶液洗涤胶块两次,每次轻轻振荡10分钟。
注:如有需要,此步的胶块可在超纯水中4℃过夜处理。
3.将胶块转移到25mL氧化试剂中,轻轻振荡15分钟。
4.用100mL 3%乙酸溶液洗涤胶块3次,每次轻轻振荡5分钟。
5.将胶块转移到25mL糖蛋白染色试剂中,轻轻振荡15分钟。
注:若染色试剂中有晶体析出,只需离心取上清液去除晶体即可,不要加热来溶解晶体。
6.将胶块转移到25mL还原试剂中,轻轻振荡5分钟。
7.用3%乙酸溶液洗涤胶块,然后用超纯水洗涤至显色,糖蛋白将显现为品红条带。胶块保存在3%乙酸溶液中。
硝化纤维素膜染色的操作步骤(注意:请在通风橱中进行以下操作)
1.用20mL 3%乙酸溶液洗涤膜两次,每次轻轻振荡10分钟。
2.将膜转移到10mL的氧化试剂中,轻轻振荡15分钟。
3.用10mL 3%乙酸溶液洗涤膜3次,每次轻轻振荡5分钟。
4.将膜转移到10mL的糖蛋白染色试剂中,轻轻振荡15分钟。(注:若染色试剂中有晶体析出,只需离心取上清液去除晶体即可,不要加热来溶解晶体。)
5.将膜转移到10mL还原试剂中,轻轻振荡5分钟。
6.用3%乙酸溶液洗涤膜,然后用超纯水洗涤至显色,糖蛋白将显现为品红条带。膜可保存在3%乙酸溶液中。
TCEP溶液(0.5M)特价促销关键词:BTN131056,TCEP Solution,TCEP溶液,0.5M,TCEP溶液(0.5M)
·中性亲和素蛋白
编号:BTN131090
英文名称:Nuetral Avidin
规格:10mg
中性亲和素蛋白是一种去糖基化形式的亲和素,因此对外源凝集素的结合降低至检测不出的水平,而对结合生物素的亲和性(Ka=1015M-1)没有任何损失。中性亲和素蛋白等电点为中性,这样可以避免非特异的结合。另外它表面的赖*酸残基让它可以被衍生或者进行蛋白标记。中性亲和素蛋白的分子量为60000,对生物素的特异结合能力大约为14μg/mg蛋白,接近理论最大活性。
产品特点:
➤相比抗组*酸抗体背景更低。
➤可进行抗体剥离和重新检测。
➤ 去糖基化,将外源凝集素结合降低至不可检测水平。
➤可在组织化学中用于生物素封闭试剂。
➤ 结合能力为11-17μg生物素/mg中性亲和素蛋白。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·DNA Shuffling试剂盒
编号:BTN131178
英文名称:DNA Shuffling Kit
规格:10次
DNA Shuffling即DNA分子的体外同源重组,它是一种分子水平上的定向进化(directed evolution)技术,它以一个或多个基因为起始材料,通过先随机断裂成小片段,再进行互为模板和引物的PCR(无外加引物),最后再进行常规PCR(外加引物)等处理,最后得到含有大量DNA重组突变的PCR产物。其原理示意图如下:
产品特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,无需单独准备各成分。
2.操作手册经过优化,1-2天即可完成,节省大量优化时间。
3.本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| PCR Mix 3.0,2× | 1.5mL |
| DNase I溶液(1U/μL) | 10μl |
| 溶液A,10× | 60μl |
| 溶液B,10× | 60μl |
| 超纯水 | 1mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
使用方法:
1.待突变基因片段的制备:待突变基因片段可以用含此基因的质粒为模板、用PCR法或酶切法制备。制备时需保证含此基因(或此基因的一部分)的DNA片段总长度不要超过1kb,同时比DNA shuffling终产物(第二轮PCR产物)长200-400bp。每次DNA Shuffling实验至少需要2μg起始DNA片段(如果含几个基因片段,则彼此的比例为1:1),并且必须通过胶回收的方法回收,以便彻底去除残留的质粒模板、引物和非特异扩增产物等。最后需用分光光度法准确定量。
2.提前准备37℃和75℃水浴,同时新鲜配制0.1U/μL的DNase工作液放冰上待用(必须在用时才配制,方法是将1μl 本试剂盒提供的1U/μL的DNase I溶液和1μl溶液A和8μl超纯水混合)。此溶液需在24小时内使用。
3.在一个离心管中,按顺序加入下列成分:
| 成分 | 用量 |
| 待突变基因片段(第1步制备) | 2μg |
| 溶液A | 5μl |
| 溶液B | 5μL |
| DNase I工作液(第2步制备) | 2μL |
| 超纯水 | 36μL |
4.充分轻柔吹打混匀后37℃水浴8分钟,然后立即放75℃水浴处理10分钟以灭活DNase I。
5.在2-3%琼脂糖凝胶上电泳,用常规的胶回收法回收25-150bp范围的所有片段待用。注意:一定要加合适的DNA marker以便确定片段范围,最好使用本公司生产的绿如蓝核酸染料(可见光型)作为电泳染料以避免用UV照射DNA,否则UV使DNA发生的交联将极大降低后续扩增效果。
6.分光光度法精确测定回收片段的浓度。
7.在PCR管中按顺序加入0.5μg上步回收得到的回收片段、50μl 2×PCR Mix、加超纯水到100μl。
8.按下面的PCR反应参数进行第一轮无引物PCR:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| PCR前变性 | 94℃ | 150s |
| PCR反应(40循环) | 94℃ | 30s |
| 47.5℃ | 45s | |
| 72℃ | 10s,每次循环后增加5s | |
| PCR后延伸 | 72℃ | 10min |
9.取5-10μl进行电泳检测,然后进行PCR回收,得到第一轮PCR产物。
10.将回收的第一轮PCR产物1μl原液作为模板设置3管第二轮PCR反应。
| 成分 | 用量 |
| 回收的第一轮PCR产物 | 1μL |
| PCR Mix 3.0,2× | 50μL |
| 自备DNA Shuffling引物 | 各1μM |
| 超纯水 | 加水到100μL |
11.按下列PCR参数进行第二轮PCR。
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 活化 | 94℃ | 150s |
| PCR反应(25次循环) | 94℃ | 30s |
| 47.5℃ | 45s | |
| 72℃ | 60s,每次循环后增加5s | |
| PCR后延伸 | 72℃ | 10min |
12.电泳检测,回收预期大小的PCR产物,用于后续的构建克隆文库实验(略)。
疑难解答:
Q:易错PCR和DNA Shuffling有何区别?
A:前者引入的是点突变,后者引入的是重组突变。示意图如下:
TCEP溶液(0.5M)特价促销关键词:BTN131056,TCEP Solution,TCEP溶液,0.5M,TCEP溶液(0.5M)
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J0315 山羊抗人IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
CYB167086 兔抗牛IgG
神经HRP示踪显色液(DAB法) 50T
海藻酸 Sodium butyrate 9005-32-7
ARB10746 人纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)检测服务 Human plasminogen activator inhibitor 1,pai-1 ELISA KIT
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司帕沙星 4-CN 110871-86-8
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HC0113 透析袋MD34 ( 截留量7000 )
Hoechst33258染色液(含封片剂) 10ml
PY02-005A 麦康凯琼脂(不含结晶紫) 250克
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