BTN130904型超级杂交液(Oligo探针)现货供应

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百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN130904型超级杂交液(Oligo探针)现货供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN130904型超级杂交液(Oligo探针)现货供应
编号：BTN130904
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：Super hybrid solution(Oligo probe)
规格：10mL
本产品为即用型Oligo探针专用核酸杂交液。核酸杂交一般是指用一种标记的核酸探针与印迹膜上的核酸进行杂交，由此检测印迹膜上是否存在与探针同源的核酸分子(靶分子)。核酸杂交是分子生物学的基本技术之一，应用非常广泛。

产品特点：
1. 既可以用于DNA Oligo探针，也可以用于RNA Oligo探针。
2. 即开即用，使用方便。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 对 Oligo探针的杂交，Tm=GC 数量×4℃+AT 数量×2℃。
2. 对 Oligo探针的杂交，最佳杂交温度一般比Tm低5℃。由于Oligo 较短，更容易受各种因素影响(如错配率、修饰碱基比例等)，所以最佳温度需要适度摸索和优化。
3. 确定洗膜温度: Oligo探针可以室温洗膜。
4. 预杂交步骤
预杂交就是用不含Oligo探针的本产品跟印迹膜进行孵育，其目的是用所含的非特异性DNA分子(鲑精DNA或小牛胸腺DNA)及其它高分子化合物将印迹膜上会非特异地吸附Oligo探针分子的位点封闭，否则这些位点会吸附Oligo探针，造成高背景。
1)将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的6×SSC溶液中，使其充分湿润。
2)将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋最好预先封口，再剪掉一角，留一个小口)，按每平方厘米印迹膜加0.2mL本产品的比例沿小口加入本产品，然后用塑料封口机将口封牢。
3)将此塑料袋浸没入温度设定在最佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中，保温1-2小时，延长到12-16小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停的摇动状态中，使本产品与印迹膜充分接触。
5. 杂交步骤
1)将Oligo探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪刀剪一小口，加入Oligo探针后用热封机封口)。Oligo探针的加入量视探针标记效率而定，一般要求终浓度不能低于1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷贝基因，Oligo探针的加入量应加大，而对于检测克隆的基因片段，则Oligo探针的量可减少。如果是放射性Oligo探针，应将此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
2)在选定的杂交温度下继续保温，时间一般为6-12小时。
6. 洗膜步骤
注意在下面的所有操作过程中，一定不要使印迹膜干燥。
此步是将与印迹膜非特异结合的探针分子洗去而只留下特异结合的Oligo探针分子。由于非特异性杂交的杂交分子解链温度较低，热稳定性较差，在一定的温度和较低的离子强度下，即可洗掉。
1)杂交完毕，取出塑料袋，剪去一角，倒出所有的含Oligo探针的杂交液。此含Oligo探针的杂交液可以多次使用再倒弃。
2)剪开杂交袋，用镊子取出印迹膜，浸没于大量的2×SSC(含0.5 % SDS)溶液中，室温下振荡漂洗15分钟。
3)重复上步操作一次。
4)将印迹膜转移至0.1×SSC(含0.1% SDS)溶液中，在计算好的洗膜温度下振荡漂洗30分钟至1小时。
5)重复上步操作一次。
6)将印迹膜转移到滤纸上，吸去表面液体后印迹膜即可用于后续检测。

疑难解答：
问题一：高背景(有或没有杂交信号)
解决方案：将放射性Oligo探针的比活降低到2×10E6 cpm/mL以下；将非放射性Oligo探针的终浓度降低到30 ng/mL以下；减少杂交时间；适当提高杂交温度。
问题二：没有杂交信号或杂交信号非常弱
解决方案：杂交过程中应该连续振荡，不应该有气泡，避免印迹膜变干。将放射性Oligo探针活性提高到>5×10E8 cpm/ng，提高非放射性标记Oligo探针的终浓度；适当降低杂交温度。

关于BTN130904型超级杂交液(Oligo探针)现货供应的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
BTN90608 中提柱式BAC DNAOUT Midi Column BAC DNAOUT
对**甘*酸 LVFX 6212-33-5
MES buffer(0.1mol/L,pH4.7)   100ml
ARB13496 鸡病毒性肠炎病毒(DEV)Elisa方法检测 Chicken virus enteritis,dev ELISA KIT
羧肽酶B(猪胰) Soy protein isolate 9025-24-5
BL0850 兔抗山羊IgG纯化抗体
ARB11172 人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA代测服务 Human monocyte chemotactic protein 3,mcp-3 ELISA KIT
ARB11261 人骨成型蛋白2(BMP-2)Elisa方法检测 Human bone morphogenetic protein 2,bmp-2 ELISA KIT
间甲*甲*(代"酸") Trifluorothymidine 99-04-7
BL0872 羊抗猪IgG免疫血清
利福平溶液(50mg/ml) Rifampicin 50mg/ml 10ml
PY02-013  营养肉汤(NB)  250克  
葡萄糖氧化酶 Sephadex G-50 9001-37-0
BL1388 SABC兔IgG-AP kit
PY01-174  结晶紫  BS  25克  
CYB165012 生物素化羊抗人IgA
5-腺苷三磷酸二*盐三水物 DNHP 34369-07-8
BTN130904型超级杂交液(Oligo探针)现货供应关键词：超级杂交液(Oligo探针),Super hybrid solution(Oligo probe),BTN130904

BL0923 RBITC标记羊抗人纤维蛋白原抗体
ARB13641 兔子基质金属蛋白酶3(MMP-3)elisa检测操作说明书 Rabbit matrix metalloproteinase 3,mmp-3 ELISA KIT
ARB11939 大鼠5羟色胺(5HT)elisa检测说明书 ?Rat 5-hydroxytryptamine,5ht ELISA KIT
ARB10489 人白介素2受体(IL-2R)含量检测 Human interleukin-2 receptor,IL-2r ELISA KIT
N-癸酰基-N-甲基葡糖胺 Pyridine hydrochloride 85261-20-7
*酚水溶液  5% 100ml
BOC-L-丙*醇 Polyacrylic resin Ⅲ 79069-13-9
7761-88-*(代"8") 硝酸*(代"银")
ARB14002 猪髓过氧化物酶(MPO)定量分析 Porcine myeloperoxidase,mpo ELISA KIT
BTN131021 链霉亲和素 Streptavidin
葡萄糖-6-磷酸脱*酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)   100T
司帕沙星 4-CN 110871-86-8
ARB10321 人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)含量测试 Human endo*(代"c")rine gland vascular endothelial growth factor,eg-vegf ELISA KIT
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·dCTP溶液(2.5mM)
编号：BTN130915
英文名称：dCTP Solution(2.5mM)
规格：2mL
dCTP分子式为C9H13N3O13P3Na3,分子量是533.1，消光系数为9.1×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为271nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH)
编号：BTN81212B
英文名称：One-Stop Protein Native PAGE Pack(B)
规格：30次
非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目前电泳法分离活性蛋白的主要方法之一，跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同，它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同，所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐，为此本公司开发了本产品。

产品特点：
1．即开即用，不需单独准备各种成分，十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺
2．非变性，电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用，得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。
3．可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。
4．电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
5．提供具有3种不同pH的缓冲液套装，便于客户选择最适合的缓冲液体系。

产品组成：

 

成分	规格
丙*(代"烯")酰胺干粉	60g
甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉	3g
TEMED	1.5ml
过硫*(代"酸")铵干粉	1g
高中低缓冲液套装选一	ABC之一(见下)
说明书	1份
高pH缓冲液套装(只有BTN81212A有此成分)
高pH浓缩胶配胶液(pH6.7)，4×	100ml
高pH分离胶配胶液(pH8.9)，4×	200ml
高pH电泳液(pH8.3)	10L(干粉)
高pH上样液，5×	1ml
中pH缓冲液套装(只有BTN81212B有此成分)
中pH浓缩胶配胶液(pH5.5)，4×	100ml
中pH分离胶配胶液(pH7.5)，4×	200ml
中pH电泳液(pH7.0)干粉A	55.2g
中pH电泳液(pH7.0)干粉B	10g
中pH上样液，5×	1ml
低pH缓冲液套装(只有BTN81212C有此成分)
低pH浓缩胶配胶液(pH6.7)，4×	100ml
低pH分离胶配胶液(pH4.3)，4×	200ml
低pH电泳液(pH4.5)	10L(干粉)
低pH上样液，5×	1ml

注：高、中和低pH缓冲液套装里面均含100mL浓缩胶配胶液、200mL分离胶配胶液、10 L电泳液(干粉)和1mL上样液，只是pH不同。

储存条件：常温运输和保存(上样液需-20℃保存)，保存期为一年。

使用方法：
如何选择缓冲液?
高pH浓缩胶，高pH分离胶，高pH电泳液和高pH上样液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此，绝不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。选择适当pH的缓冲液(包括上样液，电泳液，配胶液等)对蛋白质非变性PAGE非常重要，缓冲液的最佳pH又跟目的蛋白质的pI值密切相关。如果pH远离pI，则蛋白质分子带电多(电荷密度大)，电泳速度快，分辨率高。但过酸过碱又容易使蛋白质结构变性，失去活性，所以最佳pH条件就是在电泳分辨率和维持活性之间寻找平衡，需要针对每种蛋白质进行摸索或通过滴定曲线来确定，没有通用的电泳缓冲体系。由于有近半数的蛋白质pI在4-6.5，所以在不知道目标蛋白的pI时，可以先选用高pH缓冲系统。

一、配制分离胶
1．确定浓度。对分子量在100Kd以上的蛋白质，可选用3-5%的胶；对分子量在20-150KD之间的蛋白质，可选用5-10%的胶；对分子量在10-80KD之间的蛋白质，可选用10-15%的胶。对未知样品，建议使用7.5%的胶。
2．配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵)：按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL去离子水的比例配制10%的APS溶液，该溶液可以在4℃存放一周。
3．配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水和3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺,充分摇晃直到溶解(约需10-20分钟)即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液。此溶液最好在一个月内用完，必须4℃避光保存。
4．配10mL分离胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中，先加入4.2mL去离子水、3.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×分离胶配胶液。
5．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6．加入50μL新配制的10%APS和10μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则按比例增加)，迅速摇匀后倒胶。注意：如果购买的是低pH缓冲系统，由于在低pH缓冲液中PAGE聚合速度降低，所以需要增加上述两成分的用量。
7．在胶面距离顶部1-1.5 cm的时候停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm厚的水，使胶顶部液面平整。由于比重不同，水和丙*(代"烯")酰胺溶液不会混合。
8．室温聚合30-60分钟后，用1×分离胶配胶液洗涤凝固的胶的顶部，待用。

二、配制浓缩胶(浓缩胶可以提高分辨率，适合于成分复杂的样品，一般使用浓度为4%。使用浓缩胶时蛋白质泳动速度主要跟其尺寸和形状相关。因浓缩胶pH跟分离胶pH不同，蛋白质可能会发生聚合和沉淀。对成分单一的样品，可以不用浓缩胶，此时蛋白的泳动速度主要跟其电荷密度，尺寸和形状相关。)
1．配10mL浓缩胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中，先加入6.2mL去离子水、1.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×浓缩配胶液。
2．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
3．按上表用量加入50μL 10%APS和15μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则用量需按比例增加)，迅速摇匀后在已经凝固的分离胶上倒胶。
4．在液面达到顶部时停止灌胶，插入梳子。
5．室温聚合30-60分钟，拔出梳子，用1×电泳液冲洗加样孔。

三、电泳
1．将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽加入足够1×电泳液。注：本产品提供10升的三种不同pH的电泳液干粉中的一种，低PH和高PH值电泳液用前需将所有干粉溶解在1 L水中得10×电泳液，可以室温放置，用时再稀释成1×电泳液。一般不需要再调节pH，但保险起见，可以用pH试纸测试一下1×电泳液。高中低pH电泳缓冲液的pH分别是8.3，7.0和4.5。
 注意：中pH值的电泳液干粉只能配1x电泳液，否则不溶解。称取中pH电泳液(pH7.0)干粉A，5.52g,中pH电泳液(pH7.0)干粉B 1g混匀，加去离子水至彻底溶解，调PH7.0，定容至1L。客户根据可实际需要量按比例增减。
2．连接电极。如果浓缩胶和分离胶的pH高于目标蛋白pI，目标蛋白将带负电荷并向阳极移动，可以按标准的SDS-PAGE方法接通电极(上阴极下阳极)；如果浓缩胶和分离胶pH低于目标蛋白pI，目标蛋白将带正电荷并向阴级移动，此时应该下阴极上阳极。
3．300V预电泳直到电流不再降低(约需要30分钟)以去除残留过硫*(代"酸")铵。
4．换电泳液。
5．在液体蛋白质样品中加入5×上样液(16μl液体样品加4μL上样液)后上样。0.75 mm厚的胶可以上10μl，1.5 mm厚的胶可以上20μl。在未用加样孔中也要加1×上样液以防有样品的空道的样品扩散。注意：如果用考染检测，每个孔的蛋白最好在50-100μg总蛋白，如果银染则只需要1ug即可。样品如果是蛋白质沉淀，可用1×上样液直接溶解蛋白质沉淀后再上样。蛋白质溶液或沉淀中不能含有能够改变上样液pH的残留成分(如蛋白质沉淀剂TCA)，用前最好用pH试纸测试一下，不在上样液的pH范围时就用酸或碱调到正常范围。大量样品可用透析法调pH。
6．上样自备的天然PAGE蛋白质标准或等电电泳的标准品(如果有的话)。
7．用15 mA(对0.75 mm厚的胶)或30mM(对1.5mm厚的胶)的电流电泳直到染料移动到分离胶底部。微型胶一般需要1-2小时。注意：电泳过程最好在冷室或有冷却系统，以免电泳产热使蛋白质变性。
8．终止电泳，取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或酶活性检测)。

我公司强烈推荐探针标记及检测系列产品，热情期待您的咨询选购BTN130904型超级杂交液(Oligo探针)现货供应。