北京包涵体中量纯化试剂盒现货价格

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百奥莱博专业生产供应北京包涵体中量纯化试剂盒现货价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京包涵体中量纯化试剂盒现货价格
规格：5次
英文名：Inclusion Body Midiprep Kit
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本产品是我们公司包涵体微量纯化试剂盒(BTN90508)的中量提取升级产品，用于中量，快速的提取高质量的包涵体。

产品特点：
1．中量提取，一次可以处理30-50mL的菌液，一次中量提取相当于10-20次微量提取。
2．操作简单快速，整个过程只要四十分钟左右。
3．大规模提取，可以在15-50mL离心管中完成。
4．能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份，使重组蛋白所占比重达到60%以上。
5．细胞裂解通过非离子洗涤剂的化学裂解法，裂解更加温和。
6．得到的包涵体可以用于重折叠。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	25ml
溶液B	250ml
包涵体溶解液	25mL
溶菌酶	3g
Benzonase(1U/μL)	125μl
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，但溶菌酶和Benzonase需要低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

准备工作：
将3g溶菌酶全部加入到25mL溶液A中溶解，然后根据每次的需要量(一次大量提取需要5mL)分成1mL/只放-20℃待用。每次只取用一管含溶菌酶的溶液A。
包涵体中的重组蛋白一般比溶解状态中的蛋白质更能够抵抗微量内源性蛋白水解酶的降解，如果实验发现得到的重组蛋白确有降解，则需要在溶液A中新鲜加入自备的蛋白酶抑制剂混合物(BTN80808)。

一、细胞裂解和包涵体的纯化：
1．在蛋白诱导期结束时，转移30mL菌液到一个干净的塑料离心管中。
2．5000-7,000rpm室温离心3分钟，小心弃上清。
3．加入5mL含溶菌酶的溶液A重悬细胞。
4．室温放置10-20分钟裂解细菌，其间可以用手轻弹离心管混匀。
5．-20℃冷冻至凝固。凝固有利于裂解细菌，所以一定要凝固到细菌溶液变成固体。
6．室温水浴解冻。如果裂解充分，细菌释放出的DNA将使裂解物十分粘稠。如果不粘稠，说明裂解不充分，需要重复3-6步，否则完整细菌将和包涵体一起沉淀，影响包涵体的纯度。如有条件最好在显微镜下检查细菌是否充分裂解。
7．加入25μL的Benzonase(1U/μL)，脱色摇床上摇晃直到裂解液不再粘稠，一般需要30分钟左右(检查方式是将裂解物倾倒转移到另一离心管中，在转移过程中看其是否粘稠)。
8．5000-7,000rpm 4℃离心5分钟，小心收集上清。上清含有以可溶形式存在的重组蛋白，可以保留作为SDS-PAGE对照样品。
9．将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中，轻柔混匀后室温放置5分钟。
10．5000-7,000rpm 4℃离心10分钟，小心收集上清,可以作为包涵体第一次洗涤的对照样品。
11．将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在25mL的溶液B中，轻柔混匀后室温放置5分钟。
12．5000-7,000rpm 4℃离心10分钟，小心收集上清作为包涵体第二次洗涤的对照样品。一般洗涤两次就能够得到足够纯净的包涵体，如果需要更多洗涤，需要用户单独购买包涵体洗涤液(溶液B)。
13．得到的沉淀即为包涵体，可以长期放置在冰箱待用或直接进入包涵体的溶解步骤。

二、包涵体的溶解：
1．在包涵体沉淀中加入5mL包涵体溶解液，用枪头充分吹打后漩涡震荡。如果低温放置，包涵体溶解液会产生沉淀，必须45-65℃溶化并混匀后才能使用。
2．室温放置1小时使蛋白质充分溶解。
3．20000g 4℃离心20分钟，小心收集上清，保留不溶性沉淀。注意：检查离心管能否承受此离心力。SDS-PAGE检查是否大部分重组蛋白都在上清中。如果没有，说明包涵体没有完全溶解，需要用适当增加包涵体溶解液的用量。
4．得到的蛋白质溶液可以用于复性等试验。由于不同的蛋白质有不同的最佳复性条件，所以本公司不能提供统一的复性溶液，需要用户自己摸索。
 注意：包涵体纯化过程中引入了溶菌酶、DNase和RNase等外源蛋白质，在SDS-PAGE分析时可能有额外条带出现。

北京包涵体中量纯化试剂盒现货价格正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·大肠杆菌DH5α化学感受态细胞
编号：BTN81024
英文名称：E.coli DH5α Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。使用pUC19质粒检测，转化效率不低于107，适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
 本菌种来源于Hoffman-Berling 1100菌种。
 

基因型	表现型
deo R	组成型合成脱氧核糖
end A1	核酸内切酶I缺失
gyr A96	具有*啶酮酸抗性
hsd R17	限制性酶EcoK缺失
△(lac)U169	lac基因缺失
rec A1	DNA重组活性降低
Rel A1	允许在无蛋白质合成时有RNA合成
sup E44	抑制琥珀突变突变，为某些噬菌体必需
thi-1	不能自身合成硫*
φ80(lac ZΔM15)	提供α-互补所需的ω片断

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入800μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，200rpm(小于225rpm)振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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1M Tris pH6.8 500ml
001005 豚鼠血清 100ml|500ml
葡聚糖凝胶G-100 T3 RNA Polymerase 9050-94-6
F030429 胶体金标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*GOLD
ARB11233 人细胞绒毛蛋白/埃兹蛋白(CVL)含量分析 Human cytovillin/ezrin,cvl ELISA KIT
细胞蛋白提取试剂盒 Cell protein extraction kit  50T|100T
ARB11258 人胃蛋白酶原A(PGA)定量分析 Human pepsinogen a,pg-a ELISA KIT
固绿FCF CPA-mA 2353-45-9
Laemmli加样缓冲液(2×)   5ml
DP106 质粒小提中量试剂盒
ARB11952 大鼠I型胶原N末端肽(NTX)酶免分析 Rat cross linked n-teloPeptide of type i collagen,ntx ELISA KIT
PY02-085  0.5%葡萄糖肉汤琼脂  250克  
BTN80923 大提柱式动物DNAOUT Maxi Column Animal DNAOUT
乙二*(代"胺")四乙酸二*盐 D(+)-Arabitol 25102-12-9
N-乙酰-L-脯*酸 Ni Sepharose 6 Fast Flow 68-95-1
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山梨醇溶液  1mol/L 100ml
ARB10297 人天青杀素(AZU)定量分析 Human azurocidin,azu ELISA KIT
ARB10354 人心肌肌凝蛋白轻链1(CMLC-1)ELISA代测服务 Human cardiac myosin-light chains 1,cmlc-1 ELISA KIT
BL1395 SABC小鼠/兔IgG-POD kit
ARB11441 人桩蛋白(PAx)Elisa方法检测 Human paxillin,pax ELISA KIT
PY02-450  葡萄糖琼脂  250克  
ARB11473 人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)酶免分析 Human insulin-like growth factors binding protein 1,igfbp-1 ELISA KIT
羧甲基葡聚糖凝胶C-25 MCA 62886-59-3
F030703 BIOTIN标记小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg*BIOTIN
BTN130624 9°N DNA连接酶 9°N DNA Ligase
酚红指示剂   100ml
BTN131102 生物素化兔IgG Biotin-Rabbit IgG
BL0885 兔抗猪IgG免疫血清
血液单核细胞蛋白提取试剂盒 Blood mononuclear cell protein extraction kit  50T|100T
FastLine Cell cDNA kit 
ARB13335 牛C反映蛋白(CRP)elisa检测 
Tris-HCl缓冲液(0.5mol/L,pH6.8)   100ml|500ml
ARB11281 人骨骼肌受体酪*酸激酶抗体(MUSK-Ab)elisa检测操作说明书 
D-海藻糖 Low range protein MW marker 6138-23-4
ARB11407 人神经营养因子4(NT-4)定量分析 Human neurotrophin 4,nt-4 ELISA KIT

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