北京热启动Taq DNA聚合酶优惠促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京热启动Taq DNA聚合酶优惠促销的品牌：百奥莱博，是优质的工具酶产品，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多热启动Taq DNA聚合酶等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京热启动Taq DNA聚合酶优惠促销
英文名：HotStart Taq DNA Polymerase
产地：国产|进口
规格：100U
编号：BTN120401
热启动Taq DNA聚合酶设计用于增强DNA扩增的特异性、敏感性和产量。使用该酶可在室温配制反应体系，使用非常方便。热启动Taq DNA聚合酶是一种重组Taq DNA聚合酶，蛋白分子*基酸残基上增加了热不稳定的封闭基团。该酶在室温下没有活性，避免形成引物二聚体和非特异性延伸。从而增加DNA扩增的特异性。95℃加热4分钟可恢复酶活性。活化的酶具有与热启动Taq DNA聚合酶相同的功能：催化5´→3´方向合成DNA、无可检测的3´→5´校正外切酶活性、具有较低的5´→3´外切酶活性。该酶还具有脱氧核糖核酸酶转移活性，在PCR产物的3´-端多加1个腺嘌呤。活化前检测不到这些活性。

产品特点：
1．高产量扩增复杂模板。
2．不需要95℃加热4分钟即可激活酶活性。
3．PCR特异性高-降低错配效应和减少引物二聚体的生成。
4．增强的PCR敏感性。
5．使用方便，室温配制PCR反应体系。
6．扩增产物具有3´-dA突出末端。

产品组成：

 

成分	规格
热启动Taq DNA聚合酶(5U/μL)	20μl
10×反应 Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况，设定最佳反应条件。10×HotMaster Taq Buffer中含有Mg2+，配有浓度为15mM MgCl2 。实际PCR反应可因模板等的不同酌情向反应体系中添加适量的Mg2+，设置最佳的反应体系。该酶最适延伸温度为65℃，可在60℃-70℃之间调整。

以人基因组DNA为模板，护增1kb的片段
1．反应体系的建立：50μL反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系)：

2．PCR反应循环的设置：

3．结果检测：反应结束后取5μl反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。

北京热启动Taq DNA聚合酶优惠促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·核酸外切酶T
编号：BTN130627
英文名称：Exonulease T
规格：250U
核酸外切酶T(Exo T)又称核糖核酸酶T(RNase T)，沿 3´→5´方向特异性作用于单链RNA或DNA的3´突出末端。核酸外切酶T作用于3´突出末端，产生RNA或DNA分子的平末端。

产品特点：
➤特异地作用于单链DNA或RNA；
➤ 使DNA或RNA的3´突出端变为平齐末端；
➤ 无核酸内切酶和外切酶污染。

产品组成：

成分	规格
核酸外切酶(5000U/mL)	50μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期半年。

热失活：65℃ 加热 20分钟。

活性定义：1单位指 100μl反应体系中，25℃条件下，30分钟从1nmol[³H]-标记的多聚胸腺嘧啶生成0.1nmol TCA可溶性DNA所需要的酶量。


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维生素D2 Fmoc-lle-OH 50-14-6
PY06-001  大肠杆菌E.coliO157显色培养基  1000ml，用于大肠杆菌O157的快速分离与鉴别
ARB11707 人黑色素细胞抗体(MC Ab)代做ELISA实验 Human melanocyte antibody,mc ab ELISA KIT
2-脱氧-2,2-二*-D-赤型-1-呋*(代"喃")酮糖-3,5-二*甲酰酯 Acetylene tetrabromide 122111-01-7
ARB13950 猪总胆汁(TBA)免费代测 Porcine total bile acide,tba ELISA KIT
地衣红乙醇溶液(1%)   50ml
ARB12134 大鼠甲状腺素抗体(TAb)含量分析 Rat thyroxine antibody,tab ELISA KIT
PMSF   1ml|10ml
36KD单条带蛋白Marker 10mg
BTN100833 PMSF溶液 PMSF Solution
BTN130609 一步式RT-PCR Mix One-Step RT-PCR Mix
BTN130813 DNA磷酸化试剂盒 DNA Phosphorylation Kit
ARB11595 人晚期氧化蛋白产物(AOPP)elisa检测操作说明书 Human advanced oxidation protein products,aopp ELISA KIT
ARB12549 大鼠胰高血糖素样肽1(GLP-1)Elisa分析 Rat ghcagons-like pepfide 1,glp-1 ELISA KIT
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·亲和素
编号：BTN131085
英文名称：Avidin
规格：10mg
本产品为母鸡卵清糖蛋白冻干粉末，亲和纯化，脱盐处理。它结合能力为11-15μg生物素/mg亲和素，等电点10～10.5，在很宽的pH和温度范围稳定。

产品应用：
➤作为与生物素化的酶结合或用于标记酶的免疫分析试剂。
➤作为富含生物素组织切片的封闭蛋白(使用0.1%来抑制内源生物素)。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·可调式易错PCR试剂盒
编号：BTN160903
英文名称：Controlled Error-prone PCR Kit
规格：100次
易错PCR是利用Taq DNA多聚酶不具有3´→5´校对功能的特性，在一定条件下(如不同的dNTP浓度、Mg浓度和MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法，则可从构建的突变库选出所需突变体。易错PCR和常规PCR的比较如下：


产品特点：
1. 即开即用，十分简单方便，尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化，实验人员在一定范围内可以控制突变率，一轮PCR的突变率范围在2-8突变/1000bp，更高的突变率可以通过多轮PCR达到。
3.可用于连续易错PCR，只需把上一次易错PCR的产物用作下一次易错PCR的模板即可，使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
4.可以扩增的DNA片段更长，达到3kb，对于3kb以上的产物，建议分段扩增。

试剂盒组成：

成分	规格
Taq DNA聚合酶(5U/μL)	100μl
易错PCR专用dNTP 2.0,10×	300μl
易错PCR Mix 2.0,10×	300μl
易错PCR专用MnCl2	300μl
易错PCR专用dGTP	300μl
超纯水	1ml

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为一年。

使用方法：

1. 将模板DNA稀释到1ng/uL。将引物稀释到10uM。
 注意：引物是决定易错PCR成败的关键因素，设计引物时要保证其Tm在70℃，长度在25-30nt之间，GC含量在45%-60%之间，3端GC含量低，并且没有发夹结构。
2. 根据每1000bp的预期突变数按下表确定易错PCR的反应条件中MnCl2和dGTP的用量。表中的A表示易错PCR专用的MnCl2，B表示易错PCR专用的dGTP：

预期突变数	2个	3个	4个	5个	6个	7个	8个
A的用量(μl)	0	1.0	2.5	4.0	4.0	4.0	4.0
B的用量(μl)	0	0	0	1.0	2.0	3.0	4.0

3.以30μL的标准PCR反应体系为例，如果反应体系不是30μL，各成分需要按等比例增加或减少。在一干净的PCR管中，加入下列成分
 注意：可以先计算出超纯水的用量，优先加水

成分	用量
超纯水	根据第2步加
易错PCR Mix,10×	3μl
易错PCR 专用dNTP，10×	3μl
易错PCR 专用MnCl2	根据上步
易错PCR 专用dGTP	根据上步
自备DNA模板(1ng/μl)	1μl
自备PCR引物(10μM each)	1μl each
Taq DNA聚合酶(5U/μl)	1μl

4. 按已经优化的PCR条件进行一定循环数的PCR(循环数与突变率的关系见下表)，然后取5μL电泳检查。如果没有优化的PCR条件，一般可以先尝试下面的PCR条件(对1Kb长的模板而言)：

PCR前变性	94℃ 3分钟
易错PCR(循环30次)	94℃ 1分钟
	45℃ 1分钟
	72℃ 1分钟

注：易错PCR一般不需要热启动，也不需要在PCR结束后做延伸处理。长度每增
加1Kb，时间延长1分钟。易错PCR循环次数决定每个核苷酸位置的突变几率，进而决定每个PCR产物可能的突变位点数，所以所需循环数由客户根据需要改动。
5.电泳检测是否得到预计长度的PCR产物。
6. 克隆片段进行功能筛选、或者克隆后进行测序分析突变率、或者用此轮PCR的产物为模板，进行下一轮的易错PCR。

疑难解答：
Q：现象：没有PCR产物。
A：可能原因：一是引物没有优化，可以重新设计引物；二是模板DNA太少，可以增加用量；三是模板不纯，最好先胶回收；四是溶解DNA的溶液中有EDTA，降低了PCR反应体系的Mg离子浓度，可以适当补加Mg离子。
Q：现象：太多的PCR条带或PCR条带模糊一片。
A：可能原因：一是PCR循环数太多；二是复性温度太低；三是延伸时间太长；四是引物没有优化，可以重新设计引物；五是PCR条件没优化，可以使用touch-down PCR；六是模板有其他DNA污染；七是DNA模板质量不高或者浓度太高。
Q：如果需要更高的突变率，如何办？
A：可以使用连续多次易错PCR来提高突变率。但最好先用胶纯化回收PCR片段,再用于下一轮易错PCR。此外不能用少于千分之一的第一次PCR产物作为第二轮易错PCR的模板，否则多样性将受到影响。第三轮易错PCR最好使用所有第二轮的PCR产物作为模板，但需要在10mL体系中完成(可以分成很多100μL体系进行)。

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