北京现货葡萄球菌RNA提取试剂盒批发

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货葡萄球菌RNA提取试剂盒批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货葡萄球菌RNA提取试剂盒批发
规格：50次
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：BTN130842
英文名：Staphylococcus RNA extraction kit

更多有关北京现货葡萄球菌RNA提取试剂盒批发的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·人源脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶
编号：BTN130634
英文名称：Apurinic-Apyrimidinic Endonuclease I
规格：1000U
人源脱嘌呤/脱嘧啶(AP)核酸内切酶APE1，也称为HAP1或Ref-1，与大肠杆菌外切酶III蛋白具有同源性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点5´端的磷酸二酯键，产生单链DNA断裂，留下3´羟基和5´脱氧核糖磷酸末端。除具有AP核酸内切酶活性外，据报道APE1还具有弱的DNA 3´二酯酶、3´到 5´外切酶和RNase H活性。除 DNA修复活性外，APE 1还能通过一种氧化还原机制，体外调控许多转录因子的DNA结合活性。作为这个功能的一部分，APE 1已被证实能刺激Fos-Jun异源二聚体、Jun-Jun同源二聚体、Hela细胞AP-1蛋白以及包括NF-kB、Myb和ATF/CREB家族成员在内的其它几种转录因子的DNA结合活性。其反应示意图如下：


产品特点：
➤ 单细胞凝胶电泳(彗星试验)，彗星试验的推荐稀释倍数1:10³；
➤ 碱洗脱；
➤ 碱解旋；
➤ 改良切刻翻译。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在10μl总反应体系中，37℃条件下1小时，能切割20pmol含一个单独AP位点的34 mer寡核苷酸双链所需要的酶量。

AP位点的创建方法如下：37℃条件下，用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理20pmol含一个尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链2分钟。


北京现货葡萄球菌RNA提取试剂盒批发关键词：Staphylococcus RNA extraction kit,BTN130842,葡萄球菌RNA提取试剂盒


·剥离硅烷
编号：BTN80935
英文名称：Repeling Silane
规格：200mL
本产品为一定浓度的二*二甲基硅烷(Dichlorodimethylsilane)，其分子式为C2H6Cl2Si，分子量为129.06 ，CAS号为75-78-*(代"5")。主要用于制备PAGE胶时，处理其中一块玻璃板，使附着的凝胶易于剥离。本产品最好跟亲和硅烷结合使用。但本产品不能用于硅化玻璃器皿。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

·一步法96孔板质粒DNA提取试剂盒(真空法)
编号：BTN131198
英文名称：One-step plasmid DNA extraction kit with 96-wells plate
规格：1次
本产品为一定浓度的二*二甲基硅烷(Dichlorodimethylsilane)，其分子式为C2H6Cl2Si，分子量为129.06 ，CAS号为75-78-*(代"5")。主要用于制备PAGE胶时，处理其中一块玻璃板，使附着的凝胶易于剥离。本产品最好跟亲和硅烷结合使用。但本产品不能用于硅化玻璃器皿。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

·包涵体大量纯化试剂盒
编号：BTN90510
英文名称：Inclusion Body Maxiprep Kit
规格：2次
本产品是包涵体微量纯化试剂盒的大提升级产品，用于大量，快速的提取高质量的包涵体。

产品特点：
1.大量提取，1次可处理多达5升的菌液，相当于50次中量提取。
2.适合制备级别的包涵体纯化，需在50mL以上的离心管或离心瓶中完成。
3. 能有效去除包涵体中的细胞壁和细胞膜等非重组蛋白成份，使重组蛋白在包涵体中所占比重达到60%以上。
4. 即可以选择高压裂解法，也可以采用酶学裂解法裂解细菌。
5. 得到的包涵体可以用于重折叠，也可以用于凝胶层析和动物免疫。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	100mL
溶液B	250mL×2
包涵体溶解液	100ml
溶菌酶	100mg
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存(溶菌酶需要-20℃保存，包涵体溶解液可以室温保存)，有效期一年。

自备试剂：如果得到的重组蛋白确有降解则需要自备蛋白酶抑制剂混合物(BTN80808)。

使用方法：

一．细胞沉淀：
1．转移1-5升菌液到干净的、预称重量的塑料离心瓶中。如果离心瓶体积不够大，可以分多次反复离心收集。
2．5000g(相当于Sorvall GSA转头5500rpm)4℃离心15-30分钟，小心弃上清。
3．复称重量，差值就是细菌的湿重。1升的过夜培养的大肠杆菌湿重一般为3克，所以1-5升菌液一般能得到3-15克细菌。注意：后续操作的很多溶液都是按此步得到得细胞湿重添加。
4．细胞沉淀可以立即使用或存放在-80℃待用。

二．细胞裂解(下面两法中选其一)：
 高压破碎法(French Press)+超声法(推荐方法)
1．按每克细菌湿重加入3mL溶液A重悬细胞，可以用玻璃棒搅拌或用Waring捣碎机匀浆(如果细菌湿重超过10克)使细菌悬浮，直到检测不到成块的细胞为止。如有必要，可以加入溶菌酶干粉，使其终浓度为0.2mg/mL。
2．让细胞通过压力为16000-18000 lb/in2的高压细胞破碎仪，收集的细胞裂解液需放冰上。
3．重复上步操作一次或多次，直到绝大部分细菌都被裂解。注意：每次处理后最好在显微镜下检查细菌裂解的比例。
4．将细胞裂解液置于冰浴中，用超声破碎仪满功率下超声处理5分钟，工作状态为50%(开0.5秒，关0.5秒)。此过程中最好将细胞裂解液放冰上并用磁力搅拌器搅拌，否则产生的热量会使包涵体蛋白变性，在纯化中丢失。
 酶法+超声法(在没有高压破碎仪器时首选方法)
1．按每克细菌湿重加入3mL的含溶菌酶的溶液A重悬细胞，可以用玻璃棒搅拌细菌沉淀使之悬浮。
2．在细菌悬浮液中加入溶菌酶干粉，使其终浓度为0.2mg/mL，搅拌混匀后37℃放置30分钟裂解细菌，其间不时需要用玻璃棒混匀。细菌释放出的DNA将使裂解物变得十分粘稠。如果不粘稠，说明裂解不充分，需要继续裂解，否则完整细菌将和包涵体一起沉淀，影响包涵体的纯度。由于处理量大，最好在显微镜下检查细菌是否充分裂解。
3．将细胞裂解液置于冰浴中，用超声破碎仪满功率下超声处理5分钟，工作状态为50%(开0.5秒，关0.5秒)。此过程中最好将细胞裂解液放冰上并用磁力搅拌器搅拌，否则产生的热量会使包涵体蛋白变性，在纯化中丢失。

三．包涵体纯化：
1．将超声处理的细胞裂解液转移到离心瓶中，22000g 4℃下高速离心60分钟(注意：转子不同其对应的离心速度不同)，小心收集上清。上清含有以可溶形式存在的重组蛋白，可以保留作为SDS-PAGE对照样品。
2. 将沉淀(主要由包涵体构成)悬浮在预冷的溶液B中。每克细菌需要5mL溶液B，1升细菌的湿重约3克，大约需要15mL溶液B，用玻璃棒或匀浆器搅拌混匀后室温放置5分钟。
3．22000g 4℃下高速离心30分钟，沉淀将出现三层，最下面的是未彻底破裂的细胞碎片，其上是包涵体，最上层的松软沉淀是细胞壁和细胞外膜。如果处理过程中使用过溶菌酶，则此层较薄。小心收集上清，可以作为包涵体第一次洗涤的对照样品。
4．重复第8-第9步直到上清变清和最上层细胞壁和细胞外膜松软沉淀消失，此过程一般需要重复洗涤2次(共3次洗涤)，小心收集上清作为包涵体第二次洗涤和第三次洗涤的对照样品。本试剂盒提供的溶液B足够一次5升规模的提取洗3次，如需更多溶液B请单独购买。
5．上步得到的沉淀即为包涵体，其中重组蛋白一般占60%重量，其余40%为其他蛋白质。此沉淀可以长期放置在-80℃冰箱待用，也可以直接用于免疫动物制备抗体，还可以直接进入下面得包涵体的溶解步骤。
6．估计重组蛋白的产率：首先需要通过预实验知道重组蛋白的表达水品，如果表达水平为1%，则1克湿重的细菌中将含有1mg重组蛋白质。此法得到的重组蛋白质的回收率一般在75%，即1mg重组蛋白质能得到0.75mg，丢失0.25mg。

四．包涵体的溶解：
1．在室温下，将包涵体溶解液加入到包涵体沉淀中，用枪头充分吹打后漩涡震荡。如果需要将溶解的包涵体直接用于凝胶过滤层析进一步纯化，则按每克原始细胞湿重加入1mL包涵体溶解液，重组蛋白的浓度约为4-5mg/mL；如果需要将溶解的包涵体直接用于蛋白质折叠，则按每克原始细胞湿重加入3mL包涵体溶解液，重组蛋白的浓度约为1-2mg/mL；注意：包涵体溶解液低温放置会产生沉淀，必须45-65℃溶化并混匀后才能使用。
2．室温放置1小时使蛋白质充分溶解。
3．100,000g 4℃离心60分钟(转速需要根据离心机转子的大小换算)，小心收集上清，保留不溶性沉淀。注意：检查离心管能否承受此离心力。SDS-PAGE检查是否大部分重组蛋白都在上清中。如果没有，说明包涵体没有完全溶解，需要用适当增加包涵体溶解液的用量。
4．将上清(溶解的包涵体)分成10-20mL一份，放于塑料离心管中(不要超过离心管容量的70%)置-80℃长期保存或直接用于复性等试验。由于不同的蛋白质有不同的最佳复性条件，需要用户自己摸索。包涵体纯化过程中引入了溶菌酶，在SDS-PAGE分析时可能有额外条带出现。


北京现货葡萄球菌RNA提取试剂盒批发关键词：Staphylococcus RNA extraction kit,BTN130842,葡萄球菌RNA提取试剂盒

2-*三*甲基*树脂 α-Methyl-L-DOPA
556-50-3 甘*酸二肽 Glycylgcine
ARB13328 马生长激素(GH)酶联免疫定量检测 Equine growth hormone,gh ELISA KIT
4-硝基*(代"*")磷酸二* Fast blue RR salt 4264-83-9
PUC19质粒 Vanillin
ARB13497 鸡烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)定量分析 Chicken nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,nadph ELISA KIT
573-58-0 刚果红 Congo Red
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE,RNase free)   500ml
BFD047 莱克多巴胺快速检测卡
97-05-2 磺基水杨酸 5-Sulfosalicylic acid dihydrate
高糖DMEM(不含丙*(代"酮")酸*）   500ml
PY01-105  腺嘌呤  1克  
F030829 BIOTIN标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*BIOTIN
51-35-4 L-Hydroxyproline  L-羟基脯*酸
D-果糖 Iohexol 57-48-7
ARB11650 人蛋白质二硫键异构酶(PDI)elisa检测操作说明书 Human protein disulfide isomerase,pdi ELISA KIT
F030830 BIOTIN标记兔抗人IgG抗体 Rabbit Anti-Human IgG*BIOTIN
ARB10997 人泛素蛋白(Ub)定量分析 Human ubiquitin,ub ELISA KIT
BL1363 RNAse A溶液(10mg/ml )
MES溶液(0.1mol/L)   100ml
CYB163013 羊抗人IgA-RBITC(α链特异)
BFD073 H9亚型禽流感抗原快速检测卡

我公司生产供应销*(代"售")的RNA纯化产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购北京现货葡萄球菌RNA提取试剂盒批发。