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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
916
- 英文名:
Western Blot Blocking Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输、4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)大量库存促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)大量库存促销
编号:BTN81210
英文名:Western Blot Blocking Buffer
规格:250mL
品牌:百奥莱博
Western Blot实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。无蛋白封闭液可最大限度减少交叉反应引起的非特异性背景。本产品可快速高效地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
欲了解更多北京Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)大量库存促销的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞
编号:BTN130562
英文名称:E.coli Tuner(DE3) Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
Tuner(DE3)为常规表达宿主菌,用于一般蛋白表达,lac 透性酶突变,可以精细控制表达水平。无抗性。
基因型:F–omp T hsd SB(rB– m–)gal dcm lacY1(DE3)
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。
·**酚溶液
编号:BTN131112
英文名称:Chloronaphthol(4CN) Solution
规格:250mL
**酚分子式C10H7OCl,分子量为178.6,可用于印迹或组织化学实验中辣根过氧化物酶的显色检测。这种沉淀物不如TMB和DAB灵敏和稳定,但是这种可溶于酒精的沉淀物很易拍照,并且由于其为独特的蓝紫色,经常被用于双染。
产品特点:
1. 稳定,预过滤,即用型溶液;
2. 无需过氧化*;
3. 易于拍照。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
·乙酰化牛血清白蛋白
编号:BTN131017
英文名称:Bovine Serum Albumin, Acetylated
规格:400μL
乙酰化牛血清白蛋白可以用作酶的稳定剂或作为一种载体蛋白。本产品为浓度为它是利用经过改良的Gonzalez等的方法制备的,并通过去离子水充分透析除去杂质,无DNA酶及RNA酶活性。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·dATP溶液(2.5mM)
编号:BTN130912
英文名称:dATP Solution(2.5mM)
规格:2mL
dATP分子式为C10H13N5O12P3Na3,分子量是557.2,消光系数为15.2×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为259nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
北京Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)大量库存促销关键词:BTN81210,Western Blot Blocking Buffer,Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)
·柱式酵母质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN70202
英文名称:Yeast plasmid DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是专门用于提取酵母质粒DNA的产品(不适用于酵母dsRNA质粒)。本产品根据酵母细胞壁十分坚硬的特点,在细菌质粒碱裂解法的基础上,增加了高效裂解酵母细胞壁的预处理步骤,可在1小时左右得到可以用于PCR或转化酵母质粒DNA。
试剂盒特点:
1.快速,整个过程只需要一个小时左右,可同时处理多个样品。
2. 得到的酵母质粒DNA 纯度高,可直接用于转化和PCR等实验。
3.可以从平板上的菌斑或液体培养的酵母中抽提质粒DNA。
4. 安全,不需使用玻璃珠、酚、*仿等试剂。
5. 每5-10mL 酵母培养液一般可以提取到1μg左右的高拷贝酵母质粒DNA。
6. 即开即用,经济实惠,客户自己不需要准备额外的试剂。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 溶液B | 13ml |
| 溶液C | 13ml |
| 溶液D | 18ml |
| 破壁酶 | 50mg |
| RNase A溶液10mg/mL) | 0.15ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(RNase A溶液4℃保存),有效期一年。
使用方法:
1. 将5-10mL 酵母过夜液体培养物分多次转移到1.5mL塑料离心管中。每转移一次后,需要12000~15000×g室温离心1分钟,然后吸弃液体培养基。注意:不要使用培养时间超过16小时的酵母液体培养物,否则质粒DNA产量偏低;也不要使用超过10mL的酵母液体培养物,否则破壁不充分,降低质粒DNA产量。
2. 加入1mL自备的无菌水,充分震荡混匀,12000~15000×g室温离心1分钟,吸弃上清。
3. 加入600μl溶液A,充分震荡细胞沉淀重悬,95℃保温10分钟。
4. 12000~15000×g室温离心1分钟,弃上清液。
5. 加入250μl含破壁酶的溶液B(配制方法是将本试剂盒提供的50mg 粉末状的破壁酶和0.15mL RNase A溶液全部加入到装有13mL溶液B的塑料瓶中,轻柔摇晃混匀后使用。未用完的部分需要分装成小份然后放-20℃保存,否则破壁酶很容易失去活性),吹打混匀。
6. 37℃保温30分钟,延长保温时间到60分钟有利于细胞壁的裂解。注意:放置较长时间后,溶液B中的裂壁酶会逐渐失活,额外再加入一些裂壁酶(如蜗牛酶、Lyticase、Zymolyase、Lywallzyme等,总浓度为1mg/mL)可以极大提高产量。
7. 将离心管放冰浴冷却后,加入250μl溶液C,轻轻颠倒混匀直至裂解液变得澄清,然后室温放置5-10分钟。注意:不要剧烈震荡,否则基因组DNA 将断裂并污染质粒DNA。
8. 加入350μl溶液D,轻轻颠倒混匀几次,管内将出现白色沉淀物,然后冰浴放置10-30分钟(如果质粒较长,最好放置30分钟)。
9. 12000~15000×g室温离心6-10分钟,将上清液转移到离心吸附柱中。
注意:不要将漂浮在液面的沉淀物(如果有的话)转移到离心吸附柱中。上清液可以分多次转移。
10.室温下放置至少2分钟以让质粒DNA 充分结合到离心吸附柱上。
11.12000~15000×g室温离心1分钟,弃穿透液。
12. 将500μl 通用洗柱液加入离心吸附柱中,12000~15000×g室温离心1分钟,弃穿透液。
13. 重复上步操作一次。
14.12000~15000×g室温离心1分钟去除离心吸附柱中残留液体。不要此步省略,否则残留洗液将影响后续的电泳、PCR和转化实验。
15. 将离心吸附柱套在一干净的1.5mL塑料离心管中,加入30-100μl DNA 洗脱液2.0(加入的量取决于预期的DNA浓度)至离心吸附柱的膜的中央。
16.室温下放置至少2分钟。
17.12000~15000×g室温离心1分钟以洗脱DNA。
18. 如有必要,可以再加入适量DNA 洗脱液2.0洗出残留的DNA。第二次洗脱得到的DNA的产量约为第一次的30-50%。不要将已经洗脱的、含DNA的溶液再加上去。
北京Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)大量库存促销关键词:BTN81210,Western Blot Blocking Buffer,Western印迹膜封膜液(NC膜和PVDF膜)
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黄蓍树胶粉 SB3-10 9000-65-1
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呋*(代"喃")它酮 Avidin(chiken egg white) 139-91-3
PY02-426 假单胞分离肉汤 250克
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文献和实验时间:60-90 min 转膜设备: 北京六一 半干转 建议:转膜缓冲液用新鲜配制的,可先配成2倍的母液,转膜液的多少会影响电转的效率,一般将吸水纸润湿即可,不要和膜一起浸泡,这样效果很好。 蛋白来源:人肝癌肿瘤细胞 蛋白名称(可保密):notch 蛋白分子量:60-120 KDa WB用膜类型、孔径:pall NC膜 0.45 um 转膜方式(恒压、恒流):恒流 0.3 A 转膜时间:-20度冰柜120 min 转
V转移25-30分钟。转移后的凝胶放到考马斯亮蓝R-250中染色,无明显条带显示表明转移效果较满意。 3.3 封闭 在25℃条件下,PVDF膜放入封闭液中(封闭好,以防液体挥发),以每分钟60转 恒温摇床上振荡60分钟。 3.4 一抗结合 依据抗体说明书的有效浓度,使用PBST和封闭液(1:1)来配置一抗,混合均匀。(例如膜为4×7.5cm2,配制4ml GAP-43(1:400):2ml封闭液+2mlPBST+10ul抗体) 将PVDF膜放在一抗中。4?C孵育过夜
2小时。 注意,在室温下,延长反应时间,可增加靶蛋白的可检出量,但也会增加非特异性结合,加大背景噪声。 4. 洗膜。反应完毕后,将塑料袋剪开,弃去反应液,用PBS洗三次,每次10分钟。 5. 靶蛋白-一抗复合物与二抗反应 1) 将膜从PBS溶液中转至TBST溶液中,室温下轻轻震荡10分钟。 此操作是为了去除NC膜上的磷酸及叠氮钠 2) 将二抗用二抗稀释液稀释,稀释度一般为1:200-1:2000。
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