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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
668
- 英文名:
Maxi PCR Clean-Up Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的北京BTN90212型高载量PCR片段纯化试剂盒价格用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多高载量PCR片段纯化试剂盒等核酸电泳和回收产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京BTN90212型高载量PCR片段纯化试剂盒价格
规格:100次
编号:BTN90212
产地:国产|进口
本试剂盒可用于PCR产物回收,并且对于一些酶反应液回收(酶切、连接、探针标记等)也同样适用。试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅胶膜。可回收50bp-40 kb的DNA片段,回收效率可达80%。得到的DNA可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。
产品特点:
1.高效,回收效率高达90%。
2.快速,整个过程只需要十余分钟,可同时处理多个样品,节省时间。
3. 纯度高,本试剂盒回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR等多种分子生物学实验。
4. 用途广,本试剂盒能回收单链、双链及环状DNA。
5.处理量大,每个离心吸附住最多可吸附的DNA量为20μg。
6. 价格便宜,比国内绝大多数同种产品的价格便宜。
7. 储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。
试剂盒组成:
| 成分 | 100T |
| 平衡液 | 50ml |
| 通用溶胶液(专用上柱液) | 30ml |
| 离心吸附柱 | 100套 |
| 通用洗柱液 | 100ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:
1.离心吸附柱平衡:向离心吸附柱中加入500μL的平衡液,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。
2.在含DNA片段的PCR反应产物中,加入3倍体积的专用上柱液。
3. 60℃水浴5分钟。
4. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中,套上液体收集管,静置3分钟,12000rpm离心半分钟并倒掉收集管中的液体。
5. 加入700μL 通用洗柱液于离心柱中,室温静置2分钟,12000rpm离心半分钟,倒弃收集管中的废液。
6. 12000rpm离心半分钟以去除离心柱中的残留液体。
7. 将离心柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入30-50μL的通用洗脱液于离心吸附柱硅胶膜的中央,静置3分钟,12000rpm离心1分钟。
8.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
注意事项:
1.电泳回收DNA时,电泳缓冲液可以为TAE、TBE或者百奥莱博的DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2,回收效果为SuperBuffer-2 最好,TAE次之,TBE最差。
2. 专用上柱液含有容易挥发物质,请密闭保存。
3.液体转移到离心柱后,可以延长静置时间使DNA与膜充分结合,提高回收效率。
4. 加专用上柱液的作用是洗盐。
5. 洗脱 DNA前的空甩很重要,以去除膜上残留酒精,否则残留酒精会影响后续DNA反应。
6. 加 TE 洗脱DNA时,最好把离心柱放入50-65℃水浴加热,但要注意把离心管密闭好;增大TE 使用量有利于回收,但要注意实际上样量与最终回收体积的关系,以便于计算回收率。TE可以用水替代,但pH不能低于7.5。
疑难解答:
Q:为何用硅胶膜吸附柱法回收TBE胶中的DNA效果不好?
A:因为TBE中的硼*(代"酸")会跟硅胶表面的OH基团反应,而这些OH 又是吸附DNA所必需的。
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北京BTN90212型高载量PCR片段纯化试剂盒价格关键词:Maxi PCR Clean-Up Kit,高载量PCR片段纯化试剂盒,BTN90212
·DNA拓扑异构酶 I
编号:BTN120414
英文名称:DNA Topoisomerase I
规格:100U
DNA拓扑异构酶I来源于小牛胸腺,与来源于原核生物的酶性质不同,在无Mg2+的条件下也具有活性。而且,原核生物的DNA Topoisomerase I只作用超螺旋分子的负链,而本酶则能使来源于超螺旋分子正负链均形成松散型,DNA Topoisomerase I催化4种反应:
➤ 使环状超螺旋分子的超螺旋解开。
➤在单链环状DNA分子内形成绳结(Knotting)和解开绳结(Unknotting)。
➤ 催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。
➤ 2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时,发生两个分子的连结反应(Catenation)或者逆反应(Decatenation)。
产品组成:
| 成份 | 规格 |
| DNA拓扑异构酶I(5000U/mL) | 20μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| BSA,10mg/mL | 10mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在25μl反应体系,37℃条件下,15分钟内能催化超过95%的0.5μg pUC19RFI型(负超螺旋)DNA 松弛所需要的酶量。DNA超螺旋化通过不含*化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。
热灭火:65℃加热20分钟。
注意事项:
➤ pBR322 DNA和φX174 DNA的RF I(超螺旋分子)用DNA Topoisomerase I反应后电泳,胶中含*乙锭(EB)时,反应前后DNA带的位置不发生变化。这是因为由DNA Topoisomerase I作用而转换为松散型的DNA受EtBr的影响,再次变为超螺旋状态。因此,使用Topoisomerase I反应后,一般使用不含EB的琼脂糖凝胶电泳,电泳终了后再用EB染色。
➤ 如果在10×添附Buffer中直接加入0.1%小牛血清白蛋白溶液,会产生大量的白色沉淀。因此,在反应液调制时需按以下顺序添加试剂:dH2O→10×反应缓冲液→0.1% BSA→底物DNA。
➤ BSA在-20℃下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
北京BTN90212型高载量PCR片段纯化试剂盒价格关键词:Maxi PCR Clean-Up Kit,高载量PCR片段纯化试剂盒,BTN90212
·ROX内参染料(25μM)
编号:BTN100931
英文名称:ROX Reference Dye,25μM
规格:200μl
·电泳级SDS溶液(10%)
编号:BTN100881
英文名称:SDS Solution,EG
规格:250mL
本产品是电泳级的SDS溶液,专门用于配制SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE凝胶,也可用于制备变性上样液。当SDS与蛋白质的重量比超过4:1时(一般终浓度为0.1%即可),就能够打开蛋白质的二级结构,并且使蛋白质的在SDS-PAGE胶中的泳动速度只取决于分子大小。如果蛋白质含有二硫键,必须在上样液中补充足够b-巯基乙醇。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
·柱式质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN60205
英文名称:Plasmid DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是用于质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,专一结合DNA,最后洗去杂质,高效快速提取质粒DNA,全*(代"套")操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从1-5mL过夜培养的菌液纯化得到高达20μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
试剂盒特点:
1.快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。
2. 不需要预平衡离心吸附柱。
3. 洗柱液即开即用,不需要额外加乙醇。
4. 纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD 比值在1.8-2.0 之间。
5.产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
6. 用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。
7. 价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 13ml |
| 溶液B | 13ml |
| 溶液C | 18ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 0.15ml |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 离心吸附柱,6层 | 50只 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,RNase A 需要-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中,摇匀后再取用,未用完的溶液A最好在4℃保存。
2.从筛选平板上挑取单菌落至含抗生素的培养基中,37℃震荡培养12-16小时(摇床转速200-300)。注意:建议使用LB培养基,营养更丰富的培养基会使菌体浓度过高,超过纯化系统处理能力而降低DNA 质量。另外,延长培养时间有利于提高质粒DNA浓度,但是菌液培养过长时间会因细胞死亡、裂解而造成质粒DNA浓度降低。
3. 用1.5mL离心管收集1-4mL 过夜培养饱和菌液,室温12000rpm离心1分钟,弃上清,再短暂离心,吸弃残留液体。
4. 加入250μL溶液A,用枪头充分吹打使菌体重悬(此步在冰上操作效果更佳)。
注意:细胞未充分悬浮会影响后续操作,可以使用漩涡振荡器帮助混匀或使用Tip 吸头吹打沉淀至完全混匀。
5. 加入250μL溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀4-6次,看到溶液变粘即可,然后冰上放置不超过4-5分钟。注意:此步处理不能超过5分钟,否则DNA的碱损伤比较严重。同时千万不要剧烈振荡,否则基因组DNA 断裂产生的片段非常容易污染质粒DNA。溶液B用后需要将盖拧紧存放,否则空气中的二氧化碳会进入溶液,形成碳酸,中和溶液B中的NaOH,降低其效率)。
6. 加入350μL 冰上预冷的溶液C,反复颠倒混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后冰上放置至少5分钟。
7. 最高转速(12000rpm以上)4℃离心5分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。如果此步的离心在室温进行,更容易出现沉淀物漂浮的现象。
8. 静置2分钟以让质粒DNA与吸附柱充分结合,此步十分重要。
9.室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中的废液。
10. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中废液。
注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。
11. 重复上步1次。
12.室温12000rpm离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
13. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入30-100μL65-80℃预热的DNA 洗脱液2.0,室温放置2分钟。常温的DNA 洗脱液2.0也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。
14.室温12000rpm离心1分钟,离心管底溶液即质粒DNA。
15. 由于百奥莱博的吸附柱结合DNA 能力较强,如果再加适量DNA 洗脱液2.0 到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多质粒DNA(相当于第一次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的DNA洗脱液2.0来洗脱。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京BTN90212型高载量PCR片段纯化试剂盒价格。
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