北京动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书
产地：国产|进口
规格：50次
编号：BTN90707
本产品用于快速提取动植物总蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。

产品特点：
1. 提取过程十分简便，匀浆离心即可，整个过程只需要十几分钟。
2. 采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。
3.适用于各种动植物组织材料，包括新鲜或冰冻的材料。
4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。
5.一次可以处理100mg左右的样品，足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
5×SDS-PAGE上样液	1ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存，长期可放-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
使用前，最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。

一：匀浆法
 注意：对致密的实体组织(如肌肉)，最好用Polytron 式匀浆机匀浆处理。
1. 称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到10-15mL的塑料离心管中。
2. 加入1ml溶液A，在冰上用Polytron 式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

二：直接研磨法
 注意：可以使用玻璃和陶瓷的研钵，也可以使用与微量离心管式的研磨杵(BTN80603)
1. 称取动物或植物组织样品100mg，剪刀剪成黄豆大小，转移到预冷的研钵或离心管中。
2. 加入1ml溶液A，用研磨杵研磨，直到没有肉眼可见的组织块。
3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

三：液氮研磨法
 注意：最好使用玻璃和陶瓷的研钵
1. 取大约100mg动物或植物组织样品，转移到预冷的研钵中。
2. 加入少量液氮，用研磨杵研磨成粉。
3. 加入1ml溶液A溶解，然后将溶液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。
4. 4℃ 12000 g离心10分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度，请使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把样品稀释10倍后再测定，否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳，可取部分到离心管中，加入5× SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×)，在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

注意事项：
1．如果4℃ 12000g离心10分钟后得到的上清液中还有可见的沉淀，可以将上清转移到一个新的离心管中后再4℃ 12000g离心10分钟，以去除可见的小碎片。
2．植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物，如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质，可以在最后得到的上清液中加入5倍体积的冷丙*(代"酮")或冷甲醇，混匀后-20℃放置1小时或过夜，然后4℃,12000rpm离心10min，弃上清后室温风干，然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后，部分蛋白质可能会发生变性，不能再用于活性检测。

北京动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·链脲佐菌素溶液
编号：BTN120701
英文名称：Streptozotocin Solution
规格：10mL
本产品浓度为10mg/mL的链脲佐菌素溶液。链脲佐菌素，又称链脲菌素；N-(Methylnitrosocarbamoyl)-α-Dglucosamine；STZ),分子式：C8H15N3O7，分子量：265.22，CAS号：18883-66-4。链脲佐菌素是一种*基葡萄糖-亚硝基脲，是一种DNA烷基化试剂，能通过GLUT2葡萄糖转运蛋白(GLUT2 glucose trasport protein)独自进入细胞，可以对实验动物能产生糖尿病，用于建立糖尿病模型。STZ需要用柠檬酸和柠檬酸*配制而成的pH4.2缓冲液配制。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期6个月。

·酵母生产及产孢培养基
编号：BTN130901
英文名称：Growth and Sporulation Medium
规格：250mL
本产品由1% KOAc、2%琼脂、0.1%酵母提取物、0.05%葡萄糖组成，用于酵母营养生长3-5天后再产孢。如果二倍体细胞是营养缺陷性，则还需要补充加入营养成分。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

·真菌RNA提取试剂盒
编号：BTN60305
英文名称：Fungal large-scale extraction kit
规格：50次
本试剂盒专门用于从常见的各种真菌和革兰氏阳性细菌中快速提取总RNA，提取过的真菌包括Candida albican，Saccharomyces cerevisiae，Schizosaccharomyces pombe和Pichia pastoris、Aspergillus flavus等。

试剂盒特点：
1. RNA 纯度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
2. RNA产量高，一般在20-70μg/mL 酵母培养物(约2.0×107个细胞)
3. 操作简单，整个过程只需要约30分钟。
4. 最大处理量为10mL 酵母。
5. 固体培养基上的真菌菌落也可以直接用于提取。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	20ml
溶液B	25ml
溶液C	50ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将50mg左右的干菌丝(或100mg左右的鲜菌丝、或适当数量的真菌菌落或革兰氏阳性细菌)转移到1.5mL塑料离心管中。如果是液体真菌培养物，则直接将1-10mL液体真菌在1.5mL塑料离心管中12000～15000g离心 1分钟，并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.4mL溶液A并充分吹打混匀。如果A溶液存放时产生沉淀，请置于65℃融化，用前充分摇晃均匀。
3. 加入0.4mL溶液B，剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。
5.室温 12000～15000g离心3～5分钟，转移上清到一干净的1.5mL塑料离心管中.
6. 再加入0.1mL溶液B和0.1mL自备*仿，振荡混匀30秒。
7.室温 12000～15000g离心3～5分钟，转移上清到一干净的1.5mL塑料离心管中。
8. 加入两倍体积(约0.8-1mL)的溶液C，充分混匀。
9.室温 12000～15000g离心离心3-10分钟，RNA 将在管底形成沉淀，小心弃上清。
10. 加自备的75%乙醇，振荡器上振荡混均30秒。
11.室温 12000～15000g离心1分钟。
12.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
13. 重复 75%乙醇洗涤步骤一次。
14. 短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留液(约50μL)。
15. 短暂放1-2分钟后加入100μl左右的RNA-free 水使RNA沉淀溶解，可以立即使用或存放于-80℃长期保存。
16. RNA 完整性的电泳检测：
 如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。如果是简单检测，可以使用TAE或百奥莱博的SuperBuffer-2 DNA/RNA 两用快速电泳液，但文献报道必须使用变性上样液(BioTechniques，9:558，1990)。普通DNA上样液不含变性剂，也没经过去RNase处理，所以最好不要使用。尤其需要注意的是不要使用TBE进行RNA电泳，因为TBE 所含硼*(代"酸")是研究多糖的经典方法----硼*(代"酸")络合法中的关键成分，硼*(代"酸")通过与RNA核糖中的羟基发生络合反应，形成RNA分子内或RNA分子间的络合复合物，使同样长度的RNA 具有不同的泳动速度，电泳条带弥散，同时有大的RNA 络合复合物迟留在加样孔中(一般会误以为是基因组DNA污染)。RNA分子内或RNA分子间的络合物的形成的多少和比例又与硼*(代"酸")与RNA的数量比例有关，而RNA样品中污染的其他多糖也会参与此反应，使硼*(代"酸")对RNA电泳的影响更复杂，所以TBE 对RNA电泳的影响没有规律性和重复性。有的样品可以使用有的又不行，最好是避免使用。
17. RNA产量产率测定：
 将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280，否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%。
18. RNA 纯度测定：
 无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，OD260/OD230一般在2.0-2.3 之间，如果低于或高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质或多糖的污染，但一般不影响RT-PCR等反应。蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除，DNA和多糖污染可以分别用百奥莱博的DNA Scavenger和PS Scavenger 去除。

疑难解答：
Q：为何从酵母中提取的总RNA 有3 条小带？
A：它们分别是70bp左右的tRNA，120bp左右的5 S RNA，160bp左右的5.8 S RNA。
Q：上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶，也必须在上样前使RNA/变性。使用百奥莱博优化的上样变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA
在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时，可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2，最好不要使用TBE缓冲液，因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物，RNA 很难形成锐利的条带。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。


北京动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书关键词：BTN90707,动植物总蛋白微量提取试剂盒,Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit

PY01-082  胃蛋白胨  250克  
ARB11590 人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)免费代测 Human lumican,lum ELISA KIT
ZCNXQ02 超级胎牛血清 500ml
反式-1,2-环己二胺四乙酸 Adipic acid 125572-95-4
ARB14109 黄曲霉毒素B1(AFB1)检测服务 
三十烷醇 L-Aspartic acid 593-50-0
ARB11215 人细胞角蛋白13(CK-13)elisa检测 Human cytokeRatin 13,ck-13 ELISA KIT
**(代"胺")黑染色液(0.55%)   100ml
CYB163009 羊抗人IgM-RBITC(μ链特异)
对硝基*(代"*")基-β-D-吡喃葡萄糖苷 D-(?)-Arabinose 2492-87-7
ARB11192 人艰难梭菌毒素A(ClostrIdIum dIffIcIle toxIn A)Elisa定量检测 含量
蛋白酶K Epoxy-activated Sepharose 6B 39450-01-6
ARB10511 人白细胞介素27(IL-27)酶标法分析 Human interleukin 27,IL-27ELISA KIT
ARB12964 小鼠血管紧张素转换酶(ACE)免费代测 Mouse angiotensin converting enzyme,ace ELISA KIT
天狼星红染色液-A液   100ml
北京动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书关键词：BTN90707,动植物总蛋白微量提取试剂盒,Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit


·PCR污染清除剂
编号：BTN140648
英文名称：DNA Contamination Scavenger
规格：250mL
微量核酸污染导致的PCR假阳性是广大实验者最头痛的问题之一。为解决此难题，本公司开发了本款PCR污染清除剂，本产品无毒、无腐蚀性，可将裸露的核酸完全降解至无法作为扩增模板的小片段，且无法恢复，从而彻底消除PCR 过程中由于各种环境污染而导致的假阳性扩增。

产品特点：
1．本产品为非酶类试剂，所有组分可生物降解、无毒无害。不含有机溶剂或者挥发性物质，不含无机酸或者碱性物质，不会对金属形成腐蚀。
2．产品中各组分协同作用，快速、非序列特异性的降解核酸污染。
3．使用简单，操作方便。喷洒或浸泡处理15分钟即可完成清除作用。
4．可广泛用于清除实验操作台、仪器、塑料和玻璃器皿、移液器、解剖刀、镊子、手套等各种实验器材表面的DNA污染。
5．与传统的PCR污染清除方法，如：稀酸处理法、紫外照射法、尿嘧啶糖苷酶(UNG)法和酶解变性等相比，本产品具有能彻底破坏DNA分子、有效清除小片段核酸等优点。

储存条件：常温运输和保存，有效期两年。

使用方法：
注意：以下操作均需要戴手套进行。本产品可重复使用5-10次，使用后建议密封保存。

工作平台的清洁：
直接将本产品喷于台面，最少15分钟后用普通吸水纸擦净，最后用吸水纸擦净，晾干。
实验仪器的清洁：
用浸有本品的纸擦拭仪器表面，再用吸水纸擦净，晾干。用本品处理金属器械的时间不能超过15分钟。
玻璃和塑料器皿的清洁：
将器皿浸泡在本产品中，静置处理最少15分钟后取出，再用蒸馏水浸泡二次以上，倒立晾干后备用。
移液枪的清洁：
根据生产厂家的使用手卸下移液枪的前端，留下接口塞和圈套后将其浸放在本产品中最少15分钟，再用蒸馏水彻底冲洗后，晾干，装回移液枪。
塑料离心管和滴头的清洁：
将反应塑料离心管和滴头充分浸泡在本产品中最少15分钟以上(最好不要有气泡)，然后蒸馏水充分浸泡两次，试管或离心管可立即使用或干燥后备用。

我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购北京动植物总蛋白微量提取试剂盒说明书。