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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
RIPA Lysis Buffer (Strong)
- 库存:
677
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖RIPA裂解液(强)怎么卖在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:RIPA裂解液(强)怎么卖
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:100ml
英文名:RIPA Lysis Buffer (Strong)
编号:SY0302
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),其本意是Radio Immunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用。根据其裂解液的强度不同,大致可以分为强、中、弱三类。
本品为裂解强度相对较强的RIPA裂解液(强),含有sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
使用说明:
(一) 培养细胞样品:
1)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
【注】:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
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RIPA裂解液(强)怎么卖关键词:RIPA裂解液,RIPA裂解液(强),SY0302,RIPA Lysis Buffer (Strong)
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·咪唑
编号:SY0391
英文名称:Imidazole
规格:100g
咪唑,一种常用生化试剂,特别适用于pH 6.2-7.8范围内的缓冲液,也是一种二价金属离子螯合剂。在蛋白纯化中,咪唑可作为洗脱组分用于洗脱含多聚组*酸的蛋白或多肽,以及用于蛋白检测等。
中文别名:1,3-二氮杂-2,4-环戊二烯 甘恶啉
CAS:288-32-4
分子式:C3H4N2
分子量:68.08
外观:无色或白色结晶
纯度:≥99.0%
溶解性:溶于水
熔点:86-90℃
pH值(pH Value):9.5~11.0
储存条件:室温,有效期2年
·C/EBPa--Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0090
英文名称:C/EBPa luciferase reporter plasmid
规格:1μg
C/EBPa荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(C/EBPa luciferase reporter plasimd)是用于检测C/EBPa转录活性水平为目的的报告基因。C/EBP(CCAAT enhancer binding proteins)是一组耐热的转录因子,主要对调控有丝分裂生长停滞和分化。
C/EBPa报告基因主要检测细胞中C/EBPa调节信号通路的活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMC/EBPa-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个C/EBPa结合位点,可以高灵敏度地检测C/EBPa的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得C/EBPa报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
pGMC/EBPa-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
储存条件:-20℃。
我公司正在火爆促销蛋白质研究系列产品,欢迎您的垂询选购RIPA裂解液(强)怎么卖。
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2,左条带为使用普通强裂解液提取的蛋白样品,右条带为柱式法提取的蛋白样品,可见使用柱式法法提取的样品胶孔中可明显改善样品滞留、拖带的情况发生。 图 2:同种样品分别使用裂解液法和柱式法进行 WB 样品制备,SDS-PAGE 电泳后考染图 图片来源:英文特 WB 蛋白样品制备过程中出现样品粘稠的情况并不代表样品提取失败,而是样品裂解较为充分的表现,但是如果放任不管则会引发一系列连锁效应,最终导致 WB 实验失败。选择合适的方法进行处理。成功获得高质量的蛋白样品,是 WB 实验成功必不可少
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