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- 详细信息
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372
- 英文名:
Antibody Stripping buffer(Neutral)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:250ml
编号:YT073
英文名:Antibody Stripping buffer(Neutral)
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约20-30分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。
百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
抗体清除剂选型表:
| 产品编号 | YT071 | YT072 | YT073 | YT074 |
| 产品名称 | Western一抗二抗清除剂(强碱性) | Western一抗二抗清除剂(弱碱性) | Western一抗二抗清除剂(中性) | Western一抗二抗清除剂(酸性) |
| 产品包装 | 250ml | 250ml | 250ml | 250ml |
| pH | 强碱性 | 弱碱性 | 中性 | 酸性 |
| 对于膜上蛋白的保留效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
| 对于一抗二抗的去除效果 | 好 | 好 | 好 | 好 |
| 去除一抗二抗所需时间 | 15-20分钟 | 20-30分钟 | 20-30分钟 | 40-80分钟 |
| 适用膜的类型 | PVDF和NC | PVDF和NC | 仅PVDF | PVDF和NC |
| 腐蚀性 | 强 | 弱 | 无 | 弱 |
用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜,即硝酸纤维素膜时,不宜选用YT071N。从时间角度考虑,强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短,可以优先考虑。从价格因素考虑,强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑,中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作,并进行适当防护,使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
对于特定的抗原和抗体,很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时,可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液,以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。
注意事项:
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
2. 本Western一抗二抗去除液仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。
储存条件:-20℃,有效期一年。
欲了解更多Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测关键词:中性,Western一抗二抗清除剂,Western一抗二抗清除剂(中性),YT073,Antibody Stripping buffer(Neutral)
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BTN130861 φX174RF Ⅱ DNA φX174RF Ⅱ DNA
298-96-4 TTC 2,3,5*化三*基四氮唑
DNA Marker I(100~600bp)
Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测关键词:中性,Western一抗二抗清除剂,Western一抗二抗清除剂(中性),YT073,Antibody Stripping buffer(Neutral)
·Hoechst 33258细胞蓝色荧光染料
编号:YT892
英文名称:Hoechst 33258
规格:10mg
本品Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。
Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
Hoechst 33258的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33258和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm,最大发射波长为461nm。
Hoechst 33258溶于水,溶解度可达10mg/ml。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。
CAS:23491-45-4
分子式:C25H24N6O·3HCl
分子量:533.88
注意事项:
1. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
2. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(YT097)可以向百奥莱博订购。
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
·PARP抗体
编号:YT155
英文名称:anti-PARP antibody
规格:>20次
本抗体是用人工合成的PARP中一段包含Caspase剪切位点的多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化而得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测至少可以检测20次。
本PARP抗体可以识别全长的116kD PARP,也可以识别经Caspase剪切产生的89kD和24kD PARP片段。未发现和其它相关蛋白有交叉反应。
PARP,即poly(ADP-ribose)polymerase,是定位在细胞核内,和应激条件下DNA修复密切相关的一种酶。PARP在体外可以被多种Caspase剪切,在体内是Caspase 3的主要剪切对象。对于人PARP,在Asp124和Gly215之间被Caspase剪切后,使PARP羧基端的催化结构域(89kD)和*基端的DNA结合结构域(24kD)相分离,从而使PARP失去其酶活力。PARP对于细胞的稳定和存活非常重要,PARP失去酶活力会加速细胞的不稳定。
PARP剪切被认为是细胞凋亡的一个重要指标,也通常被认为是Caspase 3激活的指标。
产品组份:
PARP抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原:人工合成的PARP中一段包含Caspase剪切位点的多肽
宿主:兔
用途:WB
交叉反应性:人,小鼠,大鼠
抗体识别位点:Caspase剪切位点
PARP分子量:116/89/24kD
推荐稀释比例:WB(1:1000)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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