Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测

Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月11日
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      372

    • 英文名

      Antibody Stripping buffer(Neutral)

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。


    名称:Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口
    规格:250ml
    编号:YT073
    英文名:Antibody Stripping buffer(Neutral)
    本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。

    使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本Western一抗二抗去除液,经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约20-30分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的Western操作。

    百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。

    抗体清除剂选型表:


    产品编号 YT071 YT072 YT073 YT074
    产品名称 Western一抗二抗清除剂(强碱性) Western一抗二抗清除剂(弱碱性) Western一抗二抗清除剂(中性) Western一抗二抗清除剂(酸性)
    产品包装 250ml 250ml 250ml 250ml
    pH 强碱性 弱碱性 中性 酸性
    对于膜上蛋白的保留效果
    对于一抗二抗的去除效果
    去除一抗二抗所需时间 15-20分钟 20-30分钟 20-30分钟 40-80分钟
    适用膜的类型 PVDF和NC PVDF和NC 仅PVDF PVDF和NC
    腐蚀性


    用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜,即硝酸纤维素膜时,不宜选用YT071N。从时间角度考虑,强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短,可以优先考虑。从价格因素考虑,强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑,中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作,并进行适当防护,使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
      对于特定的抗原和抗体,很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时,可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间,同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液,以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。

    注意事项:
    1. 使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
    2. 本Western一抗二抗去除液仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。
    3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测,例如DAB,NBT/BCIP,不适用于本试剂。

    储存条件:-20℃,有效期一年。

    欲了解更多Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
    F010207 小鼠抗鸭IgG(IgY)抗体 Monoclonal Mouse Anti-Duck IgG(IgY)
    ARB10300 人不透光相关蛋白(OPAs)含量测试 Human opacity-associated proteins,opas ELISA KIT
    F030223 HRP标记兔抗猴IgG抗体 Rabbit Anti-monkey IgG*HRP
    昆虫膜蛋白提取试剂盒 Insect membrane protein extraction kit  50T|100T
    SuperReal荧光定量预混试剂彩色版(SYBR Green) 
    BTN101123 PVDF膜 PVDF Membrane(Millipore)
    BTN131064 细胞表面蛋白分离试剂盒 Bacterial Surface Protein Isolation Kit
    SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)   100ml|500ml
    BTN60912 非酶RNA清除剂2.0 RNA Erasol 2.0
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    F030418 胶体金标记兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG*GOLD
    Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测关键词:中性,Western一抗二抗清除剂,Western一抗二抗清除剂(中性),YT073,Antibody Stripping buffer(Neutral)

    磷酸烯醇丙*(代"酮")酸单环己铵盐 3,5-Dimethyl-1H-pyrrole-2-carbaldehyde 10526-80-4
    ARB11674 人维生素K1(VK1)检测服务 Human vitamin k1,vk1 ELISA KIT
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    DL-正缬*酸 Phenylpyruvic acid 760-78-1
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    DP320 新型植物基因组提取试剂盒
    PC4401 THERMOscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit(第一链耐热反转录试剂盒)
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    酚酞-尼罗蓝指示剂   100ml
    BTN130618 T7 DNA聚合酶(未修饰) T7 DNA Polymerase(unmodified)
    BTN130861 φX174RF Ⅱ DNA φX174RF Ⅱ DNA
    298-96-4 TTC  2,3,5*化三*基四氮唑
    DNA Marker I(100~600bp) 
    Western一抗二抗清除剂(中性) 免疫检测关键词:中性,Western一抗二抗清除剂,Western一抗二抗清除剂(中性),YT073,Antibody Stripping buffer(Neutral)


    ·Hoechst 33258细胞蓝色荧光染料
    编号:YT892
    英文名称:Hoechst 33258
    规格:10mg
    本品Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。

    Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。

    Hoechst 33258的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33258和双链DNA结合后,最大激发波长为352nm,最大发射波长为461nm。

    Hoechst 33258溶于水,溶解度可达10mg/ml。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。

    CAS:23491-45-4
    分子式:C25H24N6O·3HCl
    分子量:533.88

    注意事项:
    1. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
    2. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(YT097)可以向百奥莱博订购。

    储存条件:-20℃避光,有效期一年。

    ·PARP抗体
    编号:YT155
    英文名称:anti-PARP antibody
    规格:>20次
    本抗体是用人工合成的PARP中一段包含Caspase剪切位点的多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化而得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测至少可以检测20次。

    本PARP抗体可以识别全长的116kD PARP,也可以识别经Caspase剪切产生的89kD和24kD PARP片段。未发现和其它相关蛋白有交叉反应。

    PARP,即poly(ADP-ribose)polymerase,是定位在细胞核内,和应激条件下DNA修复密切相关的一种酶。PARP在体外可以被多种Caspase剪切,在体内是Caspase 3的主要剪切对象。对于人PARP,在Asp124和Gly215之间被Caspase剪切后,使PARP羧基端的催化结构域(89kD)和*基端的DNA结合结构域(24kD)相分离,从而使PARP失去其酶活力。PARP对于细胞的稳定和存活非常重要,PARP失去酶活力会加速细胞的不稳定。

    PARP剪切被认为是细胞凋亡的一个重要指标,也通常被认为是Caspase 3激活的指标。

    产品组份:
    PARP抗体————20μl
    Western一抗稀释液————20ml

    抗体参数:

    免疫原:人工合成的PARP中一段包含Caspase剪切位点的多肽
    宿主:兔
    用途:WB
    交叉反应性:人,小鼠,大鼠
    抗体识别位点:Caspase剪切位点
    PARP分子量:116/89/24kD
    推荐稀释比例:WB(1:1000)

    注意事项:
    1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
    2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
    3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

    储存条件:-20℃,有效期一年。



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